过敏原肌质钙结合蛋白在毕赤酵母中的表达、优化及免疫反应性研究

目的 探究天然肌质钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium binding protein, SCP)的可替代物,为蟹类过敏原的检测提供基础材料,本研究首次利用毕赤酵母(Pichia pastoris, P. pastoris)高效表达表达三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)重要过敏原SCP,并检验其免疫反应性。方法 根据毕赤酵母的密码子偏好性优化SCP基因并构建重组质粒。将其热激转化至P. pastoris GS115菌株后经遗传霉素(Geneticin, G418)筛选获得阳性高拷贝子。最后通过甲醇诱导表达重组SCP并结合免疫印记(Western blotting, WB)和间接酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)验证其免疫反应性。结果 SCP在P. pastoris GS115中实现了可溶性高效表达,其表观分子量约为28 kDa。在摇瓶水平下,最佳诱导条件为pH为6.0、每24 h添加1.0%(v/v)甲醇,于28℃发酵144 h,在此条件下,纯度为91.6%的SCP产量可达15 mg/L。WB和间接ELISA结果表明,重组SCP具有IgG结合能力。结论 毕赤酵母表达系统可以得到纯度较高且免疫反应性良好的重组SCP。本研究为SCP的理化研究及产业化应用奠定了基础,并有望促进特异性甲壳类过敏原检测的发展。     

双抗体夹心酶联免疫吸附法检测鱼糜制品中鸡蛋卵白蛋白

目的 建立双抗体夹心酶联免疫吸附(sandwich enzyme linked immunosorbent assay, sELISA)法检测鸡蛋卵白蛋白(ovalbumin, OVA)的方法,组装定量检测鱼糜制品中OVA含量的ELISA检测试剂盒。方法 确定各步骤反应时间,使用棋盘法确定捕获抗体和检测抗体的最佳工作浓度,建立检测方法并对其性能进行评价。结果 反应最佳条件为:抗原孵育20 min,检测抗体孵育20min,酶促反应显色10 min。兔抗OVA抗体为捕获抗体,工作质量浓度为1μg/mL,辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase, HRP)标记兔抗OVA抗体为检测抗体, 1:5000 (V:V)稀释。采用四参数逻辑曲线拟合标准曲线,所建立sELISA方法的检测范围为8.5～200.0 ng/mL,检出限为3.5 ng/mL,定量限为8.5 ng/mL。批次内和批次间的变异系数分别为2.31%～4.58%和6.06%～12.23%;鱼糜基质中的回收率为80%～130%;测得28种常见食物样品中4种样品的交叉反应率小于0.002%;试剂盒在4℃保存6个月期间,...     

’97中国商用彩色打印机市场走势探析

从首批彩色打印机进入中国市场到现在,已经有十余年了,可在当时对那些稀罕的泊来品,大家只能在一些国家级科研机构的重点实验室内,才能一睹其“芳容”。在那时,一部专业级彩色     

基于格的前向安全无证书数字签名方案

无证书签名方案利用密钥生成中心与用户共同生成签名密钥的方式,解决了传统的基于身份的数字签名方案中存在的密钥托管问题.目前,针对无证书签名方案的研究还存在3点可以改进的地方:1)已有的基于随机格构建的无证书签名方案,虽然具有后量子安全性,但都是建立在随机预言模型下,尚无针对标准模型的相关研究;2)已有的格基无证书签名方案大多只考虑外部敌手,缺乏抵御不诚实用户攻击的能力;3)已有的无证书签名方案均需要保证用户密钥是绝对安全的,无法解决密钥泄露问题.针对这3点不足,在随机预言模型下的前向安全的无证书格基签名方案的基础上,首次提出了标准模型下可证明安全的基于随机格的前向安全无证书数字签名方案,并在不引入第三方代理的前提下同时解决了密钥泄露和密钥托管问题.在面对不诚实的用户和恶意密钥生成中心2类强敌手的情况下,利用小整数解SIS假设证明了所提出的方案具有适应性选择消息、选择身份攻击下的前向安全强不可伪造性.     

指定验证者与可撤销重加密的可搜索加密方案

隐藏向量加密(hidden vector encryption, HVE)作为一种谓词加密策略,不仅可以对解密密钥进行细粒度的控制,同时也支持对关键词的合取和子集等范围搜索,因此可以被应用在诸如电子健康记录等系统中,以保护用户敏感数据并提供密文检索功能.然而,目前已有的隐藏向量加密策略均未考虑离线关键词测试攻击和可撤销的代理访问控制.针对这一问题,提出了一种支持指定验证者和基于时间的可撤销代理重加密的高效的隐藏向量加密方案.代理人可以在数据拥有者指定的时间区间内访问密文数据,而当超过预定的时间后,代理权限将被自动撤销.由于只有指定的验证者可以执行验证操作,使得方案可以有效地抵御离线关键词测试攻击.提出的可搜索加密方案不仅在标准模型下面对选择关键词、选择时间攻击是可证明安全的,同时,搜索令牌的尺寸、重加密算法的时间复杂度以及验证操作的双线性对运算次数均限定在O(1)常数界限内.因此,方案具有较好的安全性和实用效率.     

基于单片机控制的智能磁控百叶窗设计

智能窗是智能家居中的新宠,而研究磁控百叶窗的智能化具有非常重要的意义。介绍了一种基于单片机控制的智能磁控百叶窗的设计。该设计以STM32F103RCT6单片机为主控,通过DHT11温湿度传感器、BH1750光照传感器获取环境信息,利用OLED显示屏显示信息,具备智能分档位控光和智能开合功能,还可以用硬件遥控器进行无线遥控。其中分档位控光功能是该设计的特色。对该设计进行了性能测试,发现功能完备,传感器性能良好。