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1.
《Planning》2015,(4)
目的研究邻苯二甲酸二乙基己酯(DEHP)对小鼠初级精母细胞(GC-2 spd)氧化应激及凋亡的影响。方法体外传代培养永生化的GC-2 spd细胞,用二甲基亚砜(DMSO)溶解DEHP,以DMSO浓度为0.1%的细胞孔作为对照组,用DEHP终浓度为50、100和200μmol/L的细胞孔作为低、中、高剂量组染毒24 h。分光光度计法测定GC-2 spd细胞丙二醛(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)活力和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力,流式细胞仪检测不同剂量组细胞凋亡情况。结果与对照组比较,DEHP低、中、高剂量染毒组MDA含量依次升高,差异无明显统计学意义(P>0.05);SOD活力在DEHP高剂量染毒组下降,差异有统计学意义(P<0.05);DEHP低、中剂量染毒组GSH-Px活力明显下降,且差异有统计学意义(P<0.05)。DEHP中、高剂量染毒组细胞凋亡明显高于对照组,且差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DEHP可通过诱发小鼠生精细胞氧化应激而诱导细胞凋亡。 相似文献
2.
《Planning》2015,(3)
目的研究异甘草素(ISL)对人胶质瘤细胞SHG44增殖、自噬、凋亡及相关分子信号的影响。方法应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测ISL在不同时段、不同浓度下对人胶质瘤细胞SHG44的增殖抑制情况。用流式细胞术Annexin V-IP标记检测ISL(0,20,40,60,80μmol/L)作用于SHG44细胞48 h后细胞凋亡的情况,透射电镜下观测ISL对SHG44细胞内部超微结构的改变,应用免疫荧光染色法观测细胞内部及其周边自噬及凋亡相关蛋白的分布,Western blot检测ISL对SHG44细胞中Caspase-3,Bcl-2以及LC3B等蛋白表达的影响。结果在ISL作用下,SHG44细胞的增殖过程呈现时间及剂量依赖性抑制,ISL(80μmol/L)组在作用72 h后对SHG44细胞的抑制率超过了半数;流式细胞术检测ISL作用SHG44细胞48 h后,细胞凋亡率分别为(1.54±0.85)%,(6.72±2.81)%,(11.82±3.21)%,(16.61±3.79)%,(26.15±3.82)%;透射电镜下可见SHG44细胞内部出现自噬小泡及自噬溶酶体;在荧光显微镜下可见细胞内出现自噬及凋亡相关蛋白的免疫荧光颗粒;Western blot显示ISL作用于SHG44细胞48 h后,LC3-Ⅱ/Ⅰ比值以及Caspase-3的表达呈上升趋势,而Bcl-2表达呈下降趋势。结论 ISL能有效抑制人胶质瘤细胞SHG44的增殖,诱导SHG44细胞发生自噬和凋亡,并且抑制了抗凋亡分子Bcl-2的表达,增加了凋亡相关分子Caspase-3以及自噬相关分子LC3-Ⅱ/Ⅰ的比值。 相似文献
3.
188Re诱导肿瘤细胞凋亡的实验研究 总被引:3,自引:0,他引:3
采用MTT法,光镜,电镜,流式细胞仪和免疫组化方法研究了^188Re诱导三种肿瘤细胞凋亡的形态学变化,剂量时间效应关系以及凋亡相关基因Bcl-2和Bax在其中的表达情况。结果表明:^188Re对三种肿瘤细胞有明显的杀伤效应,能效导其产生凋亡的形态学变化,并且随着浓度的增大和时间的延长,凋亡率增加,Bcl-24表达减弱,Bax表达增强,二者比值下降;细胞阻滞于G2/M期,三种肿瘤细胞对^188Re的敏感性由高到低依次为PC-3细胞,ER-75-30细胞,A549细胞。 相似文献
4.
上海市吴淞工业区大气PM2.5水溶成分的元素分析及细胞毒性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
通过ICP-MS测定了上海市吴淞地区大气PM2.5水溶成分金属元素含量,通过四唑盐(MTT)测定细胞存活率,通过超氧化歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)两个指标测定细胞氧化损伤,琼脂糖凝胶电泳测定细胞内DNA损伤,流式细胞仪(Flow cytometry)检测细胞凋亡和周期等实验研究了大气PM2.5水溶成分的细胞毒性.实验结果表明:PM2.5可溶成分中Zn元素含量最高,PM2.5在一定浓度范围内能导致细胞死亡,引起细胞的氧化损伤,影响DNA的复制,阻碍细胞增殖,但没有诱导细胞凋亡.PM2.5中可溶金属离子对细胞毒性表现为联合作用. 相似文献
5.
