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pH值和盐浓度对金属螯合亲和层析分离人胰高血糖素样肽-1融合蛋白的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的探讨pH值和盐浓度对金属螯合亲和层析(Immobilized metal ion affinity chromatography,IMAC)分离含His-Tag标签的人胰高血糖素样肽-1(Glucagon-like peptide-1,GLP-1)融合蛋白的影响,并确定最佳洗脱条件。方法在0.50mol/L盐浓度条件下,分别取pH6.0、7.0、7.8和9.04种缓冲液进行咪唑梯度洗脱;在合适的pH值条件下,分别取氯化钠浓度0.25、0.50和0.75mol/L3种缓冲液进行咪唑梯度洗脱。分析在不同pH值及盐浓度条件下洗脱融合蛋白所需要的咪唑浓度及回收率。结果在所考察的pH值范围内,洗脱融合蛋白所需的咪唑浓度随洗脱液pH值的升高而逐渐降低,当洗脱液pH值为7.8时,融合蛋白的分离效果最佳,大部分杂蛋白被0~40mmol/L咪唑洗脱液去除且不含融合蛋白,而绝大部分融合蛋白在咪唑浓度达80~200mmol/L时被洗出,总回收率达(83.7±1.0)%,且比例较高;在此pH值条件下,氯化钠浓度达0.75mol/L,才会影响融合蛋白的回收率,氯化钠浓度为0.25或0.50mol/L的洗脱液洗出融合蛋白的效果相近;在pH7.8,含0.25mol/L氯化钠的洗脱体系下,用50mmol/L咪唑溶液洗脱杂蛋白,200mmol/L咪唑溶液洗脱融合蛋白,融合蛋白的回收率和比例分别可达(85.2±2.0)%和(80.5±1.0)%。结论在所考察的pH值和盐浓度范围内,提高洗脱液pH值和盐浓度均可降低洗脱融合蛋白需要的咪唑量,但也会降低融合蛋白的回收率。 相似文献
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随着科学技术高速发展,国内医药的研制高速发展,这就使得与其紧密相关的要写专业中药物分析课程的学习难度不断加大,学校为了培养学生满足新时代的需求就必须主动迎接这一新的挑战.为了适应新时代培养高素质药学专业人才的需要,药物分析课程必须适时进行改革,本文根据教学中的经验,对药物分析课程改革提出了一些看法和设想. 相似文献
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指出门饰作为显示建筑面貌特色之关键,体现出主人的政治地位和精神文化,也成为了建筑造型和内部装饰的重要部分,通过讲述门的装饰风格、内容的独特,体现出中国上下五千年古老传统文化的精髓,强调出我国传统门之装饰的重要性。 相似文献
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为探究大型体育馆网壳结构用AA 3003铝合金表面转化膜性能,利用高倍电子显微镜、能谱分析、经典电化学测试方法和高分辨拉曼光谱研究了三价铬转化膜微观组织结构、化学组分、成膜过程及电化学性能。结果表明:AA 3003铝合金表面三价铬转化膜表面致密,其主要成分Cr/Zr原子比约为0.34,化学组分是ZrO2(拉曼光谱特征谱峰为470 cm-1)和Cr2O3(拉曼光谱特征谱峰为537 cm-1)。成膜过程的开路电位最小值和最终值分别为-1.32和-1.15 V(vs SCE)。三价铬转化膜显著降低了合金在0.1 mol/L NaCl溶液的腐蚀电流密度,并在阴极抑制方面显著。 相似文献
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由于历史上社会等级制度原因,北京南城自清代以来一直是平民文化的聚集区.在纵横交错的胡同里,散布着民居、商铺、市场、饭馆、茶楼、药店、戏园、会馆……有数不尽的记忆,道不完的掌故.而今.随着城市的发展建设,北京南城已经走向一次涅磐.记载着京华旧梦的土地即将变成一个历史记忆.北京旧城的保护和发展是一个庞杂的问题,让我们回到一个理性而中立的立场,重温一段历史,并且记录下即将成为历史的现实状况. 相似文献
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采用MDA催化加氢的方法,对H12MDA制备工艺进行了系统的研究.对RC系列负载钌催化剂进行了活性、选择性、寿命评价和筛选,并考察了温度、压力工艺条件对加氢反应的影响.结果表明,温度、压力对吸氢速率有较大的影响.选择RC3-2作为MDA加氢催化剂,在8.0MPa,150℃的条件下,3~4h内MDA转换率可以达到99%以上,H12MDA收率大于90%,且反一反异构体含量低于24%.催化剂套用实验结果表明,经过15次套用,催化剂活性、选择性依然维持在较好的水平,证明该催化剂耐用性好,具有工业应用价值.通过减压精馏的方法,制得了纯度大于99.5%的H12MDA. 相似文献
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该文以不同品种柑橘果皮中多甲氧基黄酮(polymethoxy flavonoids,PMFs)的提取检测为目的,建立乙醇索氏提取结合高效液相色谱检测PMFs的方法。结果表明,6种PMFs在2.5μg/mL~500μg/mL范围内线性关系良好(R2≥0.999 5),日内、日间精密度均小于2.8%,方法回收率在97.6%~103.9%之间。采用乙醇索氏提取,提取物经该方法分离检测,对分离后9种不同品种柑橘果皮中PMFs含量进行检测,结果表明,不同品种柑橘果皮中的多甲氧基黄酮含量有明显差异。 相似文献