多次LDR对12周糖尿病大鼠脾细胞凋亡及免疫的干预作用

观察了多次低剂量辐射（Low dose radiation,LDR）对12周糖尿病（Diabetes mellitus,DM）大鼠脾细胞凋亡、免疫因子和淋巴细胞亚群的影响。将实验动物分为对照组、单纯DM组和DM＋LDR组,照射剂量分别为25、50和75 mGy,共照射15次。照射结束后8周末采用流式细胞术（How cytometry,FCM）检测脾细胞中CD4^＋、CD8^＋T细胞和TCRαβ百分数的变化,酶联免疫吸附法（Enzyme linked immunosorbert assay,ELISA）检测血清和脾细胞培养上清IL-2含量的变化,以FCM和TdT介导的dUTP缺口末端标记技术（Terminal deoxynucleotidyl Transferase dUTP Nick End Labeling,TUNEL）检测细胞凋亡。与对照组相比,DM和DM＋LDR各组体重均下降,DM组尤为明显;DM＋LDR组大鼠的血糖水平有升高,但低于DM组;DM＋LDR各组TCRαβ和CD4^＋T细胞百分数、血清和脾细胞培养上清IL-2含量和脾细胞凋亡均升高。但与DM组相比,DM＋LDR各组TCRαβ、CD4^＋和CD8^＋T细胞百分数及脾细胞凋亡均降低,而IL-2含量和CD4^＋／CD8^＋T细胞比值均升高。研究表明,多次低剂量照射能够适当调节以减弱DM所造成的大鼠体重减轻和血糖升高现象,纠正淋巴细胞亚群和免疫因子失衡,降低DM所致脾细胞凋亡,从而达到保护机体的作用。     

利用二级质谱自动进行聚糖结构解析的从头开始算法

关于不借助数据库,根据质谱自动地从头开始解析聚糖结构（包括单糖组成、排列信息和单糖之间的连接信息）已有多年研究,然而,如何快速准确地得到结果仍然面临诸多挑战。为了降低时间复杂度,现有的方法要么采用贪心法或者启发式算法,这些算法本身就是不精确的,难以保证得到结果的准确性;要么采用剪枝法或者动态规划之类的精确算法,但是这类算法不仅时间复杂度较高,而且其中大量使用的假设和理想化模型忽视了许多对结果有影响的实验细节。诸如打分函数中对不同候选结构重复使用相同谱峰进行评分的问题,先前的精确算法常常选择回避和无视,这些被忽视的细节最终导致结果的不准确。本工作提出了基于迭代增长的方法“自底向上”地利用谱图解析聚糖结构的算法。与以往迭代方法不同,该算法中增长的单位不再是单糖,而是在算法中产生的子结构,这使得算法的运行速度大大加快。在将各种实验细节纳入算法流程的基础上,通过对20种聚糖的二级质谱图解析以及与先前算法的比较,证实了该算法具有较高的准确性（75%聚糖的正确结构被算法解析为第一）。     

沉默乏氧诱导因子-1α和生存素基因联合X射线照射对乏氧细胞的体外抑瘤效应

为探讨RNA干扰（RNA interference,RNAi）沉默乏氧诱导因子-1α（Hypoxia induced factor -1α,HIF-1α）和生存素（Survivin）基因联合X射线照射对乏氧人肝癌细胞SMMC-7721的体外抑瘤效应,利用双靶向HIF-1α和Survivin基因载体,采用阳离子脂质体介导法转染SMMC-7721细胞,经乏氧培养36h后,分别以RT-PCR和Western blot法检测HIF-1α和Survivin基因的mRNA及其蛋白表达,分别以四甲基偶氮唑盐（MTT）法和流式细胞术检测细胞存活分数及细胞凋亡。结果表明,转染质粒pGenesil-Survivin-HIF的SMMC-7721细胞中,HIF-1α和Survivin基因mRNA表达水平与对照和阴性干扰组相比明显降低（p〈0．05）,也未检测到HIF-1α和Survivin蛋白的表达。单、双干扰联合放疗组存活分数较照射组明显降低（p〈0．01）,双干扰联合放疗组存活分数较其它组也明显降低（p〈0．01）。单、双干扰联合放疗组凋亡细胞百分数较对照组明显升高（p〈0．01）,双干扰联合放疗组凋亡细胞百分数较其它组也明显升高（p〈0．01）。结果提示,质粒pGenesil—Survivin—HIF可有效地干扰乏氧SMMC-7721细胞HIF-1α和Survivin基因的mRNA及其蛋白表达。双干扰联合放疗组对乏氧SMMC-7721细胞的体外抑瘤效应明显优于单干扰联合放疗组。     

低剂量X射线对小鼠睾丸生精细胞中凋亡诱导因子变化的影响

采用链霉亲和素-生物素-过氧化物酶复合物法(Strept actividin-biotin complex,SABC),观察低剂量X射线照射后小鼠睾丸各类生精细胞中(Apoptosis inducing factors,AIF)的表达变化;采用逆转录多聚酶链反应(Reverse transfer polymerase chain reaction,RT-PCR)法观察AIF的mRNA水平变化.研究低剂量X射线对小鼠睾丸生精细胞中凋亡诱导因子AIF蛋白及mRNA水平的影响.研究发现,0～0.2Gy照射后,小鼠睾丸各类生精细胞不同程度表达AIF,以精原细胞和精母细胞表达为主,精子细胞和精子则表达相对较少.AIF表达量与吸收剂量有相关性,0.075Gy照射组表达量最大,且发现AIF蛋白的表达随时间推移而增强,12h达到峰值,然后下降,但仍高于0h组.RT-PCR结果显示,低剂量照射12h后,0.1Gy剂量组AIF mRNA表达量最大.而0.075Gy照射后0-24h,其mRNA表达量逐渐增大,在24h到达峰值.所以,低剂量X线照射诱导小鼠睾丸生精细胞中AIF蛋白及mRNA表达与吸收剂量和表达时间有一定的相关性.