6.
7.
目的观察流感疫苗诱导Hela细胞凋亡与免疫调节效应。方法将流感疫苗作用于Hela细胞,采用MTT比色法和流式细胞仪检测疫苗对Hela细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响;同时用MTT法检测疫苗对小鼠脾细胞增殖的影响;采用结晶紫、中性红染色及MTT法,分别检测脾细胞诱导上清中IFN-γ、IL-2和TNF-α的分泌情况。结果一定浓度流感疫苗能够抑制Hela细胞增殖,促进细胞凋亡,凋亡率可达58·37%;还可促进小鼠脾细胞增殖及Th1型细胞分泌IFN-γ。结论流感疫苗能够抑制Hela细胞增殖,此作用可能是通过诱导Hela细胞凋亡、调节免疫细胞增殖及IFN-γ的分泌而实现的。 相似文献
8.
研究利用携带IL-24的溶瘤腺病毒(ZD55-IL-24)联合化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)对肺癌细胞NCI-H460生长的体外抑制效应。利用RT-PCR和Western blot法分别检测了IL-24在转录和翻译水平分析,发现IL-24在经ZD55-IL-24感染的NCI-H460中能有效表达,而未感染ZD55-IL-24的NCI-H460则无表达;用结晶紫染色法定性分析了ZD55-IL-24联合5-FU对NCI-H460的生长抑制和杀伤作用,结果表明联合应用比单用时效果更显著;通过MTT法进行的定量分析也表明ZD55-IL-24与5-FU联合处理48 h后,NCI-H460的增殖抑制率显著高于单用ZD55-IL-24或5-FU(P0.05);最后,用Hoechst33258染色法观察了细胞凋亡,结果也显示联合应用ZD55-IL-24和5-FU组的细胞凋亡现象比单用的显著。本研究初步证实了ZD55-IL-24显著提高了NCI-H460对化疗药物的敏感性,联合疗法对肿瘤细胞的杀伤作用明显增强。 相似文献
9.
目的:研究新型小分子化合物Nutlins类似物在体外对舌癌TCA-8113细胞的凋亡作用.方法:采用MTT法检测新型小分子化合物Nutlins类似物对TCA-8113细胞增殖的影响;用流式细胞仪(FCM)检测Nutlins类似物诱导TCA-8113细胞凋亡情况和周期阻滞情况;用DAPI染色法观察细胞核变化.结果:Nutlins类似物NL-11和NL19以浓度依赖的方式抑制TCA-8113细胞增殖并诱导其凋亡,而且能引起TCA-8113细胞发生G2期周期阻滞.结论:NL-11和NL-19化合物能够有效地在体外抑制TCA-8113细胞增殖,并诱导细胞凋亡. 相似文献
10.
胡椒碱(Piperine)是一种从胡椒属植物中提取的生物碱,具有镇静、抗炎、抗肿瘤等多种药理活性.探讨胡椒碱对人胃癌SGC-7901细胞的增殖抑制和诱导凋亡的作用.采用MTT比色法测定其对SGC-7901细胞增殖抑制率;通过免疫荧光法、流式细胞术、Western blot法对其进行抗癌机制研究.MTT结果显示Piperine处理细胞72h的IC50值为37.41 μmol·L-1,且呈现时间剂量依赖性; Hoechst33258染色荧光显微镜观察发现Piperine能诱导SGC-7901细胞核形态学改变,部分细胞呈现典型的凋亡形态学特征;Annexin V-FITC/PI荧光双染结果亦证实Piperine可以诱导SGC-7901细胞发生凋亡;DAPI和DCFH-DA染色流式细胞术分析显示Piperine诱导SGC-7901细胞G2/M期阻滞、细胞活性氧产生增加; Western blot分析发现Bcl-2蛋白表达减少,Bax蛋白表达逐渐增加,呈现剂量依赖性,且Bax/Bcl-2比例增加.因此,Piperine具有抑制SGC-7901细胞增殖和诱导凋亡的抗肿瘤活性. 相似文献