酸胁迫下短乳杆菌谷氨酸脱羧酶系统关键基因的表达及酶活性响应

谷氨酸脱羧酶(GAD)能催化L-谷氨酸(Glu)脱羧生成γ-氨基丁酸(GABA),而GAD和位于细胞膜上的Glu/GABA反向转运蛋白的协同作用则和一些细菌的耐酸机制有关。短乳杆菌GAD系统主要含有两个谷氨酸脱羧酶(Gad A和Gad B)和一个Glu/GABA反向转运蛋白(Gad C)。研究以Lactobacillus brevis CGMCC NO.1306为材料,在不同培养条件下,采用实时定量PCR的方法研究了酸胁迫对gad A、gad B和gad C表达的影响。实验结果表明,gad B和gad C组成操纵子,在菌体生长进入对数后期以后,低p H环境能极大地促进gad CB的表达,菌体的GAD活力主要由Gad B提供且在菌体生长进入稳定期时达到最大值;相对而言,gad A的表达水平几乎不受p H环境和细胞周期的影响。以上结果将为短乳杆菌GABA发酵工艺的优化和研究酸胁迫对该菌株耐酸能力的影响提供理论指导。     

利用边缘计算动态维护油井工况

介绍一种基于边缘计算的智能技术在监测游梁式抽油机井工况中的应用。目前,孤东采油厂游梁式抽油机基本实现“四化”,从而利用“四化”传感器的网络实时采集抽油机运转过程中关键的生产数据,采用边缘计算技术,实现对抽油机井工况的动态监测与智能调节,同时依托油田PCS系统的强大计算能力,实现诊断模型数据的更新,将其与边缘层数据实现联动。边缘计算技术能够迅速并精准地获取抽油机井生产过程中工况的异常状态并实时动态调整,提升生产时率,减少采油成本,保障游梁式抽油机的长时间安全稳定运行。     

有机溶剂透性化处理谷氨酸脱羧酶工程菌制备γ-氨基丁酸的研究

为了降低细胞壁和细胞膜的传质阻力对全细胞催化过程的不利影响,采用有机溶剂对表达重组谷氨酸脱羧酶(GAD)的工程菌BL21(DE3)-p ET28a-gad B进行了透性化处理。结果表明,菌体GAD表观催化活力的改善程度与有机溶剂的介电系数和疏水性具有较强相关性,低介电常数(6),高疏水性(log P0.68)的有机溶剂可以有效提高工程菌的GAD催化活性,其中最有效的透性化试剂为二甲苯(介电常数为2.4,log P为3.1)。当二甲苯的用量为5μL?mg?1(干重细胞)、处理时间5 min时,菌体表观催化活力达到最优值,为7.94 U?mg?1(干重细胞),是处理前表观催化活力的12.4倍。为了充分利用菌体的催化活力,采用海藻酸钙包埋的方法对二甲苯处理过的菌体进行固定化,结果发现固定化的透性化菌体可以较好地保持催化活力,反复催化10次后发现,第10次的GABA产率为第1次GABA产率的72.04%。研究为系统的选择有机溶剂来有效提高GAD工程菌表观催化活性提供了参考,同时制备的固定化的透性化菌体显示了良好工业应用前景。     

短乳杆菌CGMCC1306pH和温度两阶段控制结合底物补加方式生产γ-氨基丁酸(英文)

Methods to optimize the production of gamma-aminobutyric acid （GABA） by Lactobacillus brevis CGMCC 1306 were investigated. Results indicated that cell growth was maximal at pH 5.0, while pH 4.5 was pref-erable to GABA formation. The optimal temperature for cell growth （35 °C） was lower than that for GABA forma-tion （40 °C）. In a two-stage pH and temperature control fermentation, cultures were maintained at pH 5.0 and 35 °C for 32 h, then adjusted to pH 4.5 and 40 °C, GABA production increased remarkably and reached 474.79 mmol·L-1 at 72 h, while it was 398.63 mmol·L-1 with one stage pH and temperature control process, in which cultivation con-ditions were constantly controlled at pH 5.0 and 35 °C. In order to avoid the inhibition of cell growth at higher L-monosodium glutamate （L-MSG） concentrations, the two-stage control fermentation with substrate feeding strat-egy was applied to GABA production, with 106.87 mmol （20 g） L-MSG supplemented into the shaking-flask at 32 h and 56 h post-inoculation separately. The GABA concentration reached 526.33 mmol·L-1 at 72 h with the fer-mentation volume increased by 38%. These results will provide primary data to realize large-scale production of GABA by L. brevis CGMCC 1306.     

一个能从病例中自动获取知识的中医专家系统生成软件

一、简介应用计算机技术继承中医专家经验的工作已经开展了多年,取得了很多成绩,但也存在着许多问题。在专家系统的整个开发过程中,“知识获取”至少占总工作量的四分之三以上。目前一般采用的“传授式”,“交互式”学习方法,仅仅简化了数据的输入方式,而关键的问题——获取中医专家知识,则只能靠人工整理,既费时费力,又很难准确地表达专家的思