两相体系中β-葡萄糖苷酶催化栀子苷水解制备京尼平

京尼平是一种天然生物交联剂,且具有多种生理活性。本文以β-葡萄糖苷酶催化栀子苷水解制备京尼平为目标体系,证明了京尼平对β-D-葡萄糖苷酶具有竞争性抑制作用;考察了β-D-葡萄糖苷酶在不同有机相-水体系中的稳定性,发现其在正辛醇-水、正己醇-水体系中的稳定性均较好;测定了栀子苷在正辛醇-水和正己醇-水体系中的分配系数kD,gardenoside分别为0.17和0.76,而京尼平的分配系数kD,genipin为42.57和37.75;分别在水、正辛醇-水和正己醇-水体系中进行栀子苷水解制备京尼平的反应,当底物浓度为0.25μmol·ml-1时京尼平收率分别为89.17%、93.96%、90.16%;进一步提高底物浓度为2.0μmol·ml-1时,正辛醇-水体系中京尼平收率高达91.9%,较水相体系(79.7%)提高了12.2%。本文的研究结果证明了采用正辛醇-水两相反应体系可部分解除产物抑制,提高产物收率,并简化后续的产物分离。     

铝—京尼平结合同步鞣染工艺及革的性能

在前期对有机酸蒙囿铝鞣液的性质以及铝-京尼平(genipin)结合鞣制皮粉的试验基础上,进行了Al-genipin结合鞣生产牛鞋面革的小试—用柠檬酸蒙囿的硫酸铝预鞣,再用genipin复鞣,同时将革染成蓝黑色。结果表明:当Al2(SO4)3·18H2O的用量为软化皮坯的40%(折合Al2O3为6%),genipin的用量为削匀白湿皮的6%时,结合鞣革的收缩温度(Ts)可达到92℃,DSC分析的onset温度为89℃;其柔韧性、手感、粒面平细度等综合物理机械性能以及加脂后革的耐水洗性能,都优于铝-戊二醛结合鞣、荆树皮栲胶-铝结合鞣的革。     

碱水解栀子苷大孔树脂分离纯化京尼平苷酸

目的:研究NaOH水解栀子苷,大孔树脂分离纯化京尼平苷酸的工艺。方法:用NaOH将栀子苷水解制备京尼平苷酸,并通过高效液相色谱法监测栀子苷的水解过程;比较7种大孔吸附树脂对京尼平苷酸的静态吸附和解析性能,筛选出一种吸附和解析性能较好的树脂,用动态柱层析法对京尼平苷酸进行分离纯化。结果:H103大孔树脂对京尼平苷酸的吸附和解析性能较好,动态吸附上样后用蒸馏水冲洗2 BV,再用30%乙醇洗脱2 BV,洗脱率达到95.2%,洗脱液真空干燥得到灰白色粉末,HPLC检测其纯度达96.1%。结论:采用碱水解栀子苷再用大孔树脂分离纯化京尼平苷酸,该工艺具有步骤少、收率高等优点,为京尼平苷酸的制备提供了一种新途径。     

京尼平交联制备枯草杆菌碱性蛋白酶聚集体

本研究利用新型交联剂京尼平制备了枯草杆菌碱性蛋白酶交联聚集体(BAP-CLEAs)。以酶活回收率为指标,确定了BAP-CLEAs制备的最佳条件为:交联剂质量浓度0.50%,交联温度35℃,交联时间12 h,此时BAP-CLEAs的酶活回收率为55.04%。采用扫描电镜及红外光谱对BAP-CLEAs进行表征,结果证明枯草杆菌碱性蛋白酶在京尼平的作用下成功交联。与游离酶相比,BAP-CLEAs的最适p H值向碱性方向偏移,由9.4变为10.3,在较宽的p H范围和温度范围内保持较高的酶活。另外,在2%浓度的酪蛋白底物中重复使用5次后,BAP-CLEAs还能保持86.42%的酶活性。以上催化特性的结果表明,枯草杆菌碱性蛋白酶在京尼平的作用下可成功交联形成酶聚集体,且该交联酶聚集体具有比游离酶更优越的p H稳定性、温度稳定性和重复使用稳定性,有良好的工业应用前景。     

