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目的构建大肠杆菌色氨酸操纵子基因突变株,提高邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的产量。方法利用依赖于DpnⅠ酶的PCR方法突变表达载体pET-22b(+)-Trp Operon上的关键位点,PCR扩增Trp OperonM基因,构建pET-22b(+)-Trp OperonM重组表达质粒,经酶切及测序鉴定正确后,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。制备粗酶液,经比色法测定邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的活性。结果 PCR扩增产物可见约7000bp的Trp OperonM条带;所构建的重组表达质粒经酶切及测序鉴定正确;邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的活性比大肠杆菌BL21(DE3)空菌分别提高了4.5倍和5.2倍。结论已成功构建了大肠杆菌色氨酸操纵子基因突变株BL21(DE3)/pET-22b(+)-Trp OperonM,邻氨基苯甲酸合成酶和色氨酸合成酶的活性均有提高,为高产色氨酸基因工程菌的构建奠定了基础。 相似文献
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以皮具制作与工艺专业开展"手工皮具制作"国际文化交流项目为例,探索在"一带一路"背景下地方高职院校如何发挥专业优势开展国际交流文化活动.从高职院校开展"一带一路"活动意义、探索新路向、"手工皮具制作"国际文化交流活动实例等方面进行探索与实践,以期为后续高职院校拓展国际文化交流活动起到一定的参考作用. 相似文献
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以高职皮具艺术设计专业《基础结构与制版》专业基础课程为例,探索混合教学模式在理实一体课程中的实践应用.从混合教学模式发展、混合教学在高职理实一体课程中应用的必要性、《基础结构与制版》课程混合教学实践应用(包括课程定位、课程目标、课程内容、教学设计、课程实施、课程评价)、教学反思等方面进行探索与实践,以期为后续课程改革提... 相似文献
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研究了具分布时滞的中立型随机系统的动态输出反馈H∞控制问题。利用了Lyapunov稳定性理论与It ′s公式,基于线性矩阵不等式,得到了随机系统动态输出反馈H∞控制器存在的一个充分条件,并进一步给出了动态输出反馈控制器设计方法,利用Matlab的LMI工具箱求解方便,最后给出数值算例验证了方法的有效性。 相似文献
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