新疆芜菁酸性多糖分离纯化、抗氧化活性研究及红外表征

目的 检测分离纯化的芜菁酸性多糖(Brassica rapaL.acidic polysaccharide,BRAP)的含量和纯度,并对其进行抗氧化能力检测和红外表征。方法 (1)经阴离子交换柱DEAE-650M、HW-55F色谱柱以及Sephacryl S-300色谱柱洗脱分离纯化芜菁多糖;(2)采取紫外-可见分光光度法及苯酚-硫酸法测定芜菁酸性多糖的含量;(3)经由测定芜菁酸性多糖羟基自由基(·OH)清除能力,1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基(·DPPH)清除能力、金属Cu²⁺还原能力来评价其抗氧化活性,并与VC抗氧化能力进行对比;(4)应用红外光谱分析芜菁酸性多糖的化学键或官能团信息,通过高效凝胶渗透色谱法对芜菁酸性多糖的均一性分析。结果 芜菁酸性多糖的含量为55.47%;芜菁酸性多糖对·DPPH和·OH有一定清除能力,对金属Cu²⁺也有还原能力,但均比VC弱,红外光谱分析显示,芜菁酸性多糖中有多羟基醛糖的特征吸收峰以及与抗氧化活性相关的羟基。高效凝胶渗透色谱图显示芜菁酸性多糖为高纯度多糖。结论 新疆芜菁中有含量较为丰富且纯度较高的酸性多糖组分,且该成分具有较好的抗氧化活性。     

新疆芜菁多糖含量测定及提取工艺优化

目的探究芜菁水溶性成分多糖的最佳提取工艺及含量测定。方法通过正交实验设计来选择芜菁水溶性成分多糖的最佳水提工艺;以葡萄糖为对照品,使用紫外-分光光度法测定其含量。结果水提的最佳提取工艺:回流时间为2 h,回流温度为90℃,回流次数为3次,料液比为1:30 g/mL。新疆芜菁多糖在0.02~0.10 mg/mL范围内呈良好线性关系,回归方程为Y=0.819X+0.0029, r=0.9995,平均回收率为98.3%,相对标准偏差为2.0%,并测得多糖总含量为8.99%。结论该提取方法方便、合理,满足多糖的分析方法要求;紫外-分光光度法简便易行,精密度、稳定性、重现性均良好。     

库尔勒香梨粗多糖的免疫调节作用研究

目的探讨库尔勒香梨粗多糖免疫调节作用。方法以血清白介素-2、干扰素-γ、巨噬细胞吞噬指数等为观察指标,探讨其粗多糖免疫调节作用。结果香梨粗多糖高、中、低给药量组具有增加小鼠血清IL-2、IFN-γ含量,增加免疫器官的脾和胸腺的重量,提高巨噬细胞吞噬能力等免疫调节作用。结论库尔勒香梨粗多糖可促进免疫抑制小鼠的白介素-2(IL-2)、干扰素-γ(IFN-γ)的分泌,提高脏器指数、吞噬指数等免疫因子,说明了库尔勒香梨粗多糖有一定的免疫增强作用。     

响应面法优选芜菁中蛋白质的提取工艺及蛋白质抗氧化活性的评估

目的借助单因素实验和响应面法优选芜菁中蛋白质的提取工艺,并评估芜菁蛋白质的抗氧化活性。方法采用超声辅助提取芜菁中蛋白质。通过单因素实验,选取实验因素与水平,分别研究了料液比、超声功率、超声提取时间、提取温度对蛋白提取量的影响。根据Box-Benhnken中心组合实验设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,对蛋白质的提取工艺进行优化,同时通过比较芜菁蛋白质与维生素C对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的清除能力,评估芜菁蛋白质抗氧化活性。结果优化后的芜菁蛋白提取工艺条件为:料液比1:18.88(m/V),超声功率120 W,超声提取时间6.12 min。当芜菁蛋白质溶液质量浓度为25 mg/mL时,对DPPH自由基的清除率为99.3%。在此条件下得出的芜菁的蛋白质含量为21.71 mg/g,与预测值相近。结论在最优条件下,芜菁中蛋白质的提取率得到了提高。其对DPPH的清除能力随其质量浓度的增大而增强;其清除能力弱于抗坏血酸。     

响应面法优化多序岩黄芪根中总皂苷的提取工艺及其抗氧化活性研究

目的通过响应面法优化多序岩黄芪根中总皂苷的提取工艺并对其抗氧化活性进行研究。方法采用乙醇超声提取法对多序岩黄芪根中的总皂苷进行提取,用正丁醇萃取法分离皂苷。以总皂苷得率为考察指标,在单因素实验基础上,研究提取时间、乙醇体积分数、料液比对多序岩黄芪根中总皂苷提取的影响,并采用响应面优化多序岩黄芪根总皂苷的提取工艺。通过测定清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基的能力判断多序岩黄芪皂苷的抗氧化能力,并与VC进行比较。结果优化后的提取工艺为75%乙醇(V/V)、提取时间79 min、料液比1:24(m:V),此条件下5 g原料可提取到12.45 mg多序岩黄芪根皂苷;抗氧化实验结果表明:多序岩黄芪皂苷对DPPH自由基有一定的清除能力,但弱于VC。结论在最优条件下,多序岩黄芪根中总皂苷的提取率得到了提高。     

库尔勒香梨粗多糖镇咳祛痰作用研究

目的探讨库尔勒香梨粗多糖的镇咳、祛痰作用。方法通过浓氨水、二氧化硫刺激法、气管酚红排泄法等实验,观察库尔勒香梨粗多糖的镇咳、祛痰作用。结果库尔勒香梨粗多糖可以延长咳嗽潜伏期,减少咳嗽次数,并可以增加排痰量。结论库尔勒香梨粗多糖有一定的镇咳祛痰作用,为进一步研究库尔勒香梨生物活性奠定了基础。     

库尔勒香梨蛋白质提取工艺优化研究

目的对库尔勒香梨蛋白质的提取工艺优化和含量测定方法进行研究。方法通过正交实验设计来选择香梨水溶性成分蛋白质的优选水提工艺;以牛血清蛋白为对照品,使用紫外-分光光度法测定其含量,并进行了方法学研究。结果水提的优选提取工艺:超声时间为40 min,超声温度为45°C,料液比为1:35(g/mL),超声功率为100 W。库尔勒香梨蛋白质在0.04～0.2 mg/mL范围内呈良好线性关系,回归方程为Y=1.193X+0.036, r~2=0.9995,测得蛋白质其平均含量为16.7%,相对标准偏差为2.25%;并测得蛋白质总含量为1.78%。结论提取方法方便、合理,满足蛋白质的分析方法要求;可见紫外-分光光度法简便易行,精密度、稳定性、重复性均良好。