人sΔBAFF的高效原核表达及纯化

目的克隆TNF家族B细胞激活因子(BcellactivatingfactortotheTNFfamily,BAFF)胞外区134~285(sBAFF134-285)氨基酸残基段缺失突变体(sΔBAFF)的cDNA,并进行表达及纯化。方法以构建的重组质粒pUC19/sBAFF为模板,采用一步反向PCR法,扩增缺失编码sBAFF的142~160位氨基酸的核苷酸序列。经测序证实后,克隆入原核表达载体pQE-80L。经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Westernblot检测表达产物,Ni2+-NTA柱层析纯化目的蛋白。结果经一步反向PCR扩增后得到401bp的DNA片段,该片段序列与GenBank报道的编码人ΔBAFF的胞外区(sΔBAFF)cDNA序列一致。含sΔBAFF的表达载体在大肠杆菌中可表达出相对分子质量为18000的蛋白质并以包涵体的形式存在,经Ni2+-NTA柱层析纯化后得到高纯度的目的蛋白。结论已成功地制备出人sΔBAFF蛋白,为其功能的研究创造了条件。     

膜分离技术概述

膜分离技术是现代分离技术中一种效率较高的分离手段。综述了反渗透、超滤、电渗析、气体膜分离、微滤的分离原理,各种膜分离过程的影响因素及其应用,展望了膜技术应用前景。     

化工园区含苯消防废水处理研究

以40 min为限制,讨论了采用错流过滤方式的胶束强化超滤技术对含苯消防废水的去除效果.试验表明,当加入苯的质量浓度为4 g·L-1、蛋白泡沫灭火剂的体积分数为1∶640、阴离子表面活性剂十二烷基苯磺酸钠(SDBS)浓度为1 mmol· L-1、pH=7、跨膜压差Ap=0.28 MPa时,苯去除率为88.0％,出水通量达到0.77× 10-3 L· m-2· h-1 Pa-1.上述条件下,加入纳米二氧化硅0.75 g·L-1,能使苯去除率快速提高到99.8％,通量达到0.85×10-3 L.m-2.h-1.pa-1.     

人s△BAFF的高效原核表达及纯化

目的克隆TNF家族B细胞激活因子（B cell activating factor to the TNF family,BAFF）胞外区134～285（sBAFF134-285）氨基酸残基段缺失突变体（s△BAFF）的cDNA,并进行表达及纯化.方法以构建的重组质粒pUC19/sBAFF为模板,采用一步反向PCR法,扩增缺失编码sBAFF的142～160位氨基酸的核苷酸序列.经测序证实后,克隆入原核表达载体pQE-80L.经IPTG诱导表达,SDS-PAGE和Western blot检测表达产物,Ni2＋-NTA柱层析纯化目的蛋白.结果经一步反向PCR扩增后得到401 bp的DNA片段,该片段序列与GenBank报道的编码人△BAFF的胞外区（s△BAFF）cDNA序列一致.含s△BAFF的表达载体在大肠杆菌中可表达出相对分子质量为18 000的蛋白质并以包涵体的形式存在,经Ni2＋-NTA柱层析纯化后得到高纯度的目的蛋白.结论已成功地制备出人s△BAFF蛋白,为其功能的研究创造了条件.     

重组人BAFF_(134～285)的克隆及在大肠杆菌中的高效表达

目的克隆人TNF家族的B细胞激活因子(BcellactivatingfactortotheTNFfamily,BAFF)胞外区cDNA,并进行高效表达和纯化。方法提取人新鲜扁桃体组织总RNA,经RTPCR扩增编码人BAFF胞外区134～285氨基酸残基cDNA,经序列测定后,克隆至pQE80L载体中,并转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导表达及Ni2+NTA柱层析纯化目的蛋白,最后经SDSPAGE和Westernblot检测。结果RTPCR扩增得到了459bp的cDNA片段,序列分析与GenBank中报道的编码人BAFF134～285的cDNA序列一致,SDSPAGE及Westernblot证实表达蛋白确实为6×HisBAFF134～285融合蛋白,并存在于包涵体中。结论利用大肠杆菌可高效表达rhBAFF134285,为进一步研究其生物学活性奠定了基础。     

膜分离技术概述

膜分离技术是现代分离技术中一种效率较高的分离手段。综述了反渗透、超滤、电渗析、气体膜分离、微滤的分离原理,各种膜分离过程的影响因素及其应用,展望了膜技术应用前景。