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利用改良的 Miller法从人血中提取人类基因组 DNA。采用聚合酶链式反应 ( Polymerase chain reac-tion,PCR) ,对含有单核苷酸多态性 ( SNP)点的 DNA片段进行扩增 ,然后用 CIP和 Eox I去除掉 PCR体系中剩余的脱氧核糖核苷三磷酸 ( d NTP)和引物 ,最后用单碱基延伸反应获得 SNP位点处碱基类型。用基质辅助激光解吸电离 -飞行时间质谱 ( MALDI-TOFMS)或电喷雾电离 -四极杆飞行时间质谱 ( ESI-Qq TOFMS)检测延伸产物与未延伸引物间的分子量差异 ,确定该点处碱基。对不同的生物质谱检方法以及生物质谱检测方法与其它检测方法的优缺点进行了分析比较 相似文献
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本文研究了本芴醇的 FAB- MS和 ESI- MS,并与 EI- MS的研究结果进行了比较。研究结果表明 ESI是质谱电离技术中最软的电离技术 ,它与 EI和FAB的裂解方式不同。本芴醇在 FAB- MS的主要裂解途径和在 EI- MS中的相似 ,均是本芴醇侧链上的胺基发生 β开裂 ,生成基峰 M/ Z1 42的 CH2 =+ N( C4 H9) 2 离子。 ESI-MS分析时通常获得 M/ Z52 8的 [M+ H]+ 离子 ,分析时增加锥孔 (进样孔 )电压 ,本芴醇在源内发生 CID,首先发生脱水反应 ,然后继续裂解。 相似文献
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Matrix-assisted laser desorption ionization time of flight mass spectrometry (MALDI-TOF-MS) is a rather new ‘soft ionization’ techniques. Because of its high sensitivity and accuracy, it has been widely used in detection and characterization of macromolecules such as peptides, proteins and olignucleotides. It also has been applied successfully in the analysis of posttranslational modification of proteins, such as phosphorylation and glycosylation. Compared with the conventional chemical methods, mass spectrometry is simple, rapid and does not require radiolabeling. In this research, a systematic method to analyse glycoprotein by MALDI-TOF-MS was developed. A practical sample--recombinant human erythropoietin was analysed by the method. The molecular weight, content of carbohydrate and glycosylation sites of the glycoprotein were determined by MALDI-TOF-MS, combined with the endo-glycosidase digestion and peptide mapping. The experimental result shows that MALDI-TOF-MS is a very powerful technique in the characterization of glycosylation proteins. 相似文献
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基质辅助激光解吸飞行时间串联质谱法进行肌红蛋白的从头测序 总被引:2,自引:0,他引:2
蛋白质的序列测定对于蛋白质的鉴定具有重要意义.传统的Edman降解测序法对样品纯度有很高的要求,而且操作比较繁琐.在蛋白质组研究中广泛采用串联质谱法测定蛋白质水解肽段的部分氨基酸序列(肽序列标签),通过数据库检索来鉴定蛋白质[1,2].本工作采用反相色谱法分离肌红蛋白的酶切肽段,用基质辅助激光解吸电离飞行时间串联质谱(MALDI-TOF-TOFMS)技术测定各个肽段的氨基酸序列,拟提高蛋白质的序列覆盖率和鉴定的可靠性. 相似文献
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用含金属氧化物的石墨棒作电极 ,在氩气氛中利用弧放电制备碳纳米类物质。用于分析测定的物质是碳纳米类物质 C6 0 、C70 、C76 、C78、C84 以及 La@C82 ,得到其在正离子状态下的分子离子及碎片离子。碳纳米类分子以 C2 -碎片丢失的方式进行特征解离。对不同碳纳米物质的系列碎片峰的强度进行研究结果表明 :碎片[M-C2 n H]+丰度随球形分子的体积的增大而增加 ,而且碎片 [M-C2 n H]+的丰度略大于 [M-C2 n]+。激光飞行时间质谱分析为碳纳米分子结构及其稳定性提供了十分有用的信息 相似文献
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在常用的多维液相色谱-质谱联用技术中,采取延长梯度洗脱时间、进行重复实验、采用质谱分段扫描等多种方法,提高对蛋白质的鉴定效率。为了系统评价这些方法在复杂生物样本分析中的效果,应用酵母的蛋白提取物作为样本,在LCQ质谱仪上进行一系列的比较实验。结果表明,在一定范围内,随着梯度时间的延长,被鉴定的非冗余肽段(unique peptide)数量显著增加,相对应的蛋白质簇(group protein)数量也随之增加。同样,进行重复实验和采用质谱分段扫描的方法均能提高蛋白鉴定的覆盖率,而采用质谱分段扫描的策略具有更为显著的效果,因此在规模化蛋白质组分析中,应当选择更为合适的、互补的研究策略以提高结果的完整性。 相似文献
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浅谈Flash MX2004中XML的应用 总被引:1,自引:0,他引:1
蔡耘 《数字社区&智能家居》2005,(26)
FLASH是目前网络动画制作的主流,而XML是跨平台数据结构的最佳选择。本文探讨了Flash采用XML数据格式的原理及应用,以及在FlashMXProfessional2004中轻松创建XML数据驱动接口。 相似文献
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