重组梅花鹿来源Cu/Zn-SOD的分离纯化及酶学性质

超氧化物歧化酶(SOD)能特异性清除氧自由基,对保护细胞免受氧化损伤具有重要作用。本文构建了表达重组梅花鹿来源Cu/Zn-SOD的毕赤酵母工程菌GS115-p PIC9K-SOD,并对重组SOD进行分离纯化和酶学性质研究。通过10 ku中空纤维柱超滤、DEAE弱阴离子交换层析、高效凝胶色谱分离纯化,重组Cu/Zn-SOD的比活力为1 7647.1 U/mg,回收率为36.84%。对重组Cu/Zn-SOD的酶学性质研究表明,其最适反应pH 8.0,最适反应温度30℃;在pH 5~9之间较为稳定,保温1h后仍能保留80%以上的酶活力;60℃保温1 h酶活保持在90%以上,70℃保温20 min残余酶活力仍有70%以上。重组Cu/Zn-SOD在中性条件下对蛋白酶耐受性较好,然而易受胃酸的酸解导致酶活力丧失。     

高产果胶酶菌株的筛选鉴定及其发酵条件研究

采用观察透明圈与液态发酵测酶活相结合的方法,从腐烂的水果中筛选获得1株果胶酶产生菌G1。通过形态观察与18S rDNA序列分析,鉴定菌株G1为黑曲霉。对G1菌株的发酵工艺进行优化,确定最佳培养基配方(g/L):桔皮粉32,麸皮10,(NH4)2SO422,Na2HPO4·12H2O 8.4,KH2PO41.4,MgSO4·7H2O 1.0,CaCl20.1,FeSO4·7H2O 0.1,ZnSO4·7H2O 0.1,培养基初始pH 6.5;最佳发酵条件是:装液量50 mL/250 mL,转速180 r/min,接种量9%(体积分数),32℃培养7 d。在此条件下,果胶酶活力达到270.4 U/mL,比优化前提高了8.7倍。     

落雪矿通风系统改造见效果

本文介绍了落雪矿通风系统改造后,提高了技术指标和经济效益,节约了大量能耗。     

串珠镰孢菌来源的角质酶基因的克隆表达及其酶学性质

克隆一个来源于串珠镰孢菌(Fusarium moniliforme Sheld)的角质酶基因,该基因全长693 bp,编码231个成熟的氨基酸。克隆的角质酶基因构建到pPIC9K质粒,获得重组表达载体,转入毕赤酵母(Pichia pastoris Gs115)中进行高效表达。经甲醇诱导96 h,测得重组酶酶活为71.68 U/mL,经纯化获得比活力为2490.1 U/mg。对纯化后的角质酶进行酶学性质分析结果表明,其最适反应pH为9.0,在pH5.0~9.0范围内之间重组角质酶的酶活相对稳定;最适反应温度为35 ℃,在40 ℃条件下保温1 h酶活力保持70%以上。KCl、Triton X-100、MnCl₂、SDS对该酶活有促进作用,NaCl、BaCl₂、CuSO₄、Tween-20、FeSO₄、ZnSO₄、NiCl₂、EDTA、Tween-80对该酶活有抑制作用。     

四川合川钢铁厂和江北钢铁厂小高爐长寿的经验介绍

合川钢铁厂二車間1号小高爐有效容积是85m~3。高爐爐底、爐缸和爐腹的內衬是用耐火砖修砌的,爐腰、爐身和爐喉的內衬是用白泡砂石修砌的。爐缸、爐腹外壳系鋼壳,用6mm厚的鋼板焊接。爐腰至爐頂外壳用白泡砂石修砌,用扁铁作箍。用蒸汽作动力,有3个7号耶氏鼓风机送风和3座管式热风爐,总受热面积为200m~2。利用山地高差修的平桥,人工上料。爐腹鋼壳上部安有噴水围管,管道直径是1″。风口大套和渣口、铁口套是生铁鑄件,风咀是銅鑄件。冷却水经过环水管而分别进入风口大、小套,渣口、铁口套和噴水围管进行冷却。这座小高爐自1955年7     

不同条件下乳清蛋白水解物乳化性的变化及机理分析

在pH8.5、37 ℃、酶与底物质量比0.5%的条件下用胰蛋白酶水解乳清分离蛋白 (WPI) 5 h制备水解物 (WPH)。通过控制环境条件,即添加不同盐 (NaCl、KCl、CaCl2、MgCl2),改变离子强度 (0.1 mol/L和1 mol/L),pH值 (3～7) 以及热处理来调控O/W界面处肽的组成。采用质谱法鉴定肽的组成,激光衍射法测量乳液的粒度分布及STEP技术测定乳液的稳定性,从而评估界面处肽的组成特性及相互作用对WPH乳化性的影响。结果表明,pH3时,因离子强度增大而引起的电荷屏蔽作用导致WPH乳液发生显著聚集,而pH7时离子强度对WPH乳化性的影响不显著,热处理则显著降低了其乳化性。此外,在WPH等电点 (pH4)时,热处理显著提高了WPH的乳化性,尤其是添加CaCl2的样品组。综合不同pH条件下析出肽的组成及乳化性分析,研究发现来自β-Lg的肽段f(41～60)、f(71～91)、f(78～101) 对WPH的乳化特性有重要贡献。