京尼平与皮胶原的反应性研究

以从栀子属植物的果实中提取的环烯醚萜类化合物京尼平为代表,研究其与皮胶原的反应性。采用UV、TLC等方法并结合已有的文献资料,探讨了京尼平与皮胶原的反应机理。用DSC法分析了京尼平的鞣制效果,并对最佳鞣制条件(京尼平的用量、鞣制时间、鞣液温度及pH值等)进行了筛选。结果表明:用干皮粉质量5%的京尼平,在pH=7·5左右鞣制24h后,其DSC曲线的Tp可达到85℃,同时皮粉被染成深蓝色。因此我们认为,京尼平可以作为皮革工业的一种潜在的、可再生的、清洁高效的鞣剂和染料。     

丝素接枝含酪氨酸多肽对其酶促改性的影响

丝素中含约10%酪氨酸残基,但其可及度较低,影响了丝素蛋白的反应性。借助利用天然生物交联剂京尼平,将含酪氨酸多肽与丝素蛋白交联,提升酪氨酸酶催化丝素与外源氨基化合物接枝改性的效果;借助SDS-PAGE、FTIR和TG分析丝素分子量、结构与性能的变化,并评价酶催化ε-聚赖氨酸(ε-PL)在丝素表面接枝效率。研究表明,经京尼平处理后丝素蛋白的分子量增加,含酪氨酸多肽与丝素交联后,不仅使丝素膜材料热稳定性提升,也一定程度上增加了丝素蛋白膜材料机械性能,借助甲基橙比色法验证了接枝多肽能促进酪氨酸酶催化ε-PL在丝素表面接枝。基于京尼平法接枝含酪氨酸多肽为提高丝素的反应性提供了有效途径。     

RP-HPLC法同时测定车前子中4种主要成分的含量

目的:建立反相高效液相色谱法同时检测车前子中京尼平苷酸、车前素、麦角甾苷和异麦角甾苷4种主要成分的含量。方法:采用Dikma Diamonsil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇(A)-0.05‰甲酸水溶液(B),梯度洗脱(0～30min,5%～90%A),流速为1.0mL·min-1,检测波长为205nm,柱温25℃。结果:京尼平苷酸、车前素、麦角甾苷和异麦角甾苷之间的分离度良好;各成分质量与峰面积在测定范围内均呈良好的线性关系(r0.9998);平均加样回收率(n=6)分别为98.17%(RSD=3.55%)、104.36%(RSD=3.77%)、98.97%(RSD=4.35%)和97.63%(RSD=3.12%)。结论:该实验开发的方法可成功应用于车前子中4种主要成分的分析。     

京尼平显现汗潜手印的溶液配方

对当前国内外所使用的京尼平配方进行比较研究,并在此基础上对配方浓度进行优化。探索了一种经济实用、操作简单、效果显著的的京尼平显现手印的配方,借此提高手印的显出率和显现质量。建议将2.5 g京尼平溶于60 m L无水乙醇,充分搅拌后再依次加入90 m L乙酸乙酯和850 m L正己烷,配制成浓度为0.25%的京尼平溶液作为手印显现配方使用。     

高色价栀子蓝色素的制备及其稳定性研究

研究20种氨基酸与京尼平的呈色反应及部分反应产物的稳定性.分别将20种氨基酸与京尼平在80℃反应16 h,再用HPD100大孔树脂吸附栀子蓝色素,然后用80%乙醇水溶液洗脱色,洗脱液在50℃进行减压干燥,得到深蓝色粉末,测定其色价,然后研究固体状态的栀子蓝色素的光照稳定性和温度稳定性.20种氨基酸与京尼平反应后生成的栀...     

制备色谱法制备京尼平甙酸

本文建立了从两种药材中快速分离制备京尼平甙酸的高效液相色谱方法。药材水提物用硅胶柱层析法纯化后,进行快速制备液相色谱分离,根据制备色谱图收集流出液,采用HPLC—PDA和LC—MS法定性定量分析,得到高纯京尼平甙酸单体,方法简便、快速、成本低。