白藜芦醇对小鼠脾淋巴细胞免疫调节活性的影响

研究了白藜芦醇（Res）对小鼠脾淋巴细胞免疫调节活性的影响。无菌分离小鼠脾,制备淋巴细胞,并用含10%胎牛血清的RPMI 1640培养,在培养液中分别加入刀豆蛋白A（Con A）、脂多糖（LPS）以及5、10、20、40μg/m L不同浓度的Res,经过不同时间培养后,采用MTT法检测淋巴细胞的增殖,ELISA法检测淋巴细胞分泌IL-4和IL-12的水平,流式细胞仪检测淋巴细胞的细胞周期和细胞膜表面标志。结果表明:Res能够促进小鼠脾淋巴细胞增殖,能与Con A协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖,不能与LPS协同促进小鼠脾淋巴细胞增殖;能增强IL-4和IL-12的分泌;能提高小鼠脾淋巴细胞CD4+/CD8+的比值;能提高脾淋巴细胞周期中细胞进入S期细胞的百分率。综上,Res能增强小鼠脾淋巴细胞的免疫调节活性。      

紫薯花色苷对小鼠淋巴细胞免疫功能的调节作用

为探讨紫薯花色苷(PSPA)免疫调节作用,制备小鼠脾淋巴细胞,MTT法检测不同浓度PSPA对淋巴细胞增殖的影响;采用流式细胞术检测不同浓度PSPA对淋巴细胞膜表面标志和细胞周期的影响。结果:PSPA各浓度组淋巴细胞刺激指数均极显著(p<0.01)高于空白对照组;PSPA 20 mg/mL浓度组淋巴细胞刺激指数极显著(p<0.01)高于阳性对照组。PSPA 2.5 mg/mL浓度组淋巴细胞亚群CD4⁺/CD8⁺比值显著(p<0.05)高于空白对照组,PSPA 5、10和20 mg/mL浓度组淋巴细胞亚群CD4⁺/CD8⁺比值均极显著(p<0.01)高于空白对照组;PSPA 2.0浓度组淋巴细胞亚群CD4⁺CD8⁺百分率均极显著(p<0.01)高于阳性对照组。PSPA各浓度组处于S期的淋巴细胞的百分率均极显著(p<0.01)高于空白对照组。PSPA 20 mg/mL浓度组处于S期的淋巴细胞的百分率均极显著(p<0.01)高于阳性对照组。表明PSPA通过促进淋巴细胞增殖、提高CD4⁺/CD8⁺亚群比值、增加进入S期细胞的百分率,从而调节淋巴细胞的免疫功能。结论:PSPA具有明显的免疫调节活性。     

大蒜素对脂多糖诱导腹腔巨噬细胞炎症反应的抑制作用及机制

目的:探讨大蒜素对脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应的抑制作用及机制。方法:建立LPS诱导小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应细胞模型,并用地塞米松和不同浓度大蒜素处理,MTT法检测细胞活力,中性红吞噬实验检测吞噬能力,Griess法检测一氧化氮(NO)及ELISA法检测COX-2酶活性和IL-6的分泌,qPCR检测环氧合酶2(COX-2)、一氧化氮合酶(iNOS)和IL-6的mRNA表达水平,Western Blot检测COX-2、iNOS和IL-6的蛋白表达以及核转录因子NF-κB p65及其磷酸化产物的相对表达。结果:大蒜素浓度在40~160 μg/mL范围内对腹腔巨噬细胞均无细胞毒性;与LPS组比较,大蒜素处理组能促进腹腔巨噬细胞的吞噬能力,能显著(P<0.05)抑制炎症因子COX-2酶活性、NO和IL-6的分泌,能显著(P<0.05)抑制基因COX-2、iNOS和IL-6 mRNA和蛋白的相对表达,并极显著(P<0.01)抑制NF-κB p65信号通路的磷酸化。结论:大蒜素能显著抑制LPS诱导的小鼠腹腔巨噬细胞的炎症反应,其机制可能与抑制NF-κB信号通路激活有关。     

