柱前衍生反相高效液相色谱法测定冻干人纤维蛋白原制品中盐酸精氨酸和甘氨酸的含量

目的测定冻干人纤维蛋白原制品中盐酸精氨酸和甘氨酸的含量。方法采用反相高效液相色谱法,以2,4-二硝基氟苯为柱前衍生剂,在色谱柱内层析,以紫外检测器在360nm波长处检测,用外标法计算含量。结果当盐酸精氨酸和甘氨酸衍生化的取样范围为0.25～2.00mg/ml时,线性相关系数分别为0.99998和0.99999。盐酸精氨酸和甘氨酸的平均加标回收率分别为96.6%和95.4%。结论此方法检测结果准确,可用于冻干人纤维蛋白原中盐酸精氨酸和甘氨酸的含量检测。     

气管滴注99mTc-C60(OH)x大鼠的SPECT显像观察

为了解C60(OH)x经呼吸道进入体内后的分布情况,用放射性标记技术和单光子发射计算机断层(Single photon emission computed tomography,SPECT)成像技术,研究了99mTc-C60(OH)x经气管滴注后在SD大鼠体内分布、吸收和代谢的情况,及其与纳米颗粒粒径的依赖关系.用99mTc标记了富勒烯多羟基衍生物C60(OH)x(x=22,24),标记率为93%.标记物在体外和体内都有良好的稳定性.比较了99mTc-C60(OH)x和Na99mTcO4经气管滴注后在SD大鼠体内的SPECT成像.结果表明,与水溶性的小分子Na99mTcO4不同,纳米尺度的99mTc-C60(OH)x标记物大多滞留于肺中,且清除缓慢;少部分99mTc-C60(OH)x能迅速通过肺泡-毛细管屏障进入血液,主要分布于肝、骨和脾中,并通过肾代谢排泄,显示了纳米颗粒生物分布的主要特征.由此可见,纳米颗粒穿越气血屏障的能力与颗粒物的粒径相关.研究结果为纳米颗粒的呼吸毒性研究提供了重要基础资料.     

~(125)I-C_(60)吡咯烷苯氮芥的制备和生物分布

在合成以富勒烯为载体的抗肿瘤药物C60吡咯烷苯氮芥的基础上,采用先结合稳定碘再进行同位素交换的方法制备了125I-C60吡咯烷苯氮芥。研究了125I-C60吡咯烷苯氮芥的聚乙烯吡咯烷位酮(PVP)溶液通过爪垫皮下注射在大鼠体内的生物分布。实验结果表明,125I-C60吡咯烷苯氮芥具有较理想的淋巴摄取。     

TagS750-Cas9核酸酶的制备及体内代谢分布研究

Cas9核酸酶在CRISPR/Cas9系统中执行切割靶标脱氧核糖核酸(Deoxyribonucleic acid,DNA)的重要功能,研究其在体内的代谢行为对活体水平的基因编辑具有重要的指导意义。本工作采用N-羟基琥珀酰亚胺酯键将近红外荧光染料Vivo TagS750与Cas9蛋白偶联,制备了标记率高达99%的TagS750-Cas9融合蛋白。采用荧光强度监测以及琼脂糖凝胶电泳的方法对Cas9蛋白在常见生理缓冲溶液中的稳定性及切割活性进行了鉴定,并将其尾静脉注射到BALB/c小鼠体内,通过监测TagS750-Cas9蛋白荧光强度的变化对其在体内的代谢和分布进行了研究。结果表明:TagS750-Cas9蛋白的体外稳定性良好,表面标记的TagS750并不影响Cas9蛋白的切割活性。TagS750-Cas9蛋白进入体内后,平均血浆消除半衰期(t1/2β)为55 h;主要分布于肝、肾、肺、脾脏中,心脏的分布较少;72 h可被机体完全代谢清除。研究结果为CRISPR/Cas9系统中Cas9核酸酶的体内应用奠定了基础。     

茶多酚主要成分对肿瘤多药耐药性的逆转作用

将99Tcm MIBI(甲氧基异丁基异腈)和茶多酚(TP)或其主要成分(—) 表儿茶素((—) Epicatechin,EC),(—) 表儿茶素没食子酸脂((—) Epicatechingallate,ECG),(—) 表没食子儿茶素((—) Epigallocatechin,EGC),(—) 表没食子儿茶素没食子酸脂((—) Epigallocatechingallate,EGCG)或咖啡因加入到抗阿霉素人乳腺癌细胞株MCF 7/Adr中进行培养,通过测量细胞对99Tcm MIBI的摄取率来观察茶多酚及其主要成分能否逆转肿瘤细胞的多药耐药性(MDR)。结果表明,茶多酚对MCF 7/Adr细胞的MDR有较明显的逆转作用。茶多酚的4个主要组分的MDR逆转作用顺序为:ECG>EGC>EC>EGCG。但质量比为10∶5∶3∶1的EGCG ECG EGC EC混合物和咖啡因基本上无MDR逆转作用。     

C60吡咯烷苯氮芥的合成和放射性碘标记

为了研究以富勒烯为载体的抗肿瘤药物在生物体内的摄取、分布、代谢情况,利用l,3偶极环加成反应合成了带有抗癌活性药物基团的富勒烯衍生物C60吡咯烷苯氮芥,并用1H NMR、UV、IR等谱学方法对其进行了结构表征,确定了结构,用同位素交换法进行125I标记.结果表明,经过130℃热交换120min后C60吡咯烷苯氮芥的放射性碘标记率可达94%,放化纯度93.7%.     

多壁碳纳米管(MWNTs)对梨形四膜虫的生长促进作用

本工作用显微技术观察到了四膜虫对多壁碳纳米管(MWNTs)的大量摄取。考察了四膜虫存活率与MWNTs的剂量效应,发现MWNTs对细胞的生长有浓度依赖的促进作用。四膜虫的生长刺激通过琥珀酸脱氢酶(SDH),蛋白质和核酸含量的测定被进一步证实。TGA分析表明纳米管非共价结合蛋白,因此推测,培养液中的MWNTs载带了大量蛋白胨进入四膜虫细胞内是导致四膜虫迅速增殖的原因。     

125I-C60吡咯烷苯氮芥的制备和生物分布

在合成以富勒烯为载体的抗肿瘤药物C60吡咯烷苯氮芥的基础上,采用先结合稳定碘再进行同位素交换的方法制备了125I-C60吡咯烷苯氮芥.研究了125I-C60吡咯烷苯氮芥的聚乙烯吡咯烷位酮(PVP)溶液通过爪垫皮下注射在大鼠体内的生物分布.实验结果表明,125I-C60吡咯烷苯氮芥具有较理想的淋巴摄取.     

放射性核素示踪技术在碳纳米颗粒生物效应研究中的应用

纳米材料缺少特异的检测和分析手段,因此,放射性核素标记和示踪技术在研究纳米颗粒与生命体相互作用中发挥着重要作用。本文综合介绍了放射性示踪技术在碳纳米颗粒(富勒烯、碳纳米管和纳米碳黑)与整体动物和哺乳动物细胞相互作用研究中的应用概况,列举了实验得到的关于吸收、分布、代谢和排泄资料,以及这些资料对于碳纳米材料在药物研制和纳米材料的生物安全性研究中的作用和意义。最后,根据碳纳米颗粒的奇异特性,分析了放射性核素示踪技术相对于荧光标记技术的优越性,指出核素标记和示踪技术在纳米科技与生命科学交叉领域研究中的应用前景。