应用DGGE方法构建健康人粪便乳杆菌标准指纹图谱

从健康人的新鲜粪便样品中分离乳杆菌,鉴定属种后构建一种能够快速鉴定未知属种乳杆菌的标准指纹图谱.首先通过形态学观察及K2O2酶等生理生化试验对所分得菌株进行初步鉴定,然后利用16S rDNA序列同源性分析方法,对所分得菌株进行16S rDNA基因扩增与测序,测序结果与GenBank中该属内茵株的16S rDNA基因序列进行同源性分析,从而准确鉴定所分得菌株.最后,利用变性梯度凝胶电泳(DGGE)方法构建标准指纹图谱.结果表明,从健康人新鲜粪便中分离得到8株乳杆茵,经鉴定,其中4株为植物乳杆菌,1株为卷曲乳杆菌,3株为发酵乳杆菌.所得标准指纹图谱中试验菌株大体被分成4类,与16S rDNA基因序列同源性分析结果相吻合.通过传统方法可以从健康成人的新鲜粪便中分离得到乳杆菌,传统方法与分子生物学方法相结合可以将其准确鉴定到种的水平.变性梯度凝胶电泳(DGGE)方法可以在种的水平上作为快速鉴定乳杆菌的一种有效工具.     

双歧杆菌生长特性的研究

应用TPY液体培养基，比较了2株商品双歧杆菌菌株(B．Adolescentis，BA；B．1nfantis，BI)、2株由产品分离双歧杆菌菌株(B．Longum，BL；B.Breve，BBR)以及2株分离自婴儿粪便的双歧杆菌菌株(B．Bifidum，BB；B.Longum-1，BL-1)的生长与产酸能力。结果表明，BI生长速度比BA快，产酸能力却弱，前者无明显的生长迟滞期，后者却相反。BL和BBR均无明显的生长迟滞期，培养48h，茵液吸光值分别为2．348和2．162。培养BB和BL-1达48h，其吸光值分别为1．400和1．447。商业生产株生长及产酸性状优于来自婴儿粪便的新分离株。     

高效液相色谱法检测牛乳中掺加的胶原水解蛋白

本研究的目的是建立采用高效液相色谱测定牛乳中掺加胶原水解蛋白的方法.其基本原理是通过高效液相色谱法测得羟脯氨酸的含量,由测得的羟脯氨酸含量换算得出乳中掺加的胶原水解蛋白的量.以symmetry-C18(150 mm ×3.9 mm,i.d.5 μm)为色谱柱,2,4-二硝基氟苯为衍生试剂,梯度洗脱.流动相A:浓度为0.05 mol/L乙酸钠缓冲溶液(pH=6.5,含10 mL/L四氢呋喃),流动相B:乙腈-水(体积比1:1).羟脯氨酸质量浓度在2～10 mg/L的范围内与峰面积之间具有良好的线性关系,回收率为93.47%～101.20%,检出限为2.5 mg/L.测定结果的相对标准偏差为1.62%.     

植物乳杆菌KLDS1.0391在酸奶体系中的细菌素产生特点

植物乳杆菌KLDS1.0391能够合成细菌素,也是益生菌,在食品中既可作为益生菌使用,也可作为辅助发酵剂用于生物防控,该研究主要考察了KLDS1.0391菌株在酸奶体系中细菌素的产生特点。研究结果表明,在发酵的6 h期间,抑菌活性随发酵时间延长而增强,发酵结束时,添加植物乳杆菌KLDS1.0391酸奶组的抑菌活性显著高于仅使用酸奶发酵剂的对照组(P<0.01)。与对照组相比,加入辅助发酵剂的实验组的感官品质未发生明显的变化。植物乳杆菌KLDS1.0391具备开发益生酸奶的潜力。     

益生菌抗氧化活性及菌体抗氧化相关成分的分析

目的比较乳杆菌、双歧杆菌、嗜热链球菌和乳酸乳球菌的抗氧化活性,分析抗氧化活性较高菌株内与抗氧化相关的成分。方法采用清除DPPH自由基、清除羟自由基以及抗脂质过氧化能力3种方法评价40株益生菌的抗氧化活性,选出抗氧化活性较高的菌株分析其超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和总巯基化合物(TTG)的含量。结果所比较的40株益生菌的抗氧化能力差别较大,既具有种属特异性,又具有菌株特异性;7株嗜热链球菌和11株乳酸乳球菌中的SOD活性最高[(平均分别为124.02U/mg(蛋白质)和107.10U/mg(蛋白质)]、2株双歧杆菌中GSH的含量最高(平均为311.03μmol/L细胞破碎液),所分析的菌株中TTG含量均较高。研究结果表明,实验菌乳酸乳球菌清除自由基能力最强,其次是嗜热链球菌,所试验的乳杆菌和双歧杆菌最弱;SOD对益生菌的抗氧化起主要作用;GSH的存在因种属和菌株的不同而差别较大;TTG对益生菌的抗氧化起了积极作用。     

