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目的原核表达3型戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV)第2个开放阅读框(open reading frame 2,ORF2)截短融合蛋白(HEV3-179-Fe),并检测其免疫原性。方法分别扩增HEV3-179和Fe蛋白基因片段,经Overlap PCR法连接并扩增,克隆至载体pET-28a,构建重组表达质粒pET-28a-HEV179-Fe,将其转化感受态E. coli BL21(DE3),取阳性菌株,IPTG诱导表达融合蛋白HEV3-179-Fe,进行10%SDS-PAGE分析。目的蛋白经镍离子金属鳌合亲和层析纯化后,加入硫酸铵进行病毒样颗粒(virus-like particles,VLPs)重构,置电镜下观察。HEV3-179-Fe蛋白VLPs与氢氧化铝佐剂吸附后免疫小鼠,ELISA法测定效价,以评价HEV ORF2截短融合蛋白的免疫原性。结果重组表达质粒pET-28a-HEV3-179-Fe构建正确。目的蛋白HEV3-179-Fe相对分子质量约40 000,主要以包涵体形式存在,表达量均达35%以上,纯度约95%,可与鼠抗HEV 3多抗发生特异性反应。硫酸... 相似文献
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人源化单克隆抗体目前在肿瘤、自身免疫病、抗病毒等多个治疗领域发挥着越来越重要的作用.截止目前,FDA已有50多种人源化抗体药物获批上市,人源化抗体为人类疾病的治疗提供了广阔的思路.抗体人源化技术包括嵌合抗体技术、人源化抗体技术和全人源抗体技术,并随之衍生出单链抗体、双特异性抗体、纳米抗体等多种形式的小分子人源化单克隆抗... 相似文献
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激光打标系统及工艺研究 总被引:3,自引:0,他引:3
为了将激光加工技术运用到液晶显示领域,采用激光光刻ITO栅指电极基板的技术。在明晰了该系统的性能基础上,根据需要对打标系统作了相应的改进与补充,即利用C8051F930单片机控制步进电机精确的定位和正反转运动,有效地克服了激光光刻时因高速出现的断线现象。文中分析了激光打标的工艺参数对打标线条宽度的影响曲线,有利于激光打标时参数的选择。实验证明本系统适应高质量打标的要求。系统通过PC机进行控制,操作灵活、方便且运行的平稳性及定位精度较高,从而使激光打标工艺能够更好地应用于液晶显示领域中。 相似文献
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周永飞 《中国石油和化工标准与质量》2013,(19):130
抽油杆卡死井在检泵作业中因人工倒扣安全系数低,作业中往往采取大力硬拔的措施施工,这样抽油杆因受到过大的拉力作用,其性能发生一定的变化,轻者杆体出现塑性变形,性能降低,重者抽油杆严重弯曲直至断裂。抽油杆液压倒扣装置是专门的倒扣工具,与现有的液压钳配合使用,可以安全的倒开被卡死的抽油杆,避免作业中因采取措施不当造成的抽油杆损坏,减少质量隐患,降低油井维护成本。 相似文献
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目的 原核表达甲型肝炎病毒(hepatitis A virus,HAV)衣壳蛋白VP1和VP3,并评价其免疫原性。方法 PCR法扩增VP1和VP3基因片段,克隆至载体pET-G28a中,构建重组表达质粒pET-G28a-VP1和pET-G28a-VP3,转化至感受态E. coli BL21(DE3),经IPTG诱导表达,12%SDS-PAGE分析表达产物。目的蛋白经离子交换层析纯化,复性后与多种佐剂配伍,免疫雄性BALB/c小鼠,随机分为VP1-MF59、VP1-AH、VP1-AP、VP1-AP-10CpG、VP1-AP-50CpG、VP3-AP、VP3-VP1-AP及PBS对照组,每组5只。ELISA法检测各组小鼠血清中IgG抗体效价,快速荧光灶免疫抑制试验测定VP1-AP、VP3-VP1-AP及PBS对照组小鼠血清中和抗体效价。结果 菌落PCR及测序结果证明,重组表达质粒pETG28a-VP1及pET-G28a-VP3构建正确。重组蛋白VP1和VP3相对分子质量分别约为37 000和26 000,主要以包涵体形式存在,表达量分别为18.6%和32.4%,纯度分别为86.3%和84.... 相似文献
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