妊娠期和哺乳期连续微波辐射对小鼠学习记忆功能的影响与甲状腺激素作用研究

本研究主要探讨妊娠期间和哺乳期间连续微波辐射,对胎鼠和乳鼠成年后学习记忆功能的影响,以及甲状腺激素T3、T4在其中的作用。实验采用SPF级昆明小鼠48只,分为妊娠期组与哺乳期组,并分别设立对照组,采用30mW／cm^2的微波,每天一次性辐射20min,连续辐射,其中对照组只做假辐射处理。妊娠期组自妊娠第1天起辐射至孕鼠分娩,共辐射21天;哺乳期组自出生第1天起连续辐射21天。在辐射第15天时分别取孕鼠和乳鼠血清,采用放免法测血清中游离T3、T4（F13、FT4）含量,待胎鼠及乳鼠成年后（2月龄）采用Morris水迷宫检测其学习记忆功能。研究发现妊娠期辐射组血清FT4明显低于对照组（p〈0．05）,而FV3没有显著变化;在定位导航实验中,其寻找平台的潜伏期明显高于对照组（p〈0．05）,空间搜索实验中在目的象限的停留时间（17．70±7．07s）明显低于对照组（27．14±5．36s）（p〈0．05）,跨越虚拟平台的次数（0．83±0．41）也明显低于对照组（1．67±0．52）（p〈0．01）哺乳期辐射组血清FT4没有显著变化,而FT3显著降低（p〈0．05）;在Morris水迷宫实验中,其各项检测指标与对照组相比,没有显著差异。以上结果表明,哺乳期间连续微波辐射能导致乳鼠血清FT3降低,但对乳鼠成年后学习记忆功能无明显影响;妊娠期间连续微波辐射能导致孕鼠血清FT4降低,胎鼠成年后学习记忆功能下降,提示FT4下降可能是微波辐射致胎鼠成年后学习记忆功能下降的因素之一。     

辐射诱导IEC-6细胞GSK3β信号转导途径的激活与细胞凋亡的关系研究

探讨了辐射诱导IEC-6细胞GSK3β信号转导途径的激活与细胞凋亡的关系,以及调控GSK3β信号转导途径对γ辐射诱导IEC-6细胞凋亡的保护作用。分别用RT-PCR检测GSK3β和caspase-3mRNA表达,Western-blot法检测GSK3β蛋白质磷酸化水平,放射活性法检测GSK-3β蛋白酶活性,caspase-3分光法检测caspase-3酶活性,Hoechst 33342荧光染色法检测细胞凋亡,琼脂糖凝胶电泳检测DNA片段化。发现6Gyγ射线照射可导致IEC-6细胞GSK3β基因表达上调,蛋白磷酸化水平降低,激酶活性增高;同时可使GSK3β介导的下游蛋白激酶caspase-3基因表达上调及酶活性增强;GSK3β和caspase-3特异性抑制剂预处理IEC-6细胞可使γ辐射诱导的IEC-6细胞凋亡细胞百分率降低,染色体DNA片段化消失。研究结果表明γ辐射可通过激活GSK3β从而进一步激活细胞凋亡相关蛋白激酶分子caspase-3,最终导致IEC-6细胞凋亡。抑制GSK3β和caspase-3激活可减轻6Gyγ辐射导致的IEC-6细胞凋亡,实验证实了GSK3β与caspase-3在γ辐射致肠上皮IEC-6细胞株损伤过程中的重要作用。     

微波诱导小胶质细胞活化后吞噬功能及MFG-E8表达的变化

为探讨微波辐照致小胶质细胞活化后吞噬功能变化及其与MFG-E8表达的关系,采用60 mW/cm2的脉冲微波辐照N9小胶质细胞,ELISA技术测定TNF-α含量,硝酸还原酶法测定NO含量,免疫荧光检测CD11b和MFG-E8,Western blot检测MFG-E8蛋白表达。与正常对照组相比,辐照后3、12 h小胶质细胞中CD11b的表达明显增加(p<0.05),TNF-α和NO含量辐照后1 h即明显升高,并持续至辐照后24 h,小胶质细胞吞噬功能在辐照后3 h至6 h增强(p<0.05),12 h反而低于正常对照组(p<0.05),而MFG-E8蛋白表达与吞噬功能变化趋势相似。结果表明,60 mW/cm2的脉冲微波辐照可明显诱导小胶质细胞活化,活化后小胶质细胞对凋亡细胞的吞噬功能出现先增强后减弱的变化,而MFG-E8蛋白表达变化可能是其吞噬功能改变的主要原因之一。     

