抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20-47)的单链抗体在转基因烟草根分泌物中的初步表达

为探索利用植物根分泌表达重组蛋白的可行性，构建了含有抗乙肝病毒表面抗原PreS1(20—47)单链抗体(ScFv)基因的表达载体。该ScFv基因转化烟草后在烟草根部细胞的细胞质和内质网中获得表达。实验结果表明，5’端融合ER导向信号肽的重组ScFv可通过根分泌表达。     

氦氖激光对人胚腱细胞生长分泌的影响

目的 阐明氦氖激光促进人胚腱细胞增殖及分泌胶原的机制。方法 将传代培养的人胚腱细胞分为对照组、照射1日组、照射3日组及照射5日组。在氦氖激光照射的不同时相点，分别测定细胞DNA含量，cAMP水平及胶原分泌量。结果 在氦氖激光作用早期（1－3日），细胞cAMP水平与DNA合成均呈明显升高（P＜0.05)，细胞内信使物质合成及细胞增殖加快，但胶原分泌无变化，而在氦氖激光作用晚期（3－5日），当cAMP水平及DNA合成都不再改变时，腱细胞分泌胶原量显著增加（P＜0.01)。结论 氦氖激光可能通过作用于cAMP蛋白激酶A信号转导系统，从而调控人胚腱细胞增殖及胶原分泌。提示临床应用氛氖激光促进肌腱愈合宜从早期开始，并且需要照射足够长的时间。     

水稻根际固氮粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)的反硝化作用、固氮作用和水稻的根分泌作用

粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)是从水稻根分离得到的固氮菌。在厌氧条件下,它能以乳酸钠为碳源,NH_4~ 为氮源进行反硝化作用。~(15)NO_3~-作为最终电子受体,接受无氧呼吸链传递的末端电子,经~(15)NO_2~-等氮氧化物最终还原为~(15)N_2。反硝化作用产生的~(15)N_2能被微好氧条件下生长的粪产碱菌所重新固定,电子传递过程中产生的能量支持固氮作用。水稻幼苗通过根分泌各种有机酸和糖。接种粪产碱菌能刺激水稻根的分泌作用,并能对根分泌物的组成及含量产生影响。本课题用~(15)N、~(14)C示踪法对5种水稻进行研究。实验结果指出:粳稻“京白”幼苗~(14)C_-光合产物的2.63％以分泌物形式释放到根区,接种粪产碱菌后根分泌量增至3.52％,并且大部分被粪产碱菌吸收作用。植株根分泌能力的强弱直接影响根际固氮活性的高低。     

从烟草悬浮细胞中分离液泡前体的方法研究

通过跟踪含有液泡前体特异标记物的组分, 利用细胞壁酶水解胞壁制造原生质体, 并用真针头挤压的方法裂解细胞, 用蔗糖密度梯度离心的方法分离液泡前体. 通过相差显微镜观察, 发现所分离的液泡前体保持完整的结构. 利用不同细胞器的标记物抗体进行免疫标记检测, 证明所纯化的液泡前体不含其他细胞器, 具有较高的纯度.     

内分泌细胞溶酶体的超微结构研究

用电镜细胞化学方法研究内分泌细胞溶酶体的结构与功能。研究结果表明，所有内分泌细胞都存在丰富的溶酶体，分泌自噬作用普通存在于分泌肽类激素的细胞中，自体吞噬活动跃是分泌类固醇素细胞的重要特点。溶酶体通过分泌自噬和自体吞噬分别在两类内分泌细胞中参与激素分泌的调节。     

动情期家兔输卵管上皮及其分泌活动的电镜观察

本实验用透射电镜和扫描电镜观察了动情期家兔输卵管上皮。证实分泌细胞和纤毛细胞都有分泌功能，共分泌三种分泌物质。本文对这些分泌物质的分泌方式、分泌活动进行了研究和探讨。另外，发现上皮基膜下方始终有一层成纤维细胞形成的胞质膜伴行，据此，对血一输卵管腔屏障的构成亦进行了讨论。     

