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沟通无小事.几年前相继发生在东海平湖油气田海上平台的两起安全事故,中海油上海分公司全体员工至今仍记忆犹新:第一次是由于氧气瓶和氮气瓶标识不清,而且交接班工作没有到位,归根结底是有效沟通问题,误将氧气作为氮气,注入气井中,氧气和天然气混合后,达到爆炸浓度范围,使气井井口发生爆炸并起火,所幸大火及时扑灭,没有造成严重后果;第二次是在生产测井过程中,电缆防喷管的防喷盒由于密封失效发生少量天然气体泄漏,但天然气完全处于测井作业人员的控制之中,不会发生井喷事故,但平台生产操作人员认为这是井喷的前兆,于是不管三七二十一,从安全考虑,关闭井口采油树全部阀门和井下安全阀,剪断电缆,造成带有放射源的测井工具落井的井下事故,这完全是由于测井作业人员和平台生产人员在作业井关井程序方面缺乏有效的沟通而造成的.…… 相似文献
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为了制备高纯度的白喉毒素无毒突变体CRM197,可作为载体蛋白用于细菌性结合疫苗开发,对CRM197基因进行大肠杆菌密码子优化,并克隆至表达载体pET28a(+）中,将鉴定正确的重组质粒pET28a-CRM197转化到大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达,并分析其表达形式及表达条件的优化。再对表达的重组CRM197蛋白进行纯化,最后对纯化的CRM197进行WB、纯度、分子量和圆二色谱等检测项目的初步鉴定分析。PCR酶切和测序鉴定结果表明重组质粒pET28a-CRM197构建成功,将其转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,获得重组工程菌(E.coli(DE3/p28a/197)。该重组工程菌发酵的最佳接种量为5%～10%(v/v),且主要以包涵体形式表达,收获的菌体在高压均质机破碎压力为1 000 bar的条件下进行破碎,然后利用6 mol/L盐酸胍进行溶解变性,复性及经30 kD超滤膜包超滤后上纯化系统AKTA pure150 M,经一步阴离子交换层析进行纯化,其纯度可达98%以上,WB、分子量及圆二色谱等鉴定结果均与标准品一致。综上所述,成功建立大肠菌表达系统CRM197制备... 相似文献
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