植物检疫实验室结果质量控制的研究

本文从植物检疫实验室质量控制的角度，对植物检疫实验室检测鉴定结果有影响的人员、设备、设施及环境条件、参照物质、样品、检疫鉴定方法和结果复核等因素进行了全面分析。并从内部质量控制和外部质量控制两个方面，提出了针对这些影响因素应采取的相应措施，确保实验室的检测鉴定结果准确可靠，防止有害生物逃逸和扩散。     

植物检疫实验室结果质量控制的研究

本文从植物检疫实验室质量控制的角度,对植物检疫实验室检测鉴定结果有影响的人员、设备、设施及环境条件、参照物质、样品、检疫鉴定方法和结果复核等因素进行了全面分析。并从内部质量控制和外部质量控制两个方面,提出了针对这些影响因素应采取的相应措施,确保实验室的检测鉴定结果准确可靠,防止有害生物逃逸和扩散。     

应用LNA-TaqMan探针实时荧光PCR检测大米制品中转基因成分

大米制品中痕量转基因成分的检测需要特异和超灵敏的检测方法。本研究以行业标准中转基因大米筛查位点CaMV35S启动子、NOS终止子和Cry1A基因为目标,利用在常规TaqMan探针中掺入锁核苷酸提高探针退火温度和杂交特异性等特点,经比较以上位点不同LNA-TaqMan探针实时荧光聚合酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）检测效果,建立了针对上述筛查位点的基于LNA-TaqMan探针的新型实时荧光PCR检测方法。该方法特异性强,检测灵敏度超高;与普通TaqMan实时荧光PCR方法相比,其反应Ct值可提前1～3 个循环（Cry1A位点除外）,检测低限可达3 pg。该检测方法可以用以检测大米制品中常规实时荧光PCR难以检测到的痕量转基因大米成分。     

植物检疫实验室人员能力评价的研究

人员能力评价是植物检疫实验室质量控制中的重要环节之一,本文客观地、全面地提出植物检疫实验室人员素质所需的要素,将模糊数学及层次分析原理有机地融合,建立一种科学的、公正的人员定量评价方法,可为实验室合理地管理人力资源,有效地保证质量提供强有力的技术措施.     

微滴式数字PCR定量检测转基因玉米品系VCO-01981-5

建立基于QX100微滴式数字聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)平台的我国未批准转基因玉米品系VCO-01981-5的二重微滴式数字PCR定量检测方法。该方法选择基因组中单拷贝的玉米内源基因hmg和VCO-01981-5品系边界序列为定量靶序列,分别设计不同的PCR扩增引物和TaqMan探针,并对两种探针用不同的荧光进行标记,然后将上述探针和引物置于同一个PCR反应体系中以同时定量两个靶标序列。特异性实验结果显示该法只有VCO-01981-5品系的两个靶序列才都有扩增信号。灵敏度、线性和准确性实验结果显示在定量结果相对标准偏差不大于25%时,最低可稳定定量5个拷贝的VCO-01981-5品系特异性序列分子和4个拷贝的内源基因hmg分子;而在高达50 ng模板DNA以下范围内,PCR反应模板量与测定样品拷贝数之间呈高度正相关,相关系数达0.99以上;平均误差小于10%。结果表明本研究建立的该玉米品系定量方法特异性强,稳定性好,精确性、准确性以及灵敏度高,定量范围广,可用于进、出口农产品和食品中该转基因玉米品系成分的定量检测。此外,该法还可为其他转基因玉米品系及其他转基因作物品系建立类似定量检测方法提供参考。     

植物检疫实验室人员能力评价的研究

人员能力评价是植物检疫实验室质量控制中的重要环节之一,本文客观地、全面地提出植物检疫实验室人员素质所需的要素,将模糊数学及层次分析原理有机地融合,建立一种科学的、公正的人员定量评价方法,可为实验室合理地管理人力资源,有效地保证质量提供强有力的技术措施。