HIV-1蛋白酶在大肠杆菌中的表达

分泌融合表达HIV-1蛋白酶(Protease,PR),用于对HIV蛋白酶抑制剂的筛选.利用重叠延伸PCR方法,获得使用大肠杆菌偏爱密码子的编码HIV-1蛋白酶(PR)的基因,将目的基因重组至原核表达载体pET-SP-DsbA-T,得到"pET-SP-DsbA-PRsite-PR"分泌融合表达型载体,重组载体转化大肠杆菌BL21(DE3).工程菌在LB培养基中添加终浓度为0.1 mM的IPTG诱导表达,SDS-PAGE分析周质蛋白.DNA测序结果证实合成的HIV-1 PR基因与设计的序列完全一致,在周质空间表达出具有自切割活性的HIV-1 PR蛋白.研究成功合成并克隆了使用大肠杆菌偏好密码子的HIV-1 PR的DNA编码序列,经表达鉴定得到具有自切割活性的HIV-1 PR蛋白.     

胰岛素类似物浅介

研究表明，良好的血糖控制能够显著减少和延缓糖尿病慢性并发症的发生和发展。胰岛素补充，替代治疗可以有效地降低血糖，但在临床实践中往往未能及时使用胰岛素治疗，或不能有效地控制血糖。原因之一就是担心治疗过程中可能出现低血糖反应，而严重的低血糖反应是造成糖尿病患者死亡的重要原因之一。糖尿病控制与并发症研究（DCCT）提示，糖化血红蛋白（ObA1c）水平越接近目标值（美国7．0，欧洲6.5），发生低血糖的危险性越大。临床上常因担心低血糖的发生而放宽血糖的控制标准。追究低血糖发生的原因往往是现有的外源性胰岛素方案不能很好地重建正常生理性胰岛素分泌，[第一段]     

检验检疫部门提醒:欧盟拟在纺织品中实施NPEO禁令

近日,欧盟委员会起草一项REACH法规修正案,拟禁止壬基酚聚氧乙烯醚(NPEO)含量超过0.01%的纺织品在欧盟市场上销售,该草案预计在今年实施,过渡期为60个月。NPEO目前被广泛用于各种行业的清洁剂,乳化剂和表面活性剂。在一些非欧盟国家,NPEO在纺织工业领域被用作洗涤过程中的洗涤剂和染色过程中染色助剂。研究表明,NPEO对哺乳动物和水生生物存在毒性及致癌性,同时NPEO有类似雌性激素作用,能危害人体正常的激素分泌的化学物质,即所说     

过敏原肌质钙结合蛋白在毕赤酵母中的表达、优化及免疫反应性研究

目的 探究天然肌质钙结合蛋白(sarcoplasmic calcium binding protein, SCP)的可替代物,为蟹类过敏原的检测提供基础材料,本研究首次利用毕赤酵母(Pichia pastoris, P. pastoris)高效表达表达三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)重要过敏原SCP,并检验其免疫反应性。方法 根据毕赤酵母的密码子偏好性优化SCP基因并构建重组质粒。将其热激转化至P. pastoris GS115菌株后经遗传霉素(Geneticin, G418)筛选获得阳性高拷贝子。最后通过甲醇诱导表达重组SCP并结合免疫印记(Western blotting, WB)和间接酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)验证其免疫反应性。结果 SCP在P. pastoris GS115中实现了可溶性高效表达,其表观分子量约为28 kDa。在摇瓶水平下,最佳诱导条件为pH为6.0、每24 h添加1.0%(v/v)甲醇,于28℃发酵144 h,在此条件下,纯度为91.6%的SCP产量可达15 mg/L。WB和间接ELISA结果表明,重组SCP具有IgG结合能力。结论 毕赤酵母表达系统可以得到纯度较高且免疫反应性良好的重组SCP。本研究为SCP的理化研究及产业化应用奠定了基础,并有望促进特异性甲壳类过敏原检测的发展。