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目的获得抗人大肠癌单抗CAb-1重链可变区VH的准确基因。方法结合生物信息学同源比较分析,利用高兼并的FR15′端处引物扩增的单抗CAb-1的VH基因,并与数据库中序列比对,在同源性最高的抗体序列的信号肽处二次设计引物,用RT-PCR法获得抗体基因VH的准确序列。结果选定了与已知抗体VH高度同源的序列进行引物设计。凝胶电泳可见预期大小DNA条带。经测序表明,配对于信号肽处的扩增产物不仅与配对于抗体可变区FR1的结果一致,而且也纠正了配对于CAb-1的VH的FR1的兼并引物所引入的氨基酸突变。结论所优化设计的引物能够扩增完整的抗人大肠癌单抗CAb-1重链可变区基因,为小分子工程抗体改造奠定了基础。 相似文献
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治疗性肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的质量控制 总被引:1,自引:0,他引:1
目的进行治疗性肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的质量控制研究。方法用细胞计数、ELISA和FCM分别检测细胞生长、抗体生成速度和抗原结合活性;冻存细胞复苏后及体外传代3个月,检测抗体分泌稳定性和克隆阳性率;进行无菌检查、细胞核型和同工酶谱分析,了解细胞遗传稳定性、外源因子污染和细胞间交叉污染情况。结果肝癌单克隆抗体HAb18生产用种子细胞的细胞生长和抗体生成速度分别为0.047~0.052/h和1.1~1.4 pg/cell.h,与靶细胞FHCC98结合的阳性率达99%,平均荧光强度在200以上。冻存细胞复苏后及体外连续传代3个月后,其特异性抗体生成速度维持在1.0 pg/cell.h以上,培养上清抗体效价仍为1∶1 000。不同批次的生成细胞核型均符合杂交瘤细胞特征,外源因子检查阴性,无细胞间交叉污染。结论HAb18生产用种子细胞的细胞生长和抗体生成速率、抗体稳定性和特异性均符合已建立的规模化放大培养的种子细胞质控标准。 相似文献
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单克隆抗体F(ab’)_2片段的制备与质量控制 总被引:1,自引:0,他引:1
本文在F(ab’) 2 片段抗体的制备工艺上 ,采用HPLC疏水色谱法 ,用高性能的疏水色谱柱 ,经 2次纯化后的F(ab’) 2 纯度可大于 98% ,回收率大于 5 0 % ,整个过程控制无菌无热原 ,纯化后产品经检定完全符合有关人用鼠源性单抗质量控制标准 ,适宜做大规模生产。 相似文献
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EPC网络是下一代移动网络的核心网,对EPC网络安全研究十分必要。文章基于EPC网络各实体的功能及接口协议,研究分析了EPC网络面临的安全问题。详细分析了EPC网络安全机制的缺失和安全缺陷,讨论了其可能导致的安全威胁。为研究设计EPC网络安全防护技术提供了重要依据。 相似文献
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建设现代远程教育环境是广播电视大学开展远程教育的基础。构建具备海量存储能力的数据中心,为网络教学提供安全可靠的高性能存储解决方案成为建设现代远程教育环境的关键所在。 相似文献
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