胶体金粒径对氯霉素胶体金试纸条性能的影响

采用柠檬酸三钠法分别制备出粒径为20、30、40nm的3种胶体金溶液,并标记抗氯霉素(CAP)单克隆抗体,另分别制备出竞争法氯霉素胶体金试纸条,并且对各种粒径胶体金制备试纸条的工艺进行优化,比较各种试纸条的性能。结果发现,利用30nm的胶体金制得的试纸条检测限(消线)为3ng/mL,检测快速、稳定,而20、40nm的胶体金制得的试纸条检测限(消线)分别为7、9ng/mL,稳定性较差。30nm的胶体金制备的胶体金试纸条在稳定性、灵敏度方面都明显优于20nm和40nm。     

重金属铅抗原的制备方法比较

采用双功能螯合剂[(R)-2-氨基-3-(4-氨基苯基)丙基]-(S-S)环己烷-1,2二乙三胺五乙酸(P-Nh2-Bn-Chx-A"-Dtpa)制备重金属铅全抗原,分别用戊二醛法、重氮化法、将螯合剂与牛血清蛋白(BSA)连接,再将合成的蛋白螯合剂复合物与铅离子螯合得到两种铅全抗原BSA-P-Nh2-Bn-Chx-A"-Dtpa-Pb,蛋白与铅的偶联比分别为1:15.64与1:42.95。针对戊二醛法偶联率偏低的问题,研究进行了戊二醛法制备抗原方法的优化,将戊二醛法制备的蛋白螯合剂复合物与铅离子进行两步螯合得到两步螯合法的戊二醛法抗原BSA-P-Nh2-Bn-Chx-A"-Dtpa-Pb,其偶联率提高到1:20以上。将以上三种抗原用于小鼠免疫实验并检验其免疫效果,结果表明两步螯合法的戊二醛法抗原BSA-P-Nh2-Bn-Chx-A"-Dtpa-Pb,免疫原性最好,免疫小鼠效价可达1:102400以上。