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[目的]构建敲除传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP5蛋白跨膜区序列的原核表达载体,并进行目的蛋白的表达、分离和纯化.[方法]利用PCR技术分别扩增IBDV VP5基因的胞外片段和胞内片段,然后将2个片段及pET-28b+)同时相接,即载体-胞内片段-胞外片段-载体,构建了敲除跨膜区基因片段的VP5重组表达质粒pET-VP5-FC及改进后的pET-VP5-SC.将表达质粒转化B121(DE3),IPTI;诱导后经Ni亲和层析及凝胶过滤层析纯化重组蛋白.[结果]得到可溶性表达的IBDV VPS.[结论]为进一步研究VP5蛋白的结构与功能奠定了基础. 相似文献
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