米曲霉酸性蛋白酶Ap的结构分析

米曲霉(Aspergillus oryzae)酸性蛋白酶与部分商品化的蛋白酶相比,具有对大豆蛋白水解效率高且水解产物苦味弱的特性。作者采用RT-PCR技术克隆获得酸性蛋白酶(Ap)基因,结合生物信息学手段,对Ap进行分析与预测。结果表明:Ap基因对密码子使用频率具有偏好性,特别是第3位密码子对GC碱基的使用频率高,达到74%;编码404个氨基酸残基。Ap属于胞外天冬氨酸蛋白酶。以海枣曲霉(A.phoenicis)的酸性蛋白酶(PDB code:1IBQ)作为模板同源建模结果可知,Ap分子至少能与2个Zn2+结合,内含1个二硫键、163个氢键、35个盐碱。该酶与1IBQ相比空间结构总体相似,部分重要位点(如flap环、转角和ψ-loops)的氨基酸残基较为保守。     

药用植物辣木内生真菌的分离及其抗菌活性分析

从新鲜植株辣木的茎和叶中分离出内生真菌35株。以金黄色葡萄球菌、藤黄八叠球菌、大肠杆菌、绿脓杆菌、白色念株菌、掷孢酵母为受试菌株,对其进行抗菌活性筛选。结果表明,共有29株内生真菌对1株或1株以上的受试菌株有抗菌活性,其中平板抑菌圈直径大于15mm的菌株有1株。研究结果表明,辣木内生真菌具有良好的潜在应用价值,值得做进一步研究。     

毕赤酵母16B2菌株表达牛肉风味肽发酵条件的优化

牛肉风味强化肽（BMP）最初是从牛肉的木瓜蛋白酶水解物中分离得到,其一级结构为：Lys-Gly-Asp-Glu-Glu-Ser-leu-Ala。BMP与食盐、MSG有较好的协同呈味的作用,并且具有很好的热稳定性,适合于食品工业生产中的热处理要求。因此,BMP有望代替MSG成为新一代风味强化剂。文章研究了由毕赤酵母胞外表达多拷贝牛肉风味肽的摇瓶发酵条件。确定最佳表达条件为：Yeast Nitrogen Base（YNB）的初始浓度为1%,诱导期pH为5.5,每24h添加1%的甲醇,诱导时间96h,多拷贝BMP的产量可达到约0.162g/L。     

大豆分离蛋白重组蛋白酶水解肽对小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响

为了研究重组酱油曲霉碱性蛋白酶(rAp)水解大豆分离蛋白获得的大豆肽对小鼠免疫功能及抗氧化能力的影响,将诱导表达后分离纯化的rAp对大豆分离蛋白进行水解,然后将水解液灌胃小白鼠,测定其水解液对小鼠免疫器官指数、小鼠血清溶菌酶活性和小鼠血清抗菌活力等对小鼠免疫功能的影响;通过测定谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和过氧化氢酶(CAT)的活性以及丙二醛(MDA)浓度等,进一步检测对小鼠血液中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)、过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)浓度的影响。结果表明,大豆肽对小鼠免疫器官指数没有显著影响,但可显著提高小鼠血清溶菌酶活性和小鼠血清抗菌活力;对小鼠血清中的GSH-PX的活力影响不显著,但能显著提高血清中的CAT活力和显著降低MDA浓度。由此可见,rAp水解大豆分离蛋白获得的大豆活性肽在一定程度上能增强小鼠机体的免疫功能和抗氧化活性,在保健品行业为大豆的高值化利用提供了实验依据。     

南方山荷叶内生真菌与根际真菌的多样性及相关性探讨

对云南产南方山荷叶植物的内生真菌与根际真菌进行分离、鉴定，得到25株内生真菌和19株根际真菌，其中内生真菌分属于5个科、8个属，根际真菌分属于5个科、6个属。对这两组真菌作比较分析，显示出这两组真菌存在丰富的多样性和一定的相关性，并对植物内生真菌的起源作了初步探讨。     

