基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱结合化学计量学技术筛查原奶掺假研究

目的 利用基质辅助激光解析/电离飞行时间质谱 (Matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF) 结合化学计量学方法快速筛查鲜奶掺假。方法 样品经0.1%三氟乙酸水溶液稀释50倍,与10 mg/mL芥子酸溶液等体积混合,取2 μL混合液点靶板,待样品干燥后载入MALDI-TOF,MALDI-TOF在线性模式下采集数据。通过主成分分析 (Principal Component Analysis, PCA)分析不同来源的数据,建立鲜奶蛋白质信息数据库。通过检测掺假样品并与数据库进行比较,评估检测方法性能。结果 确定了MALDI-TOF蛋白质图谱可做为鲜奶的指纹图谱。建立了一个涉及2个产地和季节的鲜奶蛋白质信息数据库。方法能够检测含有0.3% (w/w) 猪皮明胶、大豆分离蛋白或乳清蛋白的掺假样品。方法操做简单快速,从进样到获得结果,一个样品仅需几分钟。结论 MALDI-TOF结合化学计量学方法能够快速检测在0.3% (w/w) 浓度下含有猪皮明胶、大豆分离蛋白或乳清蛋白的鲜奶掺假。     

液相色谱-串联质谱法测定牛乳基婴幼儿配方奶粉中的乳铁蛋白

目的建立液相色谱-串联质谱法(liquid chromatography-tandem mass spectrometry, LC-MS/MS)测定牛乳基婴幼儿配方奶粉中的乳铁蛋白含量的方法。方法试样中的乳铁蛋白经尿素-碳酸氢铵缓冲液提取,二硫苏糖醇还原,碘乙酰胺烷基化,37℃酶解后,特征肽段用液相色谱-串联质谱正离子模式测定,内标法定量。结果乳铁蛋白在0.00080-0.16 pmol/μL（相当于10~2000 mg/100 g）水平间线性关系良好,相关系数r≥0.9990,检出限为0.0020 pmol/μL,相当于25 mg/100g。检测结果加标回收率为92.00%~101.90%,相对标准偏差2.96%~4.15%。结论该方法准确好、特异性强、灵敏度高,可用于牛乳基婴幼儿配方奶粉中的乳铁蛋白含量的测定。     

基于自编码收缩神经网络的奶粉掺杂快速拉曼成像检测

建立一种快速的奶粉掺杂拉曼成像识别方法,开发了自编码收缩神经网络重构算法,从低信噪比的短时拉曼成像信号中准确提取本征信号,并有机结合多元回归技术对奶粉中掺杂物进行定量分析,极大提升了拉曼成像扫描速度。在多种掺杂奶粉样本的定量检测中,该方法所建立的定量模型R2均达到了0.95以上,其检测速度较传统拉曼成像技术提升了30 倍,可在2 min之内完成50 mm×50 mm区域内的奶粉掺杂检测。结果表明,该方法可有效满足奶粉掺杂快速检测的实际需求,并为其他非均匀食品体系掺杂快速检测提供了一种新方法。     

高效液相荧光色谱法检测婴幼儿配方食品中7种母乳低聚糖

目的 建立高效液相荧光色谱法(high performance liquid chromatography with fluorescence detector,HPLC-FLD)检测婴幼儿配方食品配方奶粉中7种母乳低聚糖(human milk oligosaccharides,HMOs)的分析方法。方 法婴幼儿配方食品复溶后,首先通过酶解处理(β-半乳糖苷酶和淀粉葡萄糖苷酶)去除婴幼儿配方食品基质中存在的HMOs干扰物,例如麦芽糖糊精和低聚半乳糖,酶解后向样品溶液中添加内标物质,后使用衍生化方法使得目标HMOs和内标物质均标记荧光基团(2-氨基苯甲酰胺),即可运用HPLC-FLD对其进行检测。该方法使用HMOs外标法进行目标物的定量分析,且标准物质信号均亦通过内标物矫正。结果 婴幼儿配方食品中7种HMOs可通过酶解、衍生及HPLC-FLD检测,使用外标法进行定量分析。通过内标物质可矫正信号,减少实验偏差。7种HMOs[2’-岩藻糖基乳糖(2’-fucosyllactose,2’-FL)、3-岩藻糖基乳糖(3-fucosyllactose,3-FL)、双岩藻糖基乳糖(difucosyl...     

大米免疫活性肽水解用酶的筛选

研究Neutrase、Acalase 2.4 L、Papain、Pepsin、Trypsin、Flavourzyme、Acid protease、Protamex与Bromelain 9种蛋白酶水解大米蛋白的进程特性,考察9种蛋白酶水解物的免疫活性。结果表明,胰脏蛋白酶Trypsin可作为制备大米免疫活性肽的最适水解酶,Trypsin酶解物对小鼠巨噬细胞(RAW264.7)的增值指数(stimulating index,SI)为1.597(1 000μg/m L);其酶解物中相对分子质量1 000的组分比例最高,达到74.11%。     

免疫活性肽的酶法制备及其活性机制研究进展

越来越多的亚健康人群需要提高免疫力,免疫活性肽作为安全无副作用的免疫调节剂,在食品与药品等领域已显出其独特的优势,研究高纯度免疫活性肽的高效制备方法与免疫活性机制具有重要意义。文章对免疫活性肽的酶法制备、分离纯化和活性机制的研究进展进行综述,以期为肽类免疫调节剂的研究与开发提供理论参考。     

气相色谱-高分辨质谱法定性筛查小麦面粉中农药残留

目的 开发和验证用于小麦面粉中农药残留定性筛查的气相高分辨质谱联用方法。方法 小麦面粉样品在乙腈和柠檬酸缓冲液中混匀，加入硫酸镁和氯化钠进行盐析，混匀静置后完成液液萃取。随后上清液经过N-丙基乙二胺和碳十八官能团净化除去杂质，硫酸镁去除水分。再经过氮吹浓缩，进样气相色谱飞行时间质谱进行分析，以全扫描模式进行数据采集。最后通过高分辨质谱数据库比对和质谱工作站的自动积分完成筛查工作。结果 气相色谱飞行时间质谱提供了全面准确的离子扫描结果，当截断值为20%，400种农药都能在4 μg/kg的水平下得到正确的筛查结果，其中假阴性和假阳性率都低于5%。结论 该方法实现了高通量的农药残留筛查，结果准确，适用于小麦面粉样品中的挥发性，半挥发性农药残留的多组分筛查。