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为获得一株高产高纯度的果胶甲酯酶的黑曲霉工程菌,提高果胶甲酯酶的产量,从果胶酶生产菌种中克隆了果胶甲酯酶基因pmeA,通过同源重组的原理,冻融法转化农杆菌、农杆菌介导法转化黑曲霉方法,成功构建了分泌表达果胶甲酯酶的纯合重组菌株TH-2(glaA::pmeA)。基本发酵培养基中发酵第9 d上清中最高酶活达到467.77 U/mL。进一步敲除重组菌株TH-2(glaA::pmeA)中背景蛋白酸稳定的α-淀粉酶的编码基因asaA,获得纯合重组菌株TH-2(glaA::pmeA?pyrG?asaA)。该菌株在添加1%的硫酸铵的发酵培养基中培养7 d后,发酵液上清中主要的背景蛋白均消失。但是与纯合重组菌株TH-2(glaA::pmeA)相比,果胶甲酯酶表达量有所下降,最高酶活为255.40 U/mL。重组果胶甲酯酶的最适作用温度为50 ℃,适合的温度范围是40~80 ℃,在80 ℃下仍能维持其酶活性的70%以上,适合的pH范围是3.0~5.0,最适pH为4.0。最终获得了一株温度和pH作用范围较宽的高产高纯度果胶甲酯酶的黑曲霉工程菌。 相似文献
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安全性是儿童家具的首要属性之一,儿童家具的安全性研究已成为众多儿童家具生产企业和儿童家具设计师们关注的核心问题之一,笔者结合我国首部针对儿童家具的强制性国家标准《儿童家具通用技术条件》,建立了儿童家具安全性的多层次模糊综合评价模型,以期对儿童家具生命周期各环节的安全性问题进行系统评估,保证儿童在使用家具过程中的健康安全。 相似文献
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加快发展现代职业教育是教育改革的关键举措,是培养高素质技术技能人才的重要途径。职业教育作为独立的教育类型发展时间较短,职教高考存在制度体系不完善、招考模式不灵活、招录渠道不通畅等问题,严重影响职业教育的吸引力与适应性。从类型定位视角切入,理清楚谁来考、考什么、怎么考、怎么录等关键问题,建议建立具有权威性的国家统筹职教高考制度、具有职业性的文化素质+职业技能招考模式、具有选拔性的分类别分批次录取模式,为加快教育现代化和建设教育强国提供理论参考。 相似文献
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为了评估纯棉斜纹面料弯曲性能的测量不确定度,采用GB/T 18318.1-2009《纺织品 弯曲性能的测定 斜面法》分析了纯棉斜纹面料弯曲长度试验过程中影响测试结果的因素,对该方法的不确定度进行了评估.该试验结果表明,影响纯棉斜纹面料弯曲性能的因素分别有试样自身不匀的相对标准不确定度(经向为0.90%、纬向为1.03%... 相似文献
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