酸性鞘磷脂酶活化在微波辐照致神经细胞凋亡中的作用研究

为阐明微波辐照致神经细胞酸性鞘磷脂酶（Acid Sphingomyelinase，ASM）活化的规律，揭示ASM活化在微波辐照致神经细胞凋亡中的作用，以原代培养神经元细胞，采用30W／era2微波辐照10min，采用Hoechst33342荧光染色观察细胞凋亡，以ASM活性测定试剂盒测定ASM活性，RT-PCR、western blot分别检测ASM基因和蛋白表达的变化。用ASM活性抑制剂米帕明预处理，观察微波辐照后神经细胞凋亡情况。研究发现，微波辐照引起海马神经元细胞发生凋亡，神经元ASMmRNA和蛋白表达上调，ASM酶活性增高，给予ASM活性抑制剂米帕明预处理后，可部分拮抗微波辐照引起的神经细胞凋亡率增加。结果提示，微波辐照引起神经细胞ASM活化及表达上升，ASM活化在微波辐照所致的神经细胞凋亡中起重要作用。     

微波暴露对大鼠GLP-1及其受体表达的影响及与学习记忆功能损伤的关系

探讨了微波暴露对胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)及其受体的影响,揭示了GLP-1及其受体变化与大鼠学习记忆功能损伤的关系.分别用Morris水迷宫评价大鼠学习记忆能力,酶联免疫吸附实验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血浆中GLP-1浓度,逆转录多聚酶链反应(Reverse transfer polymerase chain reaction,RT-PCR)检测海马组织中GLP-1R mRNA表达,原位末端标记法(Terminal deoxynucleotidyl transferase mediated Biotin-dUTP nick-end labeling,TUNEL)法检测细胞凋亡.研究发现微波暴露可导致大鼠学习记忆能力下降,血浆中GLP-1浓度降低,海马组织GLP-1R mRNA表达下降,海马脑区神经细胞凋亡.暴露前给予GLP-1可改善微波暴露所致的学习记忆功能损伤,保护神经细胞,降低海马神经细胞凋亡率.GLP-1及其受体参与了微波暴露所致的学习记忆功能损伤,证实GLP-1具有神经保护作用,并拮抗微波暴露所致学习记忆功能损伤.     

家兔视网膜组织结构在高功率微波辐照后不同时间的变化

通过高功率微波辐照后不同时间家兔视网膜组织结构的变化,探讨其对视网膜所产生的急性损伤效应。青紫蓝大灰兔28只随机分为假性辐照组和辐照后0h、3h、6h、12h、24h和72h组。用90W／cm^2电磁波全身辐照15min,对各组取材包埋固定,光镜观察其视网膜层厚度和细胞计数的变化。各组家兔视网膜的组织结构与假辐照组相比均有不同程度改变,实验数据表明：高功率微波辐照后6h,是家兔视网膜组织厚度易发生显著性降低的一个重要的时间点;高功率微波辐照后72h,家兔视网膜细胞数量明显的升高。高功率微波造成家兔眼视网膜组织的急性损伤,其损伤强度与暴露后时间存在一定的时效关系。     

辐射诱导IEC-6细胞MAPK信号转导途径的激活

研究检测了γ辐射对IEC－6肠上皮细胞丝裂原激活的蛋白激酶（MAPKs）的激活效应。6Gyγ辐射未引起ERK蛋白磷酸化的显著改变，而辐照射后30minJNK与p38MAPK蛋白磷酸化显著增强，ERK、JNK与p38MAPK的总蛋白表达水平未见明显的变化。受照后12h细胞存活率显著降低。整． 螯合细胞内Ca^2 可几乎完全抑制γ辐照引起的JNK与p38MAPK的蛋白磷酸化，而清除细胞外Ca^2 却无此作用。p38MAPK的激活与γ辐射诱导的细胞凋亡显著相关，而ERK则无明显的关联。实验结果表明，γ辐射是一种强的JNK与p38MAPK激活因素，并且细胞内储存Ca^2 的释放在γ辐射诱导的IEC－6细胞MAPKs激活与细胞凋亡过程中起重要作用。     

镍基复合涂料对环境电磁辐射的屏蔽效能研究

分别对手机基站及电视发射塔等典型环境电磁辐射源附近的电磁辐射强度进行了测量。再以羰基镍粉和水性清漆为主要原料,制备出针对射频电磁辐射的复合涂料,对该涂料制备的屏蔽材料进行现场电磁辐射屏蔽效能测试。结果表明,典型电磁辐射源附近环境电磁辐射强度未超过国家控制限值,镍基复合涂料对环境中的射频电磁辐射具有较高的屏蔽性能。在本实验所采用配方及工艺条件下,当单位面积镍含量为0.015 g/cm²时,其屏蔽效能最高。