花鲈肿瘤坏死因子基因及其在LPS和病毒刺激下表达的研究

采用同源克隆和锚定PCR技术，从花鲈(Lateolabrax Japonicus)中克隆到肿瘤坏死因子α(Tumor necrosis factorα，TNFα)cDNA的全序列。花鲈TNFα的cDNA全长990bp，3′非编码区域(UTR)为192bp，5′UTR为72bp，开放阅读框(ORF)为723bp，可编码241个氨基酸，分子量大约为26kDa。同源性分析表明该序列与其他鱼类甚至哺乳动物的TNFα基因具有很高的相似性，并含有TNF家族的签名序列(signature)。同时，利用RT—PCR技术，对不同刺激下该基因在鱼体内的表达情况进行了初步研究，发现TNFα基因在未受刺激鱼体的头肾和脾脏中有明显的表达。脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)和虹彩病毒(Iridovirus)都可以诱导TNFα基因高水平的表达，但是在不同组织内的表达存在差异。LPS刺激后表达较强的组织是头肾和睥脏，而病毒感染后TNFα在盱脏中的表达较强。研究结果表明花鲈TNFα基因存在组成型和诱导型两种表达调控机制，在抵御病原感染过程中发挥重要作用。     

黑鲷(Acanthopagrusschlegeli)CXC型趋化因子的体外表达及其生物学活性

采用DNA体外重组技术,将一个黑鲷CXC趋化因子基因亚克隆到pQE30表达载体并转化到大肠杆菌(M15)中诱导表达后,利用pH递降的缓冲液从金属亲和柱洗脱含6xHis标签蛋白的方法得以纯化,纯化产物的分子量约为8kDa,表达量约占蛋白总量的25%,以6xHis单抗为一抗,采用Western-blotting方法鉴定获得的蛋白为目的蛋白.对表达产物进行生物活性鉴定表明,该蛋白具有显著的嗜中性粒细胞和巨噬细胞的趋化活性(P<0.01,P<0.05),它对嗜中性粒细胞和头肾巨噬细胞的趋化能力呈剂量依赖性,且对嗜中性粒细胞的趋化能力大于对头肾巨噬细胞的作用,还能诱导改变嗜中性粒细胞和巨噬细胞对细菌的吞噬活性,但对嗜中性粒细胞吞噬能力的改变小于巨噬细胞.该趋化性因子在结构和功能上属不完全ELR CXC型趋化因子,兼具ELR CXC和ELR-CXC趋化因子的活性,是一种不成熟ELR CXC型趋化因子.     

关于"什么是马克思主义、怎样对待马克思主义"的审视——基于中国人民大学24名马克思主义一级学科博士生的讨论

"什么是马克思主义、怎样对待马克思主义"是一个随着实践的发展而不断丰富、深化并具有根本性、全局性的话题.对于这个话题,不同的人有不同的解读.为了进一步了解、掌握这个问题,本文在大家讨论的基础上,进一步探讨了"什么是马克思主义"、"怎样对待马克思主义",并就当下中国的现实给出一些启示.     

栉孔扇贝脂多糖葡聚糖结合蛋白(LGBP)基因的克隆及其特征分析

作为模式识别蛋白的脂多糖葡聚糖结合蛋白(Lipopolysaccharide and beta-1,3-glucan binding protein,LGBP)在无脊椎动物的免疫系统中发挥着重要作用。本研究以鳗弧菌作为病原感染栉孔扇贝,构建全个体cDNA的质粒文库,用T3引物对文库进行随机测序得到一个667bp的cDNA片段(编号：c1305ct320cn336),它与普通蚯蚓的体腔裂解因子前体基因、海胆的β-1,3-葡聚糖酶、非洲疟蚊的革兰氏阴性细菌结合蛋白等有同源性。用T7引物对该克隆测序得到其3’末端。通过SMART-RACE技术克隆得到该克隆的全长cDNA序列。栉孔扇贝LGBP基因由1850个核苷酸组成,它有一个poly A尾巴,编码一条440个氨基酸的多肽。该多肽的分子量估计为47159．076Da,等电点为5．095。推导的氨基酸序列与蓝虾、斑节对虾、海胆、非洲疟蚊、淡水螫虾、普通蚯蚓及普通红蚯蚓等无脊椎动物模式识别蛋白具有高度的同源性。经用Garnier法预测,栉孔扇贝LGBL的二级结构包含螺旋构象10％,折叠片构象17％,转角构象21％,无规则卷曲53％,各种构象所占比例与普通红蚯蚓的体腔裂解因子前体相近。     

