云南省食品中金黄色葡萄球菌耐药性和mecA基因的检测及分析

目的调查2010—2016年云南省不同食品中分离的金黄色葡萄球菌的抗生素耐药情况,了解多重耐药(MDR,即耐3类或3类以上抗生素)菌株和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)分布以及mecA基因的携带率,为有效防控金黄色葡萄球菌食物中毒和临床感染提供基础数据及参考。方法采用VITEK 2 Compact全自动细菌鉴定仪、GPI鉴定卡及AST-GP67进行药敏试验,聚合酶链式反应(PCR)法进行mecA基因检测。结果 325株金黄色葡萄球菌分离株耐药率为92.00%(299/325),前3位的分别是青霉素G(88.00%,286/325)、四环素(43.38%,141/325)、红霉素(40.92%,133/325),未检出耐喹奴普汀/达福普汀、万古霉素、力奈唑烷和替加环素的耐药株;MDR菌株检出率为47.69%(155/325),MRSA检出率为13.23%(43/325)。不同食品对青霉素G、四环素和呋喃妥因的耐药率差异有统计学意义(P0.05);餐饮食品、肉与肉制品、速冻米面制品中均检出九重耐药菌株;MRSA在水产品中占33.33%(1/3),肉与肉制品占17.89%(17/95),焙烤食品占16.67%(3/18),乳与乳制品占14.29%(3/21),餐饮食品占12.41%(17/137),速冻米面制品占5.71%(2/35),差异均无统计学意义(P0.05),婴幼儿食品、冷冻饮品和豆制品未检出MRSA。不同年份分离株对环丙沙星、莫西沙星和复方磺胺甲噁唑的耐药率差异有统计学意义(P0.05),2012—2015年均检出九重耐药株;2015年MRSA占比为20.00%(12/60),2014年占16.47%(14/85),2013年占14.12%(12/85),2012年占6.82%(3/44),2011年占10.00%(2/20),2010和2016年未检出MRSA。43株MRSA药敏试验显示耐药率最高的主要为青霉素G(100.00%,43/43),呈多重耐药性,未检出耐万古霉素的MRSA,mecA基因的检出率为37.21%(16/43)。结论食品中金黄色葡萄球菌的分布、抗生素耐药变化和发展趋势值得关注,有利于食源性疾病防治和指导临床合理选用抗生素,延缓细菌耐药株的产生。     

2014—2021年云南省水产品病原生物监测结果分析

目的 分析云南省水产品病原生物污染情况,为食源性疾病防控策略提供依据。方法 2014—2021年,按年度对云南省16个州市水产品开展随机抽样监测,以统计学方法分析不同病原生物在水产品类型、地区、季节分布上的差异以及可能的污染途径。结果 在3 540份生鲜、冷鲜、冷冻(糜制品)、即食4类水产样品中,检出9种致病菌、1种寄生虫,总检出率为10.8%(383/3 540),致病菌中检出较多的为副溶血性弧菌(10.3%,139/1 347)、单核细胞增生李斯特菌(4.2%,41/980)、沙门菌(3.3%,32/980);寄生虫中广州管圆线虫在中间宿主中感染较为普遍(9.0%,167/1 861),其他病原生物检出率较低。病原生物在不同类型水产品中检出率差异有统计学意义(χ²=34.077,P<0.001),以生鲜、冷鲜水产中检出为主;分层χ²检验显示,部分病原生物在地区分布、产地及采样场所存在有检出差异;副溶血性弧菌(χ²=15.850,P=0.001)、溶藻弧菌(χ²=8.400,P=0.029)...     

