微生物转化法合成L-酪氨酸

以对羟基苯甲醛、海因、氢氧化钠为原料 ,化学合成底物对羟基苯丙酮酸。采用来自大肠杆菌的天冬氨酸转氨酶对对羟基苯丙酮酸进行生物转化 ,并对转化条件进行了初步的研究 ,最终得到L-酪氨酸 ,转化率 75 %。     

茯苓交配型的初步研究

以茯苓栽培种"大泡引"为研究材料,茯苓菌丝为无锁状联合的多核菌丝,担孢子中双核孢子占75 3%、单核孢子2 4%、无核孢子22 3%。30个单孢株进行单孢配对结果为拮抗现象(不亲和)占总数的26 7%。茯苓菌株具有单孢结实现象,占单孢株总数的18%。由以上结果可初步得出茯苓菌为同宗结合真菌。     

营养因子对大肠杆菌发酵产转氨酶的影响

运用“单一组分缺失法”研究了18种氨基酸,11种维生素,8种微量元素,4种嘌呤与嘧啶对大肠杆菌A5发酵产转氨酶的影响。结果表明,L-甲硫氨酸是菌体生长与产酶所必需的物质,L-缬氨酸、L-异亮氨酸和L-谷氨酸分别对菌体生长和酶转化得率的提高有显著的促进作用。在此基础上构建了一个改良的合成培养基,其组成为(g/L):葡萄糖20,(NH4)2SO45,MgSO40.5,NaCl0.5,K2HPO40.5,KH2PO40.5,氨基酸混合液(包括L-Met、L-Val、L-Ile、L-Glu)0.6,pH7.2,所产转氨酶的转化得率达到72.4%。     

啤酒废酵母酶解液作为有机氮源厌氧发酵制备丁二酸的研究

确定了以啤酒废酵母为原料,酵母酶解液中α-氨基氮含量为考察指标的蜗牛酶酶解破壁条件;并以啤酒废酵母酶解液为有机氮源,厌氧发酵制备丁二酸。结果表明蜗牛酶破壁效果最好,其最佳反应条件为蜗牛酶用量10mg/g干物质,pH6.5,40℃水浴,反应16h,酵母酶解液中α-氨基氮含量为0.504g/100mL;当发酵培养基中葡萄糖浓度为50g/L,啤酒废酵母酶解液作为有机氮源时,菌株Actinobacillus succinogenes NJ113可以产34.6g/L丁二酸,收率69%,和以酵母膏为有机氮源厌氧发酵制备丁二酸(丁二酸浓度为35.1g/L,收率70.2%)比较,产量相近,成本较低。     

酶法拆分N-乙酰-D,L-蛋氨酸转化条件优化

重组大肠杆菌BL21/pET22b-argE表达的N-乙酰鸟氨酸脱酰基酶(NAOase)可用于脂肪族氨基酸的手性拆分.水解N-乙酰-D,L-氨基酸中的L-型底物,N-乙酰-D,L-蛋氨酸为其最合适的底物.为了确定NAOase拆分N-乙酰-D,L-蛋氨酸合适的转化条件,考察了反应温度、pH值、Co2+浓度、转化时间、底物浓度和加酶量对产物的影响.结果表明,合适的反应条件为37℃,pH值7.0,Co2+ 1 mmol/L,转化时间20 min,底物浓度150 mmol/L,菌泥5 g/L.在上述反应条件下,N-乙酰-D,L-蛋氨酸的转化率可达81.4%.     

天冬氨酸转氨酶及其酶学性质

从大肠杆菌中提取了天冬氨酸转氨酶 ,并对其酶学性质进行了系统的研究 ,得出该酶的最适反应温度为37℃、最佳反应 p H范围为 8.0～ 8.5、最佳氨基供体为 L -天冬氨酸、转化反应动力学常数 Km,同时对影响该酶作用的其它因素 (辅酶、金属离子 )作了研究。利用几种α-酮酸 ,考察了该酶在转化制备相应的芳香族 L -氨基酸过程中的作用。为该酶的工业化应用提供了理论上的依据     

以L-谷氨酰胺-锌(II)配合物为供体酶法制备茶氨酸及其反应机理

针对酶法合成茶氨酸中存在的自转肽副反应,合成了L-谷氨酰胺-锌(II)配合物Zn(Gln)2,以其为供体、乙胺为受体、枯草芽孢杆菌B. subtilis GGT为催化剂,酶法制备茶氨酸. 结果表明,Zn(Gln)2在反应主体相稳定性良好,以Zn(Gln)2为供体可有效抑制自转肽副反应;B. subtilis GGT对Zn(Gln)2和Gln的亲和力常数分别为0.53 mmol/L和1.01 mmol/L. 在Zn(Gln)2 6.0 mmol/L、乙胺200 mmol/L及GGT 0.5 U/mL条件下,经37℃反应2 h,茶氨酸浓度最高可达7.38 mmol/L,较以Gln为供体时提高了14.42%.     

酶法制备γ-D-glutamyl-L-tryptophan的动力学模型

以酶法合成γ-D-glutamyl-L-tryptophan (γ-D-Glu-L-Trp)为研究体系,采用D-谷氨酰胺为γ-谷氨酰基供体,L-色氨酸为受体,测定得到了转肽反应的米氏常数（K _m）为5.11 mmol·L^-1,催化常数（K_cat）为3.92 mmol·min^-1,γ-D-Glu-L-Trp的水解反应米氏常数（K′_m）为2.31 mmol·L^-1,催化常数（K′_cat）为1.46 mmol·min^-1。采用顺序反应机制建立了酶法制备γ-D-Glu-L-Trp的过程动力学模型,并进行了参数优化。经验证,所建模型可准确预测该体系中的反应进程,模型数值解与实验值的平均相对误差小于5%。     

新杀菌剂JS399-19的生物活性研究

JS399-19是国家南方农药创制中心江苏基地发现并正在开发中的新型氰基丙烯酸酯类杀菌剂。研究表明．JS399-19对小麦赤霉病、辣椒疫霉病、水稻恶苗病、棉花枯萎病、小麦纹枯病及黄瓜灰霉病等具有优良的抑制活性．对小麦赤霉病菌的EC50为0．1895～0．2252g/L；并具保护和治疗作用；田间试验表明，应用剂量为300～750g／hm^2可有效控制小麦赤霉病的发生与危害。研究比较表明，JS399-19对小麦赤霉病的防效显著优于多菌灵。     

生物化工研究现状与发展趋势

综述了化学生物学作为一个化学与生命科学交叉的新兴学科，正在世界各国迅速兴起，并逐渐成长为未来几十年或更长一段时间内的重要前沿方向。生物化工是20世纪中叶兴起的一项重要的化学工业技术，它是建立在高效化学化工技术与生命科学的相互交叉与融合的基础之上，充分体现了学科交叉的优势，必将引起现代化学化工技术产生革命性的变革。并在全面概述当今化学化工行业的发展现状的基础上。重点阐述了当今生物化工技术研究的前沿领域。