酸奶中保加利亚乳杆菌的抗药性实验研究

测定了10种常用抗菌药物对市售酸奶中分离的57株保加利亚乳杆菌的MIC。结果表明，泰能、克林霉素、林可霉素、头孢唑啉和红霉素对乳杆菌的抗菌或活性最强，MIC90值为0．25～2．0mg／L，敏感率为96．5％～86．0％其次是阿莫西林、复方新诺明、青霉素，其MIC90值为2．0～4．0mg／L，敏感率为84．3％～78、9％。庆大霉素、氯霉素其MIC90值为4．0～16．0mg／L，敏感率为63．2％～59．7％。酸奶中的保加利亚乳标菌存在抗药性，其抗药性基因是否具转移性有待于进一步研究。     

凡口铅锌矿废弃地植物促生长内生真菌的筛选

以粤北凡口铅锌矿废弃地优势植物香蒲(Typhaorientalis presl)、苦楝(Melia azedarach)、苎麻(Boehmeria nivea)和蓖麻(Ricinus communis)中分离筛选出的具有抗重金属铅、锌能力的45株内生真菌为研究材料,利用CAS检测液显色反应、钼锑抗比色法和Salkowski法,分别筛选出具有促进植物生长的产铁载体菌株30株、溶磷菌株3株和产吲哚乙酸(IAA)菌株18株。并选取具有产铁载体、溶磷或产IAA能力较强的菌株作为代表菌株进行形态学鉴定和ITS序列分析,鉴定结果显示：WB-21为曲霉属(Aspergillus)、BM3为旋孢腔菌属(Cochliobolus)、BM5为链格孢属(Alternaria)、菌株XP3.21为刺盘孢属(Colletotrichum)、ZMP5-3为篮状菌属(Talaromyces)。     

香菇酸乳对小鼠免疫力的影响

为了研究自制的香菇酸乳对小白鼠免疫功能的影响,作者采用小白鼠的体重增长率、脏器指数、血清抗菌活性、溶血素含量、溶菌酶活性和巨噬细胞吞噬功能等检测方法,比较了自制的香菇酸乳与普通酸乳和生理盐水对小白鼠免疫功能的影响.结果表明,与生理盐水相比,香菇酸乳和普通酸乳能显著地提高小白鼠的体重增长率、脏器指数和血清抗菌活性,而两种酸乳之间差异不显著(香菇酸乳比普通酸乳更能显著地提高胸腺指数除外);香菇酸乳显著地提高小白鼠血清的溶血素和巨噬细胞的吞噬能力,但是普通酸乳和生理盐水不具有该功效;香菇酸乳和普通酸乳与生理盐水相比较均能显著地提高小白鼠血清溶菌酶活性,且香菇酸乳比普通酸乳提高溶菌酶活性的作用更显著.     

表达牛肉风味肽的重组毕赤酵母部分生物学特性的研究

对分泌表达16拷贝牛肉风味肽毕赤酵母工程菌株)的生物表型、生长特性、表达特性及遗传稳定性等进行了研究.结果表明:该重组菌株的表型为Mut+:在5L发酵罐中,采用BSM培养基,设定适合的菌体培养温度和pH值,通过调节搅拌速度、通气量和罐压等措施使溶氧(DO)维持在20%～35%,当诱导90h后(发酵110h),目的产物BMP的表达量达到最高为54 mg/L,是其摇瓶水平的5.4倍;遗传稳定性分析实验及PCR检测结果证明,重组菌株具有良好的遗传稳定性和重组蛋白表达的稳定性.     

发酵液中牛肉风味肽分离纯化方法的比较研究

使用反相高效液相色谱（RP-HPLC）对重组酵母发酵液中一种牛肉风味肽（BMP）的稳定性进行了研究，并分别运用D301离子交换层析和Sephadex G-25凝胶过滤层析对其进行了分离纯化，最后利用RP-HPLC对目标肽进行分析检测。结果表明，在pH值为7．4条件下，发酵液中的目标肽于室温下放置0h-8h后仍呈现良好的稳定性。分离纯化结果显示，Sephadex G-25凝胶过滤层析的分离纯化效果优于D301离子交换层析，更适合于分离复杂体系发酵液中的风味肽。