关于±1次衍射莫尔信号的数值仿真的研究

通过对±1激光莫尔信号进行建模和仿真,研究其规律为精密定位提供依据。该文应用激光衍射理论研究了±1次莫尔信号的位移特性,根据菲涅耳和夫琅和费衍射原理建立了±1次莫尔信号与对应位移的数学模型,并通过计算机仿真对其变化规律进行研究。仿真结果表明,±1次莫尔信号具有稳定的周期性,非常适合作为精密定位的检测信号。在此基础上利用±1次激光莫尔信号进行了精密定位实验,结果表明基于±1次衍射莫尔信号的精密定位可获得±0.5μm的定位精度。     

我国各级政府有效应对网络舆情的多维度思考

在以互联网、手机等为代表的新兴媒体的影响日益扩展的态势下,如何有效地应对网络舆情成为各级政府必须面对的问题.基于这样的视角,以系统性的思维多维度地探讨我国政府有效应对网络舆情的对策就尤为必要.各级政府应该准确把握网络舆情的基本内涵,明确界定网络舆情应对的基本原则,深入探讨网络舆情的形成发展规律.并且还要充分发挥网络"意见领袖"的影响,加强应对网络舆情的队伍建设及相应的体制机制建设.     

基于ARM9的船载海水监测系统设计

为满足对海岸线水域监测海量数据的需求,设计一种随航船运行的海水参数测量系统。该系统在ARM9平台上,对电源、通信接口、控制接口及A/D等硬件电路进行了扩展,并通过EVC 4.0编写的应用程序实现自动控制,依次完成对水质参数的测量,对GPS定位参数的读取,通过GPRS短信发送终端将数据发送到数据中心,以及将数据存储在机带SD卡中等工作。系统可同时完成8路A/D转换,适于多种海水参数的测量,体积小,应用灵活,且自带LCD触摸屏,操作方便。由Visual Studio 2010中C#编写的数据中心PC程序,是整个系统的一部分。以GPRS为载体,实现了远程数据传输及简单的远程控制。     

新形势下电力市场营销策略分析

电力市场营销策略的制定是为了保证电力市场销售目标的顺利实现而采取的有计划的经营活动。在新形势下,电力企业要满足市场需求的多元化特性,不断改进营销理念,以客户的需求为切入点,以提供高质服务为载体,以充分满足各类用户群的需求为目的,进一步开拓市场,促进电力企业经济效益的提升。     

勃农2BQZ-7型气吸式精密播种机

勃农2BQZ-7型气吸式精密播种机(见图1),是同大型拖拉机配套使用的全悬挂式播种机具,可一次完成深施肥、开沟播种、覆土和镇压等作业,并可同时进行中耕     

真鲷肿瘤坏死因子(TNFα)基因的体外重组与纯化研究

将真鲷肿瘤坏死因子(TNFα)基因的成熟肽区域克隆到表达载体pQE30中,并转化到大肠杆菌XL-blue中进行表达。转化子经载体和基因特异性引物进行PCR双向筛选,并将筛选到的阳性克隆经质粒纯化后,进行序列测定。序列测定结果显示,该基因结构正确,且准确插入到表达载体启动子的下游,获得了结构和组成正确的重组子。重、组子经IPTG诱导后,以SDS-PAGE电泳鉴定,电泳结果表明,该基因在大肠杆菌XL-blue中实现了表达。通过对诱导条件的调整,在体外获得了高效表达的重组蛋白,高效表达的重组蛋白约占菌体蛋白的25％-30％。不同诱导时间对重组蛋白影响实验显示,随诱导时间的增加,重组蛋白产量逐渐增高,经4h诱导,其表达量可以达到平台期,过长时间的诱导,对表达产量没有影响。重组蛋白经镍金属亲和层析纯化,获得了纯度较高的重组蛋白。采用交换缓冲液的方法,用Sephadex G150,对重组蛋白进行脱盐复性,使重组蛋白得到了进一步纯化。