来源于P.bacterium 1109的甘露醇脱氢酶的重组纯化及酶学性质研究

本文将来自P.bacterium 1109的甘露糖醇脱氢酶(MDH)表达并提取纯化,研究了该重组酶的酶学性质及其在甘露醇生产中的工艺条件。结果显示重组MDH是一个相对分子量为37 kDa的四聚体。氨基酸序列比对发现其与大多数MDHs的同源性小于40%。该酶的最适pH和温度分别为8.5和80℃,且当金属离子Zn2+存在时,重组MDH的活力提高到对照组的260%。此外,重组MDH在75℃孵育6 h后仍可保留超过85%的残留活性,热稳定性较高,比大多数MDHs的活性高。底物特异性研究表明其对D-果糖具有较高的专一性。重组MDH催化D-果糖的米氏常数(K_m)和催化效率(k_cat/K_m)分别为20 mmol/L和7.5 L/(mmol·min)。重组MDH在以400 mmol/L的D-果糖为底物的反应系统中,可将80%以上的D-果糖转化为甘露糖醇。通过对反应条件的优化,为后续工业化生产制备甘露醇奠定了基础。     

Microbulbifer salipaludis褐藻胶裂解酶的酶学性质研究

为获得可高效生产褐藻寡糖的褐藻胶裂解酶,该文筛选出一种来源于Microbulbifer salipaludis的褐藻胶裂解酶（Microbulbifer salipaludis alginate lyase,Misa-aly）,并在大肠杆菌 Escherichia coli BL21（DE3）异源表达,分离纯化后进行酶学性质鉴定。结果表明,该酶最适pH值为8.5（Tris-HCl缓冲液）,最适温度为45℃,偏好底物为聚甘露糖醛酸,40℃下保温1 h酶活下降约50%。Misa-aly对Na+依赖性较低,以海藻酸钠为底物通过3,5-二硝基水杨酸（3,5-dinitrosalicylic acid,DNS）法测定酶活为（53.0±1.2）U/mg,反应产物是聚合度为2～4的寡糖,24 h后酶解转化率达到94.7%,底物海藻酸钠几乎全部酶解。     

微生物菊糖蔗糖酶及在食品中的应用研究进展

菊糖作为一种可溶性膳食纤维,具有良好的理化性质和重要的生理功能,因此,在食品中应用广泛。菊糖蔗糖酶能够以蔗糖为唯一底物,一步合成高分子质量的微生物菊糖。目前鉴定的菊糖蔗糖酶有15 种微生物来源,其中一种的晶体结构已经被解析。国内关于菊糖蔗糖酶的研究鲜有报道。本文对菊糖蔗糖酶的晶体结构和反应机理进行了综合分析。着重讨论了菊糖的链长调控以及菊糖蔗糖酶在生产高分子质量菊糖、低聚果糖、新型低聚糖和菊糖纳米材料方面的应用。最后,结合菊糖蔗糖酶的研究,探讨其发展趋势。     

双酶作用体系下呕吐毒素的高效降解

目的 挖掘呕吐毒素(deoxynivalenol, DON)降解酶,应用双酶体系实现呕吐毒素的高效降解。方法 利用生物信息学技术从国家生物技术信息中心(National Center for Biotechnology Information, NCBI)数据库筛选潜在DON降解酶AKR18A2,在大肠杆菌EscherichiacoliBL21(DE3)中进行重组和异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-thiogalactoside,IPTG)诱导表达,经镍亲和层析纯化并鉴定AKR18A2的酶学性质,构建德沃斯氏菌(Devosiasp.)来源的DON降解酶QDDH和AKR18A2双酶作用体系,实现DON的高效降解。结果 来自鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)的呕吐毒素降解酶(AKR18A2)由343个氨基酸组成。该酶属于醛酮还原酶超家族,45℃和pH7.0为最适反应条件。AKR18A2可在24h内降解15.42%DON,而双酶(QDDH和AKR18A2)协同作用4h后对DON的降解率可提高至98.02%。结论 本研究鉴定了一种新型DON降解酶AKR18...     