青春双歧杆菌增菌培养基的优化

针对青春双歧杆菌的营养需要 ,采用正交实验优化基础培养基及增殖因子的用量。得出最佳基础培养基配比是 :大豆蛋白胨 1 2 % ,胰蛋白胨 0 6 % ,酪蛋白水解物 0 6 % ,牛肉浸膏 0 6 % ,葡萄糖 1 % ,低聚糖 0 5 % ,乳糖 0 5 % ,酵母浸出粉 0 7%。最佳增殖因子添加量是 :胡萝卜汁 1 5 % ,番茄汁 5 % ,肝浸液 1 5 % ,胱氨酸 0 0 5 %。最后使用优化出的增菌培养基配比测定生长曲线 ,同时测定 pH和滴定酸度的变化 ,确定增菌培养终止时间为 1 2h ,通过平板菌落计数 ,此时菌数可达 2 9× 1 0 9cfu/mL。     

提高食品中益生菌数量的两大新技术

益生菌是一种对人类健康起着重要作用的微生物,并广泛应用于食品生产,然而,益生菌自身比较脆弱,容易受周围环境的影响而导致食品中益生菌菌数的快速下降,严重影响了益生菌的益生作用,因此,对益生菌进行包埋,提高食品中益生菌的稳定性和存活能力将对我们进一步开发益生菌系列产品至关重要.本文根据目前国内外益生菌包埋技术研究的现状,对目前研究较多的微胶囊包埋技术和双层包埋技术的原理,优缺点以及实际应用情况进行综述。     

益生菌的安全性评价

过去几十年，益生菌被广泛应用于食品和医药等领域.选择和应用益生菌时，不仅要考虑益生菌的功能特性，安全性也是必须要考虑的方面.随着科学的不断发展，对益生菌的安全性认识也在发生变化，传统益生菌的安全性需要重新评价，新的益生菌菌种也不断地开发， 这些新菌种在使用前也应进行安全性评价.目前我国需要完善对这些新菌种进行系统的安全性评价的程序.本文综述了益生菌潜在的危险因素、转基因益生菌的安全性，安全性评价程序和国外如美国、欧盟、德国等国对益生菌的评价体系。     

添加物对发酵风干香肠的影响

为了促进乳酸发酵、提高风干香肠的保水性,本研究选用脱盐乳清粉、复合磷酸盐、酪朊酸钠及饴糖添加到哈尔滨正阳楼风干香肠肠馅中,结果表明几种添加物对风干香肠总菌数、pH值、水分含量、感官评价等均有不同程度的影响,以发酵成熟的前期影响最大,发酵第8d后几乎没有影响.     

一月龄婴儿粪便菌群对五种非消化糖的体外发酵作用

通过体外发酵培养研究一月龄婴儿粪便菌群对低聚果糖、低聚半乳糖、低聚木糖、菊粉、聚葡萄糖五种非消化糖的发酵作用。采用实时荧光定量PCR技术分析培养完成的发酵液主要细菌组成特点,利用高效液相色谱法分析培养完成的发酵液中乳酸及短链脂肪酸含量。qPCR扩增结果表明:低聚果糖能显著促进婴儿粪便中双歧杆菌属、乳杆菌属的生长,抑制梭菌属的增殖(P<0.05),与空白组的菌属含量比值分别为1.12、1.07、0.92;低聚半乳糖可显著抑制肠杆菌的增殖(P<0.05),与空白组的比值为0.98;低聚木糖可显著降低肠球菌属的含量(P<0.05),与空白组的比值为0.97。色谱检测结果显示:婴儿粪便发酵低聚果糖生成的乳酸、乙酸、丁酸均为最高,含量分别为23.00、11.10、1.47 mmol/L,且生成的乳酸及短链脂肪酸总含量也为最高,含量为40.03 mmol/L。低聚木糖组发酵液中丙酸含量最高,含量为5.35 mmol/L。结果表明,综合对比五种非消化糖对一月龄婴儿粪便中益生菌群促进作用及生成有益代谢产物的能力,低聚果糖是最适于促进一月龄婴儿肠道健康的非消化糖。此外,在试图通过非消化糖调节婴儿肠道菌群时,应注意食物因子的选择不同于成人。