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目的从噬菌体表面展示肽库中筛选边缘无浆体膜表面蛋白5(Membrane surface protein5,MSP5)单克隆抗体识别的抗原表位。方法用MSP5单克隆抗体1D8作为靶标,对噬菌体展示随机12肽库进行筛选,通过ELISA和竞争抑制ELISA鉴定筛选克隆的结合特性,并提取阳性克隆的单链DNA,进行测序分析。结果从表面展示随机肽序列的噬菌体文库中筛选到与MSP5单抗1D8特异结合的噬菌体克隆,其一致序列为LING。竞争抑制试验表明,含特异序列的克隆能与MSP5重组蛋白抗原竞争。结论初步确定MSP5单克隆抗体1D8的抗原表位为线性表位,为进一步研究其在边缘无浆体诊断及新型疫苗研制中的作用奠定了基础。 相似文献
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目的原核表达及纯化牛源产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)F41菌毛蛋白,并制备F41菌毛蛋白的多克隆抗体。方法以ETEC基因组为模板,采用PCR法扩增F41菌毛基因,克隆入表达载体pQE-30,转化大肠杆菌XL1-Blue,IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE分析,表达产物经切胶纯化,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,采用间接ELISA法测定抗血清效价,Western blot分析F41菌毛蛋白与多抗的反应原性。结果重组表达质粒pQE-30-F41经双酶切及测序证实构建正确;F41菌毛重组蛋白以包涵体形式表达,相对分子质量约为32 000;重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35%,纯化的重组蛋白纯度可达92%;制备的抗血清效价达1∶2.56×106以上,Western blot结果表明F41菌毛蛋白与制备的多抗具有良好的反应原性。结论已成功原核表达并纯化了F41菌毛重组蛋白,且制备了高效价的多克隆抗体,为单克隆抗体制备及其免疫检测方法的建立奠定了基础。 相似文献
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研究区黔西南晴隆县地质灾害点多面广,地质环境脆弱,人类工程活动强烈,地质灾害频发、易发。通过对区内地质灾害隐患的统计分析,归纳总结地质灾害发育特征、分布规律及成因。分析表明,地质灾害的影响因素分为内因和外因两类,内因为地形地貌、地层结构、地质构造三个主要因素,地形地貌起主要作用,外因主要为降雨和人类工程活动两方面。风险斜坡的发育分布规律主要受地形地貌、地层结构、人类工程活动影响控制。提出应重视地质环境保护、改善,完善监测体系,对地质灾害隐患点采取最优防治方案,同时建立“联防”机制转变对风险斜坡的管控等防治对策。 相似文献
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优化设计是近几年来矿山企业向设计单位提出来的一个新概念,目的是希望设计单位对现有的开采境界或按照一般原则确定的开采境界进行调整,提高企业的经济效益。优化设计主要包括两方面的内容:露天开采境界的调整和生产规模的优化。 相似文献
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在分析国内矿产资源实际状况的基础上,依据成熟的磁滑轮技术、实际矿山的磁滑轮实验数据以及矿山实例,提出综合回收利用低贫磁铁矿资源的方案和措施,并对所提方案从理论上的可行性、生产实际的可操作性、经济上的合理性以及适用条件进行分析和论证. 相似文献
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