多氯乙酰氯的气相色谱分析

用气相色谱TCD和FID检测器对多氯乙酰氯及其酸化产物的成分和纯度进行了分析,用正丙醇对其进行衍生化,酯化率大于99.6%.生成的酯化产物用毛细管色谱法分析,分离效率高、重现性好、检测结果准确可靠,9次分析的变异系数为0.45%,在工业产品的检测中取得满意的结果.     

乳酰-N-新四糖的生理功能、生物合成及其衍生化研究进展

本文合成并表征P2Mo17Ni、P2Mo17Cr、P2Mo17Co和P2Mo18 4种Dawson型多金属氧酸盐，通过循环伏安法研究不同多酸浓度和不同扫速下4种多酸水溶液的电化学性能，并在适宜条件下催化不同浓度的酪氨酸酶，研究多金属氧酸盐水溶液对酪氨酸酶的催化作用，研究果表明:4种化合物的氧化还原过程均属于扩散控制过程，对酪氨酸酶的电化学传感均显示出良好的稳定性，且响应电流与酪氨酸酶含量之间具有良好的线性关系，其中P2Mo17Ni的检测效果是4种化合物中最优的。通过计时安培曲线可知P2Mo17Ni对酪氨酸酶的最低检出限(S/N=3)可以达到0.4095 U/mL。将此方法应用于对虾中酪氨酸酶含量的检测，样品的回收率为98.0477%～99.5872%。此方法的选择性好，在多种干扰物质共存时，其检测结果几乎不受影响。这说明该修饰电极具有较高的准确性和稳定性。本研究为用此法检测南美白对虾及其它水产品中的酪氨酸酶含量，进而实现对它们的质量评价提供理论依据。     

高回弹聚氨酯块状软泡的研制

研究了发泡中聚合物多元醇的用量、交联剂用量以及TDI80与PAPI配比等主要因素对聚氨酯泡沫性能的影响。确定了用聚醚多元醇JH-820与聚合物多元醇JH-943全水发泡制备高回弹聚氨酯块状软泡的配方。     

弱酸特性D-来苏糖异构酶分子改造及D-甘露糖生产

本文旨在对来源于Thermoprotei archaeon菌株的D-LI（最适pH6.5）进行弱酸特性改造,以期该酶在pH5.5条件下生产D-甘露糖,从而抑制原有的美拉德反应,减少分离成本。基于蛋白序列比对及酸碱氨基酸置换策略,首先设计了8个单点突变,而后从中选择3个优良单点突变体E82K、P105K、E165K进一步进行两两组合双点突变。结果表明双点突变体E82K/P105K较野生酶的最适pH由6.5迁移至6.0,且在pH5.5条件下的酶活是原始酶的3.4倍。该突变体在以D-果糖和D-甘露糖为底物时的动力学参数K_m值分别为78.77 mmol/L和328.12 mmol/L,k_cat/K_m值分别为15.37 mmol/L?1·min?1和48.92 mmol/L?1·min?1。以80 g/L的D-果糖为底物反应10 h后,双点突变体E82K/P105K在pH5.5反应时的转化率较接近于原始酶在pH6.5时的转化率,美拉德反应程度较原始酶降低了约3~4倍,为工业上利用D-LI生产D-甘露糖提供了可行的酶制剂。     

利用单回路调节器改善主汽温度自动投入质量

包头一电厂１号２２０ｔ／ｈ锅炉是５０年代苏制产品，其主汽温度控制系统为导前微分式自动控制系统，技术性能差，运行不可靠，１９９３年利用单回路调节器取代旧控制系统，并根据减温水调节阀特性对调节功能做了改进，取得了满意的效果。本文主要介绍该项技改的技术构思与实现方案。     

包头第一热电厂2号机转速表的改进

分析了包头第一热电厂转速表无法正常监视的原因，给出了改进方法，取得了良好的效果。