苦瓜多糖对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的影响（网络首发、推荐阅读）

以苦瓜多糖(MCP)为研究对象,在细胞和分子水平上探讨其对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用机制。以空白组和左旋咪唑组为对照,小鼠脾淋巴细胞经不同质量浓度(40,80,160,320μg/mL)的MCP体外刺激,检测MCP对小鼠脾淋巴细胞增殖的影响,腹腔巨噬细胞的吞噬活性,淋巴细胞上清液中IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12分泌与mRNA表达水平。分析发现,与空白组相比,随浓度的升高细胞增殖指数倍数增长(P<0.05),MCP能不同程度的促进细胞增殖、不同程度的增强巨噬细胞的吞噬能力(P<0.05);与空白组相较,细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的分泌量最大增幅分别为:42.73%、18%、27.81%、29.42%;IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的mRNA表达显著上升,最高表达水平分别为空白组的9.18、7.53、9.37、8.95倍,存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,MCP能有效提高细胞因子IL-4、IFN-γ、IL-6和IL-12的分泌和mRNA表达水平,促进细胞增殖,增强巨噬细胞的吞噬活性,从而提高机体免疫功能。     

洋葱槲皮素对脂多糖诱导的小鼠腹腔巨噬细胞炎症反应抑制作用

为探讨洋葱槲皮素的抗炎作用,本研究以小鼠腹腔巨噬细胞为模型,采用MTT法检测洋葱槲皮素单药组、洋葱槲皮素与LPS复合药组对巨噬细胞吞噬功能的影响;采用ELISA法检测洋葱槲皮素单药组、洋葱槲皮素与LPS复合药组对小鼠腹腔巨噬细胞分泌细胞因子和炎症介质的影响。结果显示,洋葱槲皮素能够提高巨噬细胞的吞噬功能;洋葱槲皮素单药、洋葱槲皮素与LPS复合药组刺激巨噬细胞,均能够抑制巨噬细胞IL-1β和COX-2的产生。结论:洋葱槲皮素可能通过提高巨噬细胞的吞噬功能、影响细胞因子和炎症介质的分泌,而发挥抗炎作用。      

芦荟多糖对D-半乳糖致HepG2细胞氧化损伤的保护作用

目的:探讨芦荟多糖对HepG2细胞氧化损伤的保护作用,分析其体外抗氧化能力。方法:以HepG2细胞为研究对象,建立D-半乳糖诱导细胞氧化损伤模型,以不同浓度芦荟多糖进行预保护处理。采用细胞增殖与毒性检测试剂盒测定HepG2细胞存活率,生物化学法检测细胞超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活力,酶联免疫吸附法测定细胞总抗氧化能力及丙二醛（malondialdehyde,MDA）含量,实时荧光定量PCR检测细胞Keap1、Nrf2、NQO1和HO-1基因表达水平。结果:与D-半乳糖模型组比较,25、50、100 μg/mL的芦荟多糖预保护处理能不同程度地提高HepG2细胞存活率;芦荟多糖能显著增强细胞中抗氧化酶的活性,降低细胞MDA的生成量（P<0.05）,且作用效果与芦荟多糖浓度成正比;细胞中Keap1基因表达显著降低,Nrf2、NQO1、HO-1 mRNA表达显著提高（P<0.05）。结论:芦荟多糖可以减轻HepG2细胞的氧化应激损伤,激活Nrf2表达并抑制其泛素化降解,提高下游NQO1、HO-1的转录水平,增强细胞抗氧化酶系活性并调控细胞氧化还原系统,以达到减轻细胞氧化损伤程度、提高细胞抗氧化应激损伤的效果。     

山楂黄酮对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用

为研究山楂黄酮对小鼠脾淋巴细胞的免疫调节作用,将小鼠分为空白组、左旋咪唑组和不同浓度山楂黄酮处理组(100、200、400和800 μg/mL)。利用MTT法检测山楂黄酮对淋巴细胞增殖的影响,ELISA法检测山楂黄酮对淋巴细胞白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-4(IL-4)、干扰素-γ(IFN-γ)的影响,流式细胞术检测山楂黄酮对淋巴细胞膜表面标志物(CD4⁺和CD8⁺)的影响。结果表明,山楂黄酮在100~400 μg/mL对淋巴细胞增殖和淋巴细胞因子的分泌具有浓度依赖性,IL-6和IFN-γ的分泌极显著高于空白组(P<0.01),IL-4的分泌极显著低于空白组(P<0.01),且400 μg/mL处理组与左旋咪唑组无统计学意义(P>0.05);对淋巴细胞亚群CD4⁺CD8^-、CD4^-CD8⁺具有浓度依赖性的促进作用,且极显著高于空白组、左旋咪唑组(P<0.01);对淋巴细胞亚群CD4⁺/CD8⁺百分比极显著高于空白组、左旋咪唑组(P<0.01),200 μg/mL浓度组CD4⁺/CD8⁺的比值极显著高于其它浓度组(P<0.01)。100~400 μg/mL山楂黄酮通过诱导淋巴细胞增殖和淋巴细胞因子IL-6、IL-4和IFN-γ的分泌,提高淋巴细胞亚群CD4⁺/CD8⁺比值,从而发挥免疫调节作用。     