云南省牛乳中单核细胞增生李斯特氏菌的分布特征、耐药性及毒力研究

目的分析云南省牛乳中单核细胞增生李斯特氏菌(Listeria monocytogenes)的分布特征、耐药性及毒力现状。方法采集云南省主要奶产区牛乳样本,按照GB 4789.30—2016方法分离单核细胞增生李斯特氏菌疑似菌株,采用飞行时间质谱技术结合16SrDNA测序对疑似菌株进行鉴定;采用微量肉汤稀释法对分离菌株进行抗生素药敏实验;通过聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)技术检测单核细胞增生李斯特氏菌中7种毒力基因的存在状况。结果158份样品共有4份检出单核细胞增生李斯特氏菌,检出率为2.53%;共分离获得8株菌。其中,生鲜乳中检出率为3.36%,巴氏杀菌乳中未检出。在生鲜乳中,荷斯坦牛乳、水牛乳、牦牛乳检出率分别为2.13%、0.00%和20.00%;标准化牛场、奶牛合作社和个体户的检出率分别为2.50%、1.51%和15.38%;手工挤奶和机械挤奶检出率为11.76%和1.96%。药敏实验结果显示8株菌均对青霉素耐药,对四环素、复方新诺明、红霉素耐药率分别为87.50%、75.00%和50.00%;多重耐药率为75.00%;但所有菌株对氨苄西林均敏感。8株菌对7种毒力基因的携带程度从12.50%~75.00%不等。结论云南省牛乳尤其生鲜乳中存在一定程度的单核细胞增生李斯特氏菌污染,且该菌具有普遍耐药性并携带一定程度的毒力基因,对消费者的安全具有潜在风险,应加强卫生监督管理。     

2018年云南省臭豆腐微生物污染监测结果分析

目的 了解和分析云南省臭豆腐微生物污染状况及存在的风险隐患。方法 在云南省内从农贸市场、零售及餐饮等环节,采集生、熟臭豆腐样本384件,对大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、蜡样芽胞杆菌、沙门氏菌、变形杆菌等微生物指标进行监测分析。结果 样品微生物污染阳性检出率为49.74%(191/384),食源性致病菌阳性样品检出率为28.13%(108/384),其中沙门氏菌不合格率0.52%(2/384)、金黄色葡萄球菌不合格率0.26%(1/384)、蜡样芽胞杆菌检不合格率1.30%(5/384)、变形杆菌检出率21.88%(84/384)。生、熟臭豆腐微生物污染阳性检出率存在显著差异(P<0.05)。结论 云南省臭豆腐存在较高的微生物污染,相关部门应加强监管,加快制订相应食品安全标准,以预防和控制食源性疾病的发生。     

2016~2018年云南省肉类制品致病菌污染状况调查分析

目的 了解云南省2016~2018年肉类制品中4种致病菌包括单核细胞增生李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌以及弯曲菌的污染情况。方法 2016~2018年, 在云南省16个地州市采集生肉、熟肉以及动物血液及制品3类肉类制品共2142件, 按照GB/T 4789-2010、GB/T 4789-2016《食品卫生微生物学检验》方法及检测技术要求进行致病菌的监测。结果 2016~2018年, 在4981份样品中共检出阳性致病菌378株, 总检出率为7.59%, 其中单核细胞增生李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌和弯曲菌3年的平均检出率依次为4.45%、8.30%、9.06%、8.97%; 散装样品致病菌平均检出率7.77% (369/4749)高于预包装(3.91%; 9/230); 生肉制品致病平均检出率(5.32%、13.6%、13.00%、9.65%)明显高于熟肉制品(3.88%、2.72%、2.14%、1.94%)。结论 2016~2018年云南省肉类制品中沙门氏菌污染最严重, 而单核细胞增生李斯特氏菌检出率最低。为减少食源性疾病的发生率, 应加强肉类制品在包装、贮存、运输和烹饪过程中的监督管理, 保障国民的食品安全和健康。     

昆明市售花生酱和芝麻酱的菌相初步分析

目的 了解昆明市售花生、芝麻酱的菌相组成情况及其微生物污染风险。方法 将16份昆明市售花生、芝麻酱进行增菌培养后, 取增菌液进行DNA的提取, 然后进行基于16S rRNA的宏基因组测序和分析。结果 细菌主要来自于厚壁菌门和变形菌门, 共检测出了40个细菌的属, 其中包含多个含有致病菌的属。农贸市场采集样品中检测到的细菌属种类显著高于超市采集的样品。结论 昆明市售花生、芝麻酱存在一定的微生物污染风险, 农贸市场所售该类产品较超市产品存在较大污染风险, 应引起重视。     

