生物质谱作为SNP分型检测方法的研究

利用改良的 Miller法从人血中提取人类基因组 DNA。采用聚合酶链式反应 ( Polymerase chain reac-tion,PCR) ,对含有单核苷酸多态性 ( SNP)点的 DNA片段进行扩增 ,然后用 CIP和 Eox I去除掉 PCR体系中剩余的脱氧核糖核苷三磷酸 ( d NTP)和引物 ,最后用单碱基延伸反应获得 SNP位点处碱基类型。用基质辅助激光解吸电离 -飞行时间质谱 ( MALDI-TOFMS)或电喷雾电离 -四极杆飞行时间质谱 ( ESI-Qq TOFMS)检测延伸产物与未延伸引物间的分子量差异 ,确定该点处碱基。对不同的生物质谱检方法以及生物质谱检测方法与其它检测方法的优缺点进行了分析比较     

蛋白融合技术的应用

蛋白融合技术的应用葛伟文，贺福初，孙志贤（北京放射医学研究所北京１００８５０）将通过人工合成或蛋白酶酶切获得的几个不同来源的肽段相互连接，获得不同蛋白质之间的融合体，可能体现所有来源蛋白质的活性和功能，甚至可能获得协同效应。另外，随着基因工程技术的成...     

中国人IL－9cDNA的亚克隆及其高效表达

在完成了ｈＩＬ－９ｃＤＮＡ的克隆及序列测定的基础上，为实现ｈＩＬ－９ｃＤＮＡ在原核细胞中的表达，重新合成了上游引物（在酶切位，久后加上ＡＴＧ）。以ｐｕｃ１９－ｈＩＬ－９ｃＤＮＡ为模板进行了ＰＣＲ扩增，特异产物经ＥｃｏＲＩ酶切、回收后与经ｓｍａｌＩ、ＥｃｏＲＩ酶切的ｐＢｖ２２０载体连接，转化大肠杆菌。转化子质粒用０．８％ａｇａｒｏｓｅ电泳粗筛，经ＥｃｏＲＩ、Ｐｓｔｌ酶切后得到了３个阳性克隆。３个阳性克隆经热诱导后，在ＰａＰ＿Ｌ启动子作用下，获得了天然ｈＩＬ－９ｃＤＮＡ的高效表达，表达量分别达到可溶性总蛋白的３７．３％、４３．８２％、５４．５２％。     

nr数据库分析及其本地化

通过用NCBI的blastp程序对nr数据库与IPI数据库中属于人类的蛋白质序列进行比较，论证了nr数据库整合到蛋白质注释系统中的必要性。并在此基础上，设计方案实现了nr数据库的本地化，对nr数据库的记录进行了统计分析，提供了数据库的内部访问，为蛋白质拄释系统整合nr数据库做好了第一步工作。