蛋氨酸特异性合成途径关键酶——高丝氨酸O-酰基转移酶的研究进展

在蛋氨酸生物合成过程中,蛋氨酸特异性合成反应的第一步是高丝氨酸酰基化,由高丝氨酸O-酰基转移酶催化,生成酰基高丝氨酸。高丝氨酸O-酰基转移酶受到末端产物蛋氨酸和S-腺苷蛋氨酸的反馈抑制和反馈阻遏,且高温下极易失活,严重影响碳流流向蛋氨酸,是蛋氨酸生物合成的关键酶,因此对高丝氨酸O-酰基转移酶的研究和改造具有重要意义。但目前关于高丝氨酸O-酰基转移酶的改造和研究较少,在微生物代谢途径中,碳流不能过多流入蛋氨酸合成途径,制约了微生物过量积累蛋氨酸,阻碍了发酵法生产蛋氨酸的工业进程。本文简述了高丝氨酸O-酰基转移酶在蛋氨酸生物合成途径中的作用,在介绍该酶的结构、催化机制和研究现状的基础上,提出该酶在反馈抑制和提高稳定性方面的分子改造策略。     

不同蛋白酶制备藜麦麸皮多肽及其活性研究

以藜麦麸皮为原料,利用高浓度乙醇粗提藜麦麸皮蛋白,并用4种蛋白酶(碱性、中性、复合、风味蛋白酶)酶解蛋白得到多肽.测定醇沉蛋白的分子质量分布、氨基酸组成以及4种蛋白酶的酶解能力和所得多肽的活性.结果表明,藜麦麸皮蛋白分子质量主要条带分布在22.8 k、39.1 k和52.7 kDa,其含有17种氨基酸,必需氨基酸/总氨...     

蓝莓不可萃取多酚的酸法提取工艺优化

研究了蓝莓中不可萃取多酚的提取工艺. 以新鲜蓝莓为实验材料,去除其中的可萃取多酚,制成不含可萃取多酚的原材料,采用酸水解的方法分离不可萃取多酚. 在单因素实验基础上,选择温度、时间、料液比等3个影响因素进行响应面设计. 采用Box-Behnken中心组合实验设计和响应面分析法,建立以蓝莓不可萃取多酚萃取率为响应值的二次回归方程. 结果表明温度、时间、料液比对多酚萃取率的影响显著,最佳萃取条件为温度74℃,时间225h,物料质量浓度1∶21g/mL,在此条件下不可萃取多酚在蓝莓粉中的萃取率为27.25mg/g.     

蓝莓多酚对巨噬细胞中iNOS、COX-2基因表达的影响

RAW264.7巨噬细胞被脂多糖预刺激后,添加从蓝莓中分离制备的不同质量浓度的可萃取多酚（extractablepolyphenols,EPP）和不可萃取多酚（non-extractable polyphenols,NEPP）,培养不同的时间,研究不同质量浓度及培养时间对诱导型一氧化氮合酶（inducible nitric oxide synthase,iNOS）、环氧合酶（cyclooxygenase-2,COX-2）基因相对表达量的影响。结果表明：从蓝莓中分离的EPP和NEPP均能抑制iNOS、COX-2基因表达,在12 h培养时间内,2 种多酚的抑制效果较好,且EPP的抑制效果明显好于NEPP。这证明蓝莓中的NEPP同EPP一样,可通过抑制iNOS、COX-2 mRNA的表达表现出明显的抗炎活性。     

