庆大霉素发酵液薄层色谱（TLC）分析方法研究

通过对庆大霉素(GM)薄层色谱(TLC)检测体系进行优化,得出了最佳的制板条件,最佳展开剂系统以及显色系统,并对该检测方法的重复性以及检测限进行了考察.最终将得到的最佳检测体系应用到庆大霉素发酵液的检测中,成功实现了对发酵液主组分C1,C1a,C2(C2a C2)的有效分离检测,分离度及 R f 值均达到要求.并且,通过对发酵液进行简单的纯化浓缩后,运用该检测体系成功实现对10个组分的有效检测.另外,将该TLC体系与微生物效价检定法结合,可以较准确地得到各组分的含量比,通过与HPLC检测结果进行比较,发现结果基本一致.该方法简单快速,结果可靠,能满足发酵试验与生产中对成份需要快速检测的要求.     

酱油变质微生物因素及乳酸菌在防腐中的应用

酱油是经微生物发酵制成的具有独特色、香、味的液体调味品。酱油中含有充足的营养物质,并且酱油发酵体系多为混菌体系,因此在酱油发酵、生产和贮藏过程中容易因污染腐败菌出现“生花”、变馊、胀袋、沉淀、浑浊等现象,导致酱油的腐败变质。该文详细阐述了酱油中存在的腐败微生物种类和由它们引起的酱油变质现象,以及通过发酵工艺优化、添加防腐剂和生物技术等手段防止酱油腐败的相应措施。最后概述了乳酸菌的抗菌代谢产物种类与抑菌特性,并讨论了乳酸菌在酱油防腐中的应用潜力,以期为开发保障酱油品质稳定和提升的方法提供经验和参考。     

L-苏氨酸发酵法工业生产的研究

采用乳糖发酵短杆菌(Brevibacterium lactofermentum) ZT-1株进行5001和6000罐L-苏氨酸发酵扩大试验,在以工业葡萄糖、硫酸铵为主原料的培养基中发酵,可产20g/1以上的L-苏氨酸,最高达到24.8g/1。发酵液经离子交换法提取和结晶法精制,获得符合国内外药典标准的医药级产品,收率可达40%以上。现已实现工业化批量生产。     

L-氨基酰化酶产生菌的筛选及其固态发酵工艺

从13株米曲霉菌株中筛选到一株产氨基酰化酶活力较高的米曲霉（Aspergillus oryzae）W0607，以米曲霉w0607为生产菌固态发酵生产氨基酰化酶，较适的培养基组成和培养条件为；麸皮7．0g，豆饼粉3．0g，蛋白胨0．3g，水11mL，PH值6．5，发酵温度28℃，发酵周期约48h．在此条件下，米曲霉W0607的氨基酰化酶产率为400u／g左右．     

半纤维素酶高产菌种的选育及产酶条件

以黑曲霉WA301为出发株，经过紫外诱变获得一株遗传性状稳定的半纤维素酶的高产突变株WA9024．通过对培养基中碳源、氮源、水分和起始pH值的优化，突变株WA9204以麸皮为基质的固态发酵产半纤维素酶的能力进一步得到提高．在较适的条件下，WA9024的甘露聚糖酶酶活达到8984U／g，木聚糖酶酶活达到503U／g，分别比出发菌株提高了1160％和210％。     

真菌α-淀粉酶产生菌的筛选及其固态发酵条件的初步研究

从酒曲和酒药中分离筛选出一株产α-淀粉酶的菌株A019。经形态学初步鉴定为米曲霉。研究了碳源、氮源、培养温度与时间等因素对A019产酶的影响,并用响应面法对培养基组成进行了优化。最佳的培养基组成和培养条件为:麸皮8g,豆饼粉2.28g,酵母膏0.1g,K2HPO4·3H2O1%,MgSO4·7H2O0.094%,加水量12.9ml,培养基的起始pH5.0左右,28℃培养48h。在此条件下α-淀粉酶的酶活达到410U/g干曲左右。     

生物转化法合成葡萄糖基抗坏血酸的产酶菌株筛选及发酵条件优化

从土壤中筛选到1株产α-葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.20,α-glucosidase)的菌株WPD2,通过对其进行形态学和18S rDNA序列分析及系统发育研究,该菌株初步鉴定为黑曲霉(Aspergillus nigerEU366904),该菌经产酶、转化反应后葡萄糖基抗坏血酸产量达到370 mg/L左右。摇瓶实验确定了优化后的产酶条件为:培养温度34℃,培养时间60 h,以110 g/L的麦芽糖为碳源、10 g/L的(NH4)2SO4为氮源,优化后葡萄糖基抗坏血酸产量达到410 mg/L左右。     

碱性脂肪酶高产菌的平板筛选模型

通过研究三丁酸甘油酯和丁酸对圆弧青霉白色变株PI4 2生长及产脂肪酶的影响 ,建立了碱性脂肪酶高产菌的平板筛选模型。以该模型对PI4 2进行自然分离 ,从中得到一株遗传性状稳定的高产菌 ,脂肪酶产率提高了 85%。该菌株在 2 5L罐中采用流加发酵工艺培养 72h ,发酵产酶水平达到 550 0U/mL。     

半纤维素酶高产菌种的选育及产酶条件

以黑曲霉WA301为出发株,经过紫外诱变获得一株遗传性状稳定的半纤维素酶的高产突变株WA9024.通过对培养基中碳源、氮源、水分和起始pH值的优化,突变株WA9204以麸皮为基质的固态发酵产半纤维素酶的能力进一步得到提高.在较适的条件下,WA9024的甘露聚糖酶酶活达到8984U/g,木聚糖酶酶活达到503U/g,分别比出发菌株提高了1160%和210%.     

高产α-酮戊二酸解脂亚洛酵母的选育及其发酵过程优化

为了提高解脂亚洛酵母(Yarrowia lipolytica)发酵生产α-酮戊二酸(α-ketoglutaric acid,α-KG)的效率,对前期获得的1株α-酮戊二酸高产菌株1-C6进行了迭代诱变处理,并对最终获得的高产突变菌株进行了系统的发酵过程优化。首先,基于前期构建的高通量筛选方法,应用甲基磺酸乙酯(ethylmethylsulfone,EMS)、亚硝基胍(nitroso-guanidin,NTG)和紫外(ultraviolet,UV)等诱变方法对菌株1-C6进行迭代诱变,最终获得了1株高产突变菌株4-E2,其α-KG的产量相对出发菌株1-C6提高了56.7%。在3 L发酵罐水平上研究了搅拌转速、通风比、乙酸钠和CaCO 3添加量等条件对高产突变菌株4-E2积累α-KG的影响。结果表明,较高转速的两阶段通风比更适合于α-KG的生产,乙酸钠和CaCO 3的最佳添加量分别为6 g/L和10 g/L。在此基础上进行补料发酵策略的探索,确定了恒速连续补料发酵的策略,α-KG产量达75.86 g/L,相比分批发酵提高了44.4%。研究结果为促进发酵法生产α-KG的工业化提供了借鉴意义。