过敏原小麦醇溶蛋白的ELISA定量检测方法的建立

建立了检测小麦过敏原醇溶蛋白的定量ELISA抗体夹心法,以2μg/mL的鼠抗醇溶蛋白单抗包被酶标板,HRP标记兔抗醇溶蛋白抗体作为酶标抗体,工作浓度为1∶8000,将醇溶蛋白精确配制成一定浓度的标准品,检测醇溶蛋白的含量。最佳的线性范围是19.53~5000ng/mL,R2≥0.99,定量检测限为19.53ng/mL,对应的食品样品检测限为7.81ppm。样品的回收率在93.57%~105.72%之间,实验内CV为3.07%~5.91%,实验间CV为0.26%~5.24%,仅对大麦有一定的交叉反应,可在4℃放置两周。本法准确度和精密度高,重复性和稳定性好,特异性较强,适用于食品过敏原小麦醇溶蛋白的检测。      

护肤生物制品辅料中重组人表皮细胞生长因子抑制剂的筛选

目的筛选护肤生物制品辅料中重组人表皮细胞生长因子(recombinant human epidermal growth factor,rhEGF)抑制剂。方法以BALB/3T3细胞构建模型,采用MTT法对配制好的rhEGF及单组分辅料样品进行生物活性检测,筛选出对rhEGF活性有影响的辅料。通过建立的动物模型,观察rhEGF对皮肤切割伤的促愈合作用,进一步验证筛选出的辅料对rhEGF生物活性的影响。结果经细胞模型筛选的25种辅料中,大分子透明质酸钠和黄原胶显著抑制rh EGF活性。动物模型进一步验证rhEGF具有促兔表皮切割伤愈合的作用,平均愈合时间较生理盐水组提前1～3 d,并呈现良好的剂量效应,随剂量升高,促愈合作用进一步增强,剂量为100μg/m L时,促创面愈合效果最佳。0. 4%黄原胶组和10μg/mL rhEGF+0. 4%黄原胶联合给药组兔创面愈合时间均较生理盐水组晚1 d,黄原胶抑制rhEGF促皮肤切割伤愈合的作用,与细胞模型结果一致。0. 4%透明质酸钠组和10μg/m L rhEGF+0. 4%透明质酸钠联合给药组的兔创面愈合时间均较生理盐水组提前2 d,并且与10μg/mL rhEGF组愈合时间相同,与细胞模型结果不一致。结论黄原胶在细胞和动物模型中均可抑制rhEGF活性,为rhEGF在护肤生物制品中的应用配方提供了理论依据。