低产高级醇啤酒酵母在啤酒中试中的应用发酵分析

对选育到的低产高级醇啤酒酵母MS-11进行应用发酵研究分析。结果表明,对比出发菌株SC-2和工业生产菌株DAB,MS-11菌株在保持原啤酒风味的基础上,不仅提高发酵速度,缩短发酵时间5d,降低能耗近10％,增加设备周转率20％左右,降低生产成本;而且生产的成品啤酒防老化效果好。     

过表达EHT1基因对酿酒酵母己酸乙酯生产能力的影响

为了提高酿酒酵母己酸乙酯的产量,缩短浓香型白酒的发酵周期,降低生产粮耗。对酿酒酵母醇己酰基转移酶(ethanol hexanoyl transferase I)基因EHT1进行了过表达,研究其对酿酒酵母己酸乙酯生产性能的影响。以大肠杆菌-酿酒酵母穿梭质粒YEp352为载体,磷酸甘油酸激酶基因PGK1启动子为上游调控元件,KanMX抗性基因为筛选标记构建了酵母菌表达质粒Yep-PEK,经醋酸锂转化和G418抗性筛选鉴定获得过表达EHT1基因的突变株AY-PEK。经玉米原料液态白酒发酵后,实验结果显示突变株的生长速度、发酵速度、酒精度等基本发酵性能没有明显变化,但己酸乙酯的产量提高为原菌种的2.21倍,辛酸乙酯和癸酸乙酯也分别提高了31.4%和49.1%。当加入等量的己酸模仿实际发酵过程中己酸菌提供己酸时,己酸乙酯的量提高为原菌种的近3倍,总酯也相应的提高了32.2%。EHT1基因的过表达对提高酿酒酵母产酯性能,特别是产己酸乙酯有显著作用。     

高产SO2啤酒酵母菌株发酵性能的研究

主要对高产二氧化硫啤酒酵母突变株M8的发酵性能和遗传稳定性进行了研究.啤酒发酵实验结果表明,突变株M8发酵性能较好.突变株M8第20代菌株发酵的啤酒的二氧化硫生成量比原株S-5提高了20.72%,硫化氢生成量降低了49.3%,遗传稳定性良好.     

糠醛渣纤维素酶水解条件研究

以糠醛渣为原料进行纤维素酶水解研究,考察了水洗预处理、酶用量、转速、添加表面活性剂(tween80)及微波辐照对酶水解效率的影响.结果表明,水洗糠醛渣的酶解效率得到提高.优化后的三角瓶摇床酶解条件是:酶用量11FPU/g(酶活/底物)、间歇振荡转速140 r/min、添加tween80浓度1%(v/v),在此条件下水解48 h后,糠醛渣纤维素转化率达到61.6%,还原糖浓度达到53.7g/L.此外,对底物进行微波辐照(30min,210 W)后,水洗糠醛渣的酶解效率提高13%.     

前体氨基酸对热带假丝酵母产谷胱甘肽的影响

以能利用木糖发酵产谷胱甘肽(GSH)的热带假丝酵母突变株CV26为实验菌株,分别研究了添加L-半胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸3种前体氨基酸对CV26产GSH的影响。在单因素实验基础上,对3种前体氨基酸的添加进行了正交实验,结果表明:在GSH发酵的12h添加6mmol/L的甘氨酸和2mmol/L的谷氨酸,24h添加3mmol/L的L-半胱氨酸,GSH的产量和胞内含量都有较大的提高,分别达到149.28mg/L和20.43mg/g,比对照组分别提高了51.5%和57.8%。     

新型木糖发酵酵母Spathaspora passalidarum NRRL Y-27907与传统木糖发酵酵母Pichia stipitis NRRL Y-7124乙醇发酵性能比较

木糖乙醇转化率低是木质纤维素乙醇工业化生产尚未突破的技术瓶颈,选育高效发酵木糖产乙醇菌株一直是木质纤维素乙醇领域的研究热点。Spathaspora passalidarum是新近从自然界筛选到的一种新型发酵木糖产乙醇酵母,Pichia stipitis是已知木糖乙醇转化效率相对较高的酵母菌。从胁迫耐受性(乙醇、温度、渗透压),糖发酵能力(葡萄糖、木糖、葡萄糖和木糖混合糖),高温发酵能力方面对S.passalidarum NRRLY-27907和P.stipitis NRRLY-7124进行了比较。结果表明,NRRL Y-27907对高浓度乙醇、高温、高渗条件的耐受性比NRRL Y-7124更强。NRRL Y-27907葡萄糖发酵能力略低于NRRL Y-7124,但木糖发酵能力优于NRRL Y-7124。更为突出的是,NRRL Y-27907的葡萄糖阻遏效应较弱,葡萄糖和木糖混糖发酵能力明显优于NRRL Y-7124。在30~39℃下,NRRL Y-27907的木糖乙醇发酵能力皆优于NRRL Y-7124,具有更好的高温发酵潜力。因此,Spathaspora passalidarum在木质纤维素-生物乙醇转化方面具有很好的应用潜力。     

