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目的原核表达猪源戊型肝炎病毒衣壳蛋白,并对其反应原性进行分析。方法通过PCR从已构建的猪源戊型肝炎病毒全基因克隆扩增ORF2编码382~674位氨基酸序列的基因片段,将扩增产物插入到pMD18-T载体中,亚克隆至原核表达载体pET28a(+),构建pET28a-293表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经Ni-NTA层析柱纯化后,进行SDS-PAGE、Western blot及ELISA鉴定。结果成功扩增到904bp的目的基因。重组载体pET28a-293经双酶切鉴定及序列测定,证实构建正确。SDS-PAGE分析表明表达产物的相对分子质量与预期相符,表达量可占菌体总蛋白的66.15%。Western blot分析表明目的蛋白具有较好的反应原性。ELISA试验证实目的蛋白能与阳性猪源和标准HEV血清发生反应。结论已成功构建了猪源戊型肝炎病毒衣壳蛋白的pET28a-293原核表达载体,并得到了有效表达,为进一步建立猪源戊型肝炎的诊断方法奠定基础。 相似文献
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分析影响网络安全的主要因素,并有针对性地从技术层面提出相应的对策,包括身份认证、控制访问、数据保密、数据完整性、加密机制、入侵检测技术、备份系统、防范ARP欺骗等。 相似文献
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目的观察猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)多克隆抗体用于防治PRRS的效果。方法用PRRSV灭活疫苗2次基础免疫,PRRSV(NVDC-JXA1株)强毒C05代加强免疫长白仔猪,制备PRRSV多克隆抗体。以不同剂量的多抗免疫仔猪后,通过仔猪存活率、血清ELISA抗体效价及血清、肺、脑组织PRRSV基因评价多克隆抗体对PRRSV感染的预防和治疗作用。结果仔猪按0.5ml/kg体重接种多抗进行预防,再经PRRSV(NVDC-JXA1)株强毒(3×105.5TCID50)攻击,具有一定的预防作用,存活率为5/7;经NVDC-JXA1株强毒(3×105.5TCID50)感染后,分别按0.8ml/kg和1.0ml/kg剂量,连续注射3次进行治疗,存活率分别为5/7和7/7,但在注射1.0ml/kg的猪中,仍有部分猪血清(4/7)和肺(2/7)PRRSV基因阳性。结论高剂量的多克隆抗体(ELISAS/P>3,0.5ml/kg以上)对仔猪抵抗PRRSV感染具有一定的预防和治疗作用,经多克隆抗体预防或治疗后无临床症状的猪仍可能带毒。 相似文献
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针对C原子的扩散过程,研究了Al-石墨在机械合金化过程中的结构变化.用X射线衍射仪(XRD)、扫描电子显微镜、拉曼光谱仪及计算机模拟观察,分析了不同球磨时间的Al-C混合物的结构.结果表明,球磨初期,石墨晶粒尺寸的减小及六角石墨转变为Turbostratic 结构,使石墨的X射线衍射峰迅速减弱,以至消失.随球磨时间的增加,C原子逐渐扩散到Al的点阵中形成固溶体. 将Al-C固溶体进行退火处理,便转变为Al4C3.即使在球磨产物的XRD图中观察不到石墨的衍射峰后,继续球磨数十小时,拉曼光谱表明球磨样品中仍有未与Al反应的单质石墨. 相似文献
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目的 观察HIV-1CN gp120基因与IL-2基因共表达核酸疫苗质粒pGPIL-2诱导产生CTL。方法 脂质体介导共表达中国流行株HIV-1Gag-gp120基因与IL-2基因的核酸疫苗质粒pGIL-2转染BHK-21细 胞,以间接免疫光法鉴定其表达。取pGPIL-2免疫鼠脾细胞,检测pGPIL-2诱导的细胞毒性T细胞杀伤活性。 结果pGPIL-2可有效地诱导CIL的产生,并可杀伤HIV-1CN嵌合基因转染的靶细胞。结论 为进一步设计中国流行株HIV-1核酸疫苗提供了重要实验依据。 相似文献
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参照国内外已发表的禽流感病毒(Avian Influenza Virus,AIV)的基因序列和AIV相关的RT-PCR检测方法,根据AIV高保守、高特异的M蛋白基因设计了一套通用型引物,通过对相关病毒、棉拭子检测,建立了AIV通用型RT-PCR检测方法。根据.AIV HA基因设计了H5、H7、H9亚型的联合RT-PCR引物,其上下游引物分别位于裂解位点两侧,在确定各亚型单项RT-PCR检测方法的反应条件和反应体系的基础上,建立、优化了三联RT-PCR检测方法的反应体系和反应条件,并通过相关病毒、质粒、棉拭子检测,建立了AIV三联RT-PCR检测方法。最终建立了AIV系列RT-PCR检测方法,该方法具有快速、敏感、特异等优点,为AIV检测、流行病学调查、致病性分析及疫苗使用等奠定了基础。 相似文献
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本文对国际电联地区的地面数字电视规划的历程、规划现状、规划原则、规划策略、规划方法等各方面进行了深入、细致、客观的研究,希望借此为我国的地面数字电视频率规划提供可供参考的理论依据。 相似文献
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本文对国际电联地区的地面数字电视规划的历程,规划现状,规划原则,规划策略,规划方法等各方面进行了深入,细致,客观的研究,希望借此为我国的地面数字电视频率规划提供可供参考的理论依据。 相似文献