蓝莓花色苷对小鼠淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的免疫调节作用

为探讨蓝莓花色苷对淋巴细胞和腹腔巨噬细胞的免疫调节作用。无菌分离淋巴细胞和腹腔巨噬细胞,制备淋巴细胞和腹腔巨噬细胞悬液,以终浓度为4、8、16、32、64 mg/mL的蓝莓花色苷作用于体外培养的淋巴细胞(48 h)和腹腔巨噬细胞(24 h),采用MTT法检测蓝莓花色苷对淋巴细胞增殖率及中性红吞噬实验检测腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响,ELISA法检测蓝莓花色苷对淋巴细胞(IL-6白细胞介素-6)、(TNF-α肿瘤坏死因子-α)和腹腔巨噬细胞(IL-4白细胞介素-4)、(IL-12白细胞介素-12)分泌的影响。结果显示,蓝莓花色苷各浓度组淋巴细胞增殖率、腹腔巨噬细胞的吞噬活性、培养上清中淋巴细胞IL-6、TNF-α及腹腔巨噬细胞IL-12的分泌高于空白组(p<0.05),各浓度组与阳性组腹腔巨噬细胞IL-4分泌量均低于空白对照组(p<0.05)。蓝莓花色苷可能通过促进淋巴细胞增殖和提高腹腔巨噬细胞吞噬及分泌功能,提高机体免疫功能。     

辣椒碱对金黄色葡萄球菌感染小鼠淋巴细胞和巨噬细胞免疫调节活性的影响

为探讨辣椒碱对金黄色葡萄球菌感染小鼠淋巴细胞和巨噬细胞免疫调节活性的影响,采用MTT法检测辣椒碱对金黄色葡萄球菌感染的淋巴细胞增殖的影响;ELISA法检测辣椒碱对金黄色葡萄球菌感染的淋巴细胞诱导IFN-γ、IL-6分泌的影响,以及辣椒碱对金黄色葡萄球菌感染的巨噬细胞诱导TNF-α、IL-6分泌的影响。结果表明,辣椒碱在一定浓度范围内,能促进对金黄色葡萄球菌感染的淋巴细胞的增殖和诱导IFN-γ、IL-6的分泌,且呈双向调节;能诱导金黄色葡萄球菌感染的巨噬细胞TNF-α、IL-6的分泌,从而发挥免疫调节作用。     

大枣多糖对小鼠淋巴细胞免疫调节作用的研究

研究大枣多糖对小鼠淋巴细胞的免疫调节作用。将小鼠淋巴细胞无菌分离,制备细胞悬液,设计空白组、阳性对照组（左旋咪唑）以及不同质量浓度的大枣多糖组（终浓度为20、40、80、160和320 μg/mL）。按照MTT法观察大枣多糖对小鼠淋巴细胞增殖的影响情况;采用ELISA法观察大枣多糖对小鼠淋巴细胞上清液中IL-2、IL-6、IL-10、IL-12水平的影响;QRT-PCR检测大枣多糖对小鼠淋巴细胞IL-2、IL-6、IL-10、IL-12信使核糖核酸（mRNA）表达的影响。在20~320 μg/mL浓度范围内,大枣多糖能促进小鼠淋巴细胞增殖,同时提高细胞因子的分泌量,进而促进细胞因子IL-2、IL-6、IL-10、IL-12 mRNA表达。在20~320 μg/mL浓度范围内,大枣多糖通过诱导淋巴细胞增殖、淋巴细胞因子IL-2、IL-6、IL-10、IL-12分泌以及mRNA表达,从而提高机体免疫功能。