红豆肽的制备、分离纯化及降糖活性研究

目的：筛选红豆蛋白的酶解工艺并研究红豆多肽的降糖活性及构效关系。方法：采用碱沉酸提法提取红豆粗蛋白,以肽得率、水解度、α-葡萄糖苷酶抑制、Fe2+螯合率、DPPH清除率为指标筛选最佳蛋白酶;酶解得到红豆多肽,醇沉多糖后通过DA201-C大孔吸附树脂进行脱盐纯化后,测定多肽的分子量及氨基酸组成来探讨其构效关系。结果：经4种蛋白酶（中性、碱性、风味、复合蛋白酶）水解后,碱性蛋白酶的肽得率为82.95%,水解度为52.67%,实验浓度范围内最佳α-葡萄糖苷酶抑制为72.14%,比其他3种酶均高;85%乙醇醇沉后的肽糖比、α-葡萄糖苷酶抑制率（73.49%）和α-淀粉酶抑制率（31.31%）均最高,脱盐纯化后肽含量高达97.61%,在2 mg/mL时测定对α-葡萄糖苷酶和α-淀粉酶抑制效果,分别为52.49%和14.63%,表明除去多糖后红豆多肽仍具有独立降血糖活性;经测定,红豆多肽以小分子为主,3 kDa以下占比91.40%,其中小于1 000 Da占比达到75.28%。纯化后疏水性氨基酸占比约37.28%,其中甘氨酸、丙氨酸、脯氨酸和谷氨酸含量较高。结论：碱性蛋白酶是制备红豆多肽的最佳蛋白...     

人参肽的分离纯化及活性分析

以粗人参肽为原料,80%乙醇为洗脱溶液,用DA201-C大孔树脂进行纯化,测定纯化前后多肽的抗氧化活性(DPPH·清除能力、羟自由基清除能力、还原力)、酪氨酸酶抑制能力、α-葡萄糖苷酶抑制能力等生物活性及分子量分布、氨基酸组成、滋味等指标。在活性方面,粗人参肽具有一定的抗氧化活性,酪氨酸酶抑制活性,α-葡萄糖苷酶抑制活性,纯化后抗氧化活性提高不明显,酪氨酸酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性均有较大提高,尤其是α-葡萄糖苷酶抑制活性提高较显著,在10mg/mL时是纯化前的13.29倍。在分子量方面,粗人参肽中1500Da以上的占比25.37%,纯化后分子量减小,1000Da以下占比85%以上;在氨基酸组成方面,纯化前后人参肽中甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸和谷氨酸含量均较高,分别为73.2%和75.4%;纯化后疏水性氨基酸显著增加,增幅为12.15%。在滋味方面,纯化后苦味较突出,苦味值为8.00。实验结果表明,人参肽的抗氧化活性可能与甘氨酸、脯氨酸、丙氨酸和谷氨酸含量较高有关;酪氨酸酶抑制活性和α-葡萄糖苷酶抑制活性可能与丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、脯氨酸等疏水性氨基酸含量增加且纯化后分子量变小...     

蓝莓多酚对小鼠巨噬细胞中NO、iNOS及COX-2分泌量的影响

RAW264.7细胞用LPS预刺激后,添加从蓝莓中分离、制备的可萃取多酚(EPP)和不可萃取多酚(NEPP),测定EPP和NEPP对细胞NO、iNOS、COX-2分泌量的影响。结果表明:蓝莓EPP和NEPP能抑制RAW264.7细胞中NO、iNOS及COX-2的分泌量,且随着添加浓度的增加,抑制效果明显。在相同浓度下,NEPP的抑制效果优于EPP,并且好于同浓度下的阳性对照组(TP)。这表明从蓝莓中分离、制备的NEPP同EPP一样可通过抑制NO、iNOS及COX-2的分泌表现出明显的抗炎作用。     

蓝莓多酚的提取及功效的研究进展

多酚具有多重功效,逐渐引起了人们的重视。按照多酚的结合方式可分为可萃取多酚（EPP）和不可萃取多酚（NEPP）,本文从提取、功效两个方面综述了国内外对蓝莓中EPP和NEPP的研究概况。     

蓝莓不可萃取多酚的纯化及组分分析

对蓝莓果实中不可萃取多酚进行了提取、分离和纯化,并利用高效液相色谱对其组成成分进行了分析。结果表明,7种大孔树脂中HPD-100C对蓝莓不可萃取多酚的吸附率和解吸率都相对较高;采用大孔树脂HPD-100C进行动态纯化,再利用高效液相色谱分析其组分,得出蓝莓不可萃取多酚中主要物质为飞燕草色素、矢车菊色素、牵牛花色素、芍药花色素、锦葵色素,与可萃取多酚相似,说明两者具有相似组分。