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1.
从桑蚕鲜茧制取丝胶,采用凝胶电泳法分离出3种主要丝胶A、M和P,经赖氨酰内切酶、胰蛋酶降解、逆相色层分离出氨基酸碎片,再利用气相定序器确定了丝胶的氨基序列,并根据丝胶Ser1基因编码顺序表征了3种丝胶的基本结构,表明丝胶A有别于丝胶M和P,因其不含构成Ser1蛋白质主要部分的38-氨基酸重复。 相似文献
2.
通过家蚕杆状病毒表面展示技术获得约氏疟原虫有性阶段候选抗原Pys25(217AA)和Pys48(455AA),以期建立一种新的鼠疟模型。首先利用大肠杆菌原核表达系统表达这两种抗原,免疫Balb/c小鼠制备多克隆抗体,同时利用家蚕杆状病毒表面展示技术,并改造pFastBac Dual载体,在其Ph启动子前端加入哺乳动物启动子CMV,并将目的蛋白基因与杆状病毒囊膜蛋白gp64基因片段融合表达,融合蛋白展示在病毒粒子表面。用其免疫Balb/c小鼠,在小鼠体内,CMV启动子启动融合蛋白表达,共同刺激小鼠产生多克隆抗体。通过间接ELISA检测,两种抗原抗体效价均能达到1∶12 800。本实验为后期免疫阻断效应研究、多时期多价疫苗的构建及鼠疫模型的建立提供了实验基础。 相似文献
3.
信号肽引导源基因在昆虫表达系统中的分泌表达 总被引:1,自引:0,他引:1
将杆状病来源的gp67信号肽引导的慈姑蛋白酶抑制剂(API)基因与植物来源的慈姑蛋白酶抑制剂信号肽引导的慈姑蛋白抑制剂(API)基因,分别克隆到昆虫杆状病毒转载体pBacPAK8中,通过共转染将它们分别整合到昆虫病毒表达载体Bm—BacPAK6中,将获得的重组病毒CrBK—API2和CrBK—bpAPI4分别接种家蚕(Bombyx mori)细胞、家蚕幼虫及蛹体中,慈姑蛋白酶抑制剂得到了高效表达。从家蚕细胞的表达来看,外源表达产物大多存在于细胞外的上清液中;从家蚕幼虫体内表达来看,信号肽能引导外源基因高效表达,且表达产物的90%以上能分泌到细胞外;蛹体中的表达情况与幼虫中的相似,但表达产物出了不均一的现象,从表达产物的分子量测定来看,这两种信号肽在表达过程中都没有被切除。 相似文献
4.
5.
6.
7.
8.
[目的]以家蚕为试虫,测定昆虫病原线虫(entomopathogenic nematode,EPN)对家蚕的安全性。[方法]EPN对家蚕的侵染试验参照《农药生物活性测试标准操作规范》(杀虫剂卷)所述鳞翅目幼虫喷雾法和浸叶饲喂法进行;EPN对家蚕安全性试验参照《化学农药环境安全评价试验准则》第11部分——家蚕急性毒性试验方法进行。[结果]当浓度为15亿线虫/hm~2时,结果显示存在一定的风险。病原线虫喷施后6 h内取桑叶喂食,可显著影响家蚕虫的结茧率和化蛹率