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采用硫酸铵盐析法及乙醇沉淀法对海洋枯草芽孢杆菌纤溶酶的纯化效果进行比较研究,得到的最佳纯化方案为:取一定体积的纤溶酶发酵液进行预处理,再进行分段盐析及分级沉淀,在分段盐析中,30%和70%饱和度的硫酸铵分别用于去除杂蛋白和沉淀纤溶酶,最后进行碱处理及超滤除盐;在分级沉淀中,最佳乙醇沉淀时间为1.5h,去除杂蛋白和沉淀纤溶酶的乙醇体积比分别为25%和165%,最后将两种方法得到的粗提液进行冷冻干燥,硫酸铵法的酶活回收率为83.52%,纯化倍数为1.42,冻干粉得率为4.812 g/L,单位酶活为76 755.82IU/g;乙醇纯沉淀法的酶活回收率为89.7%,纯化倍数为1.72,冻干粉得率为7.611 g/L,单位酶活为137 190.57 IU/g,该结果表明乙醇沉淀法对纤溶酶的粗提效果要优于硫酸铵盐析法. 相似文献
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响应面分析优化壳聚糖酶产生菌的发酵条件 总被引:2,自引:0,他引:2
采用响应面分析对影响烟曲霉K1(Aspergillus fumigatus K1)生产壳聚糖酶的发酵培养基进行优化.首先采用部分因素试验筛选出影响壳聚糖酶产量的显著因素:牛肉膏和CaCl2.利用最陡爬坡路径逼近最大产酶区域.最后,应用中心组合设计和响应面分析确定烟曲霉K1产壳聚糖酶的最佳培养基组成(%,W/V)为:壳聚糖1.5、牛肉膏2.1、KH2P04 0.1、MgSO4·7H2O 0.1、CaCl2 0.4和Tween 0.1.经过优化,壳聚糖酶产量可达44.24U/ml,比开始条件提高2.4倍以上. 相似文献
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