胆固醇氧化酶高产菌株的诱变选育及产酶条件优化

在对细脚拟青霉、玫烟色拟青霉、粉拟青霉、香菇、平菇、金针菇等胆固醇氧化酶产生菌初筛的基础上．选择以产酶较高的玫烟色拟青霉作为紫外诱变的出发菌株,筛选出一株相对高产突变菌株MFEC006,其酶活达到了0．5483U／mL,比出发菌株提高了154％,经8次传代培养,突变株性质稳定．对MFEC006菌株产酶条件进行优化,得出其最佳产酶条件为：pH为6．5,温度27℃,接种量10％,摇床转速180r／min．     

基于响应面法对枯草芽孢杆菌WB600-eg2发酵产内切葡聚糖苷酶条件的优化

出发菌株枯草芽孢杆菌WB600-eg2是通过分子生物学手段构建的重组菌,内切葡聚糖苷酶酶活为1.174IU/mL.本文通过响应面法对装液量、初始pH、接种量、转速、酵母粉添加量等发酵条件进行优化,得到最优发酵条件为装液量55mL/250mL、初始pH7.2、接种量10%、转速170r/min、酵母粉添加量0.4%.在此发酵条件下测得内切葡聚糖苷酶酶活为1.573IU/mL,比未优化条件下提高了33.9%.     

鲤鱼(Cyprinus Carpio) 促性腺激素基因的克隆、原核表达及多克隆抗体制备

采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,从鲤鱼脑垂体获得了两种GtH β亚基的cDNA, 克隆在pMD18-T载体.经测序确证后,将这两个基因克隆到原核表达载体pET -32(a)中,转化E.coli表达菌BL21(DE3),以IPTG诱导融合蛋白的高效表达.利用初步纯化后的抗原免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体.应用制备的兔抗血清与抽提的鲤鱼脑垂体的总蛋白分别进行Western-blot及ELISA分析,结果显示获得的多抗能特异识别各自的天然蛋白.该结果为纯化天然GtH蛋白提供了有效的检测手段,为进一步制备GtH单克隆抗体奠定了基础.     

毛细管电泳检测发酵液中1,3-二羟基丙酮方法的建立

建立了利用毛细管电泳(CE)技术快速、准确检测发酵液中1,3-二羟基丙酮含量的新方法。所用熔融石英毛细管规格为50μm×60 cm(有效长度为45 cm),分离电压为24 kV,缓冲液为pH9.5的30 mmol/L硼砂缓冲溶液,200 nm处检测DHA。结果表明,DHA标准样品的迁移时间为8.3 min,在100μg/mL～1 000μg/mL范围内线性关系良好(R2=0.999 5),加样回收率为97.79%,RSD为1.81%。测得以甘油作为底物发酵产DHA发酵液中DHA含量为3.220g/L,此方法可有效应用于产DHA发酵过程中产物的检测。     

基于触变效应的湛江组结构性黏土单桩模型试验

基于湛江某桩基工程的实际,利用自制的模型箱装置对湛江组结构性黏土中不同桩长、 桩径的9组模型桩在不同休止龄期的承载性状进行研究,分别测定模型桩应变、 沉降,同时对模型桩的桩周土进行十字板剪切试验以便测定其抗剪强度,探寻湛江组结构性黏土触变性与单桩时效性的量化关系.结果表明:不同桩长、桩径的模型桩极限承载力及桩周土的抗剪...     

沉井下沉阻力监测技术和数值模拟方法发展综述

沉井是用钢筋混凝土材料制成的井筒状结构物。近几年来沉井在国内得到了广泛的应用。对沉井下沉过程中下沉阻力监测技术和数值模拟方法的发展概况进行综述。     

IAHP-GRA模型在滑坡危险性分析中的应用

以藏区高速公路的滑坡为研究对象,选取岩性等级、地质构造、坡体结构、滑体体积、滑面特征等指标,通过构建100分危险序列和最大值危险序列,采用IAHP-GRA模型对滑坡危险性进行分析。研究结果表明：(1) IAHP-GRA仅需构造最危险序列,流程简单,计算简便,且结果与IAHP的模糊综合评价趋于一致;(2)最大值危险序列的区分度为0.008,100分危险序列的区分度为0.002,最大值危险序列比100分危险序列具有更好的区分度;(3)当灾害点危险性等级相同时,IAHP的模糊综合评价无法区分灾害点危险性的大小关系,IAHP-GRA可弥补该缺陷,为局部工程选址、选线提供参考。