双重实时荧光聚合酶链式反应检测棘鳞蛇鲭和异鳞蛇鲭

目的 建立检测棘鳞蛇鲭(Ruvettus pretiosus, RP)和异鳞蛇鲭(Lepidocybium flavobrunneum, LF)两种油鱼的双重实时荧光聚合酶链式反应(PCR)方法。方法 基于棘鳞蛇鲭和异鳞蛇鲭线粒体细胞色素氧化酶亚基Ⅰ(COⅠ)基因分别设计特异性引物和探针,并对方法进行灵敏度、特异性和重复性分析,建立双重实时荧光PCR方法。结果 模板量在8.4×10⁵～8.4×10⁰ copies/μl范围内,方法具有良好的线性关系,棘鳞蛇鲭和异鳞蛇鲭的线性回归方程分别为y=-3.18x+41.0(R²=0.998 8)和y=-3.37x+44.5(R²=0.998 6),方法组内相对标准偏差(RSD)为0.29%～0.84%。其中,检测棘鳞蛇鲭的组内RSD为0.29%～0.84%,检测异鳞蛇鲭的组内RSD为0.29%～0.62%。方法最低检测限为16.8 copies/反应,并且从随机购买的50份鳕鱼样品中鉴定出油鱼成分棘鳞蛇鲭。结论 本试验建立的双重实时荧光PCR方法能够特异性地鉴定出棘鳞蛇鲭和异鳞蛇鲭,具有实际应用潜力。     

一种用于有机磷农药检测的微流控传感器

成功制作出一种用于检测有机磷农药的聚二甲基硅氧烷(PDMS)微流控传感器,该传感器集成了光纤和用于固定有机磷水解酶的SU-8圆柱.检测原理基于反应产物对光的吸收,不同浓度有机磷农药的实验结果显示:该传感器的线性相关系数为0.9934.实验结果展示了一种将酶固定在微流沟道的简单方法.简单的制备工艺和便携式的器件为集成化的...     

三重荧光定量PCR快速检测水产品中的双链DNA病毒的研究

目的:建立对水产品中三种双链DNA病毒(斑点叉尾鮰病毒、锦鲤疱疹病毒、流行性造血器官坏死病毒)快速、敏感、特异的检测方法。方法:针对三种病毒的DNA聚合酶基因的保守序列设计三对特异性引物和三条Taqman探针,优化体系,建立三重荧光定量PCR体系,并对该方法的灵敏性和特异性评估。结果:建立的三重荧光定量PCR体系特异性强,引物之间及引物和探针之间无相互干扰。对三种病毒的检测限均能达到102拷贝/μL。结论:该方法体系稳定,重复性好,可操作性强,对水产品中的双链DNA病毒的快速检测具有重要的应用价值。