2010~2016年云南省肉类制品致病菌污染状况调查

目的 了解云南省2010~2016年肉类制品中单核细胞增生李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌的污染状况, 为预防和控制食源性疾病提供基础数据和科学依据。方法 2010~2016年, 在云南省采集3022件肉类制品样品, 对单核细胞增生李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌和沙门氏菌污染状况进行监测。结果 3022件肉类制品中共检出阳性致病菌312株, 总检出率为10.32%, 金黄色葡萄球菌、单核细胞增生李斯特氏菌、沙门氏菌的检出率依次为4.96%、3.97%、1.39%; 散装样品致病菌检出率(11.60%)高于预包装样品致病菌检出率(7.06%); 餐饮环节致病菌检出率(11.85%)与流通环节致病菌检出率(10.08%)无显著性差别。结论 2010~2016年云南省肉类制品中李斯特氏菌、金黄色葡萄球菌污染较沙门氏菌严重, 应加强肉类制品在贮存、运输过程中的监督管理。     

2010~2016年云南省熟肉制品和餐饮食品中单增李斯特菌污染情况调查分析

目的 了解2010～2016年云南省市售熟肉制品和餐饮食品中单增李斯特菌污染情况调查分析。方法 在全省16个州市县中选取超市、农贸市场、零售及餐饮环节等为采样点, 随机采取熟肉制品1465份和餐饮食品3674份, 按照GB 4789.30-2010《食品安全国家标准 食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验》及《全国食源性致病菌监测工作手册》进行检测和鉴定。结果 1465份熟肉制品中单增李斯特菌检出率为2.18%(32/1465), 3674份餐饮食品中单增李斯特菌阳性率为1.44%(53/3674)。在不同流通环节中, 熟肉制品和餐饮制品中检出率最高的分别为便利店和超市, 分别为9.09%(5/55)和1.67%(3/180)。在不同的监测地区, 熟肉制品和餐饮制品检出率最高均为昭通地区, 分别为7.8%(11/141)和7.17%(18/251)。结论 单增李斯特菌在熟肉制品及餐饮食品中均有检出, 说明云南省的食品中存在一定的单增李斯特菌污染, 对消费者的安全有潜在风险, 相关监管部门应持续加强监管, 预防食源性疾病的发生。     

2016~2018年云南省食品中金黄色葡萄球菌污染状况研究

目的 了解2016~2018年云南省食品中金黄色葡萄球菌的污染状况。方法 根据GB4789.10对2016年~2018年采集的样品进行金黄色葡萄球菌检验, 对结果进行统计学分析。结果 2016~2018年共检测样品5272件, 阳性样品检出137件, 总检出率为2.60%。经统计学分析, 金黄色葡萄球菌检出率在不同季度无显著性差异(P=0.087), 在年份、地区、食品类别、包装类别、采样地点均存在显著性差异(P≤0.001)。其中肉与肉制品和餐饮食品检出率最高, 散装食品检出率明显高于预包装食品, 餐饮环节和流通环节检出率高于其他环节。结论 2016~2018年云南省食品中肉及肉制品、餐饮食品的金黄色葡萄球菌污染较其他食品严重, 预包装能够降低食品在餐饮、流通中被污染的概率。     

基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱法溯源分析云南省肉制品中金黄色葡萄球菌

目的 利用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry, MALDI-TOF MS)技术对云南省肉制品中金黄色葡萄球菌进行溯源。方法 通过MALDI-TOF MS, 主成分分析及聚类分析等方法, 对来源于云南省肉制品的88株金黄色葡萄球菌, 包括耐苯唑西林或敏感金黄色葡萄球菌株(MRSA/MSSA)的进行溯源研究。结果 86株金黄色葡萄球菌可鉴定到种的水平, 2株可鉴定到属的水平。用MALDI-TOF MS鉴定金黄色葡萄球菌与生化和血清学方法的分型高度相关, 聚类分析表明, 88株菌株在距离水平为500的情况下被划分为4个类型, 其中5型同数据库中来自欧美的9株标准菌株亲缘关系最近。88株金黄色葡萄球菌中来源相同地区的菌株MALDI-TOF MS肽指纹图谱相似性较好, 相同类别来源或地区来源的金黄色葡萄球菌菌体蛋白表达更为相似, MRSA和MSSA菌株MALDI-TOF MS肽指纹图谱未观察到显著差异。结论 MALDI-TOF MS是一种快速、高敏感、高通量、高精度的金黄色葡萄球菌鉴定技术, 具有良好的可追溯性。