太平洋牡蛎过敏原精氨酸激酶的分子克隆、表达纯化和免疫原性鉴定

克隆太平洋牡蛎精氨酸激酶(CG-AK)基因,导入大肠杆菌(BL21(DE3))中,然后筛选重组菌株.通过SDS-PAGE对重组菌株中太平洋牡蛎精氨酸激酶(CG-AK)的诱导表达条件进行探究,经Ni2+亲和层析柱纯化,通过SDS-PAGE、质谱(MALDI-TOF-MS)、圆二色(CD)光谱等方法从相对分子量、一级结构以...     

玉米低聚肽和小麦低聚肽及其金属螯合物的抗氧化和抗过敏活性

以分析玉米低聚肽和小麦低聚肽理化性质为基础,对2种低聚肽及玉米低聚肽-Ca螯合物与小麦低聚肽-Fe螯合物2种金属螯合物的抗氧化能力和抗过敏活性进行研究。利用DPPH自由基清除能力、羟自由基清除能力及还原能力测试3种方法评价样品的抗氧化能力,并选择透明质酸酶抑制法评价样品的抗过敏活性。抗氧化能力分析表明,4种样品均有较强的抗氧化能力,且在羟自由基清除能力测试中,2种金属螯合物的羟自由基清除率明显高于对应的低聚肽。抗过敏活性分析表明,在质量浓度<20 mg/mL时,低聚肽金属螯合物的透明质酸酶抑制率远高于对应的低聚肽。这与羟自由基测试的结果类似,可见该条件下样品的抗氧化能力和抗过敏活性存在一定的正相关联系。而质量浓度为20～100 mg/mL时低聚肽的抑制率随浓度明显增大,螯合物的抑制率增长则趋于平缓。螯合物在质量浓度<20 mg/mL条件下同时具有较强的抗氧化能力和抗过敏活性,可在食品药品方向进一步应用发展。     

探讨合作学习在小学语文教学中的应用

随着教学改革的发展,语文老师在小学语文教学模式中对教学方法进行创新,从而适应现代教育发展的教学要求。语文老师通过落实因材施教的教学方针,不仅要培养学生的个人素养,也要促进学生的综合发展。本文主要阐述了合作学习在小学语文教学中的重要意义,并且提出了合作学习在小学语文教学中的应用策略。     

小麦低聚肽的结构特征及其体外抗氧化活性

通过扫描电镜、基础理化成分、相对分子质量分布、氨基酸组成、紫外光谱和圆二色光谱对小麦低聚肽结构特征进行分析,从羟基自由基清除能力、DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和氧自由基吸收能力（ORAC）4个方面对其体外抗氧化活性进行考察。结果表明,小麦低聚肽具有明显的球体颗粒状,表面有不规则褶皱和气孔,蛋白质和肽含量分别为95.86%、83.74%（均以干基计）,分子质量1000 u以下的组分占92.22%,必需氨基酸和疏水性氨基酸含量分别为20.46%、33.38%,在270 nm波长处有最大吸收峰。二级结构以多种构象并存,α-螺旋、平行式β-折叠、反平行式β-折叠、β-转角和无规卷曲含量分别为5.83%、3.14%、37.57%、20.32%和33.14%。小麦低聚肽对羟基自由基和DPPH自由基的半抑制浓度（IC50值）分别为9.62、1.54 mg/mL,ABTS自由基清除能力为3.53 mmol Trolox/g,ORAC值为1035.52 μmol Trolox/g。因此,小麦低聚肽具有较强的抗氧化能力,为其在抗氧化功能食品的开发利用提供一定的理论依据。     

牡蛎精氨酸激酶过敏原小鼠过敏模型的建立与分析

食物引起的过敏反应发病率正在增加,这对人们的健康构成了极大的威胁.为了评价牡蛎精氨酸激酶(arginine kinase,AK)过敏原的致敏性,利用AK口服灌胃和腹腔注射2种方式使BALB/c小鼠致敏.观察所有BALB/c小鼠的过敏反应、体重及血项指标情况,利用酶联免疫吸附法检测免疫球蛋白E(immunoglobuli...     

模拟消化对乳清肽结构和抗氧化活性的影响

为开发乳清肽在抗氧化食品方面的应用,该研究通过酶解乳清蛋白获得乳清肽,以分子质量分布、紫外全波长扫描及圆二色光谱表征乳清肽在经模拟胃肠液消化后结构方面的变化;对比模拟胃肠液消化前后乳清肽的DPPH自由基清除率、ABTS＋自由基清除率、铁离子还原能力（ferric ion reducing antioxidant power,FRAP）及氧自由基吸收能力（oxygen radical absorbance capacity,ORAC）。结果表明,乳清肽主要由分子质量为150 Da～1 000 Da的小肽组成,所占比例均高于80%;紫外全波长扫描显示模拟胃肠液消化以后乳清肽的氨基酸芳香杂环电子跃迁发生变化;圆二色光谱结果表明乳清肽对胃蛋白酶和胰蛋白酶的消化均具有一定的稳定性。此外4个抗氧化指标中除了DPPH自由基清除率外,其余3个指标在模拟胃肠液消化后抗氧化活性均有所提高,ORAC值在经模拟胰液消化后提升最明显（p＜0.05）。     

牡蛎蛋白饮料中潜在过敏原蛋白的原核表达及线性表位鉴定

目的:牡蛎存在致敏性是影响其作为饮料原料发展的主要原因,牡蛎中的肌浆钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium-binding protein,SCP)在细胞和肌肉功能中起着至关重要的作用,已被确定为牡蛎中的过敏原。为研究该类过敏原的具体致敏性原理,对其线性表位进行鉴定。方法:以太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)的SCP氨基酸序列为基础,制备并鉴定了分子量为21 kDa的重组SCP(rSCP),并作为后续实验材料,建立了动物致敏模型进行实验。结果:rSCP与大鼠血清具有较强的IgE结合活性,过敏反应能引起大鼠脏器发生病变。最重要的是,五个表位肽首次通过间接竞争酶联免疫吸附实验(indirect competitive enzyme-linked immunosorbent assay,icELISA)鉴定为线性免疫显性表位。结论:线性表位研究对于理解人类对牡蛎的超敏反应具有重要意义,可为判断牡蛎蛋白饮料的致敏性奠定理论基础,并有助于提供有效的预防措施和治疗方案,促进该类饮料产品的发展。