啤酒生产中高级醇的形成与低产高级醇酵母菌种的选育

高级醇是啤酒中主要的风味物质,但含量过高会对啤酒质量产生不利影响。选育低产高级醇的啤酒酵母菌种,可从源头上有效控制啤酒酿造过程中高级醇的过量生成。本文对啤酒生产中高级醇的生成机制,及依据此机制开展的啤酒酵母选育工作做一综述。随着生物技术的不断发展,高级醇生成的精确机制将会得到清晰阐释,据此对啤酒酵母高级醇代谢进行精细调控以提高啤酒风味质量,将成为啤酒酵母菌种选育工作的重要方向。     

一种新型产乙酸乙酯酿酒酵母菌株的构建

为了使酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）在发酵过程中保持出酒率的同时高产乙酸乙酯,强化白酒的风味特征,利用胞内同源重组原理,通过醋酸锂化学转化法分别在亲本菌株AY12-α中过表达来自猕猴桃和草莓的醇酰基转移酶基因AeAT9、VAAT,并对成功构建的重组酿酒酵母α-AeAT9和α-VAAT进行模拟白酒液态发酵,研究其与亲本菌株发酵性能的差异。结果表明,与亲本菌株相比,重组酿酒酵母α-AeAT9和α-VAAT的生长性能及CO2总质量损失、还原糖含量、酒精度等基本发酵性能无显著差异（P＞0.05）,而乙酸产量显著降低（P＜0.05）;乙酸乙酯产量分别达（792.26±10.04） mg/L、（204.19±5.83） mg/L,分别为亲本菌株的55.40倍、14.28倍;主要高级醇总含量分别为（152.77±2.14） mg/L、（190.04±2.63） mg/L,较亲本菌株分别降低37.10%和21.75%。     

TTC在发酵木糖高产乙醇的休哈塔假丝酵母选育中的应用

TTC可以作为筛选发酵葡萄糖产酒精能力强的酵母茵的显色剂,但发酵木糖产乙醇的酵母茵的代谢和发酵途径与之相比都有所不同,本实验用TTC作为初筛显色剂筛选发酵木糖产酒精能力较强的休哈塔假丝酵母.紫外诱变后从TTC平板上挑取显红色菌株150株进行摇瓶发酵测定乙醇产量,得到的正突变率为29%,负突变率为10%;挑取显白色菌株100株,得到的正突变率为0,负突变率为56%.将紫外诱变后产量已经有所提高的突变株S28进行氮离子注入诱变,从TTC平板上挑取显红色菌株100株进行摇瓶发酵测定乙醇产量,得到的正突变率为20.05%,负突变率为10.14%,其中的部分突变株的产量相比S28又有所提高.可见TTC能将乙醇产量较低的菌株淘汰,筛选出乙醇产量高的休哈塔假丝酵母菌.     

ARTP诱变以及基因组重排筛选具有耐高温性能的酿酒酵母

在工业生产中,酿酒酵母进行高温发酵具有发酵速度快、发酵周期短、发酵原料黏度低、生产成本少并且更适用于同步糖化发酵工艺等优点,因此,选育耐高温的酿酒酵母菌株在工业应用方面具有重要意义。本研究以从工业菌种中分离出来的酿酒酵母AY12作为出发菌株,对其进行常压室温等离子体诱变,在37℃下进行初筛,得到150株单菌落长势较好的菌株。将其进行产孢、杂交以实现基因组重排,在37℃下进行复筛,得到137株生长性能良好的菌株。在35℃玉米水解液中发酵,进行二次复筛,从而获得具有良好发酵性能的14株菌株。最后,进行35℃同步糖化发酵,并测定每菌株的乙醇产量和残糖含量。,最终筛选出7株具有良好耐高温发酵性能的菌株,其中发酵性能最好的菌株为L-38,其同步糖化发酵完成后,乙醇产量为16.20%(V/V),较出发菌株AY12提升了8.00%,残糖含量为35.50 g/L,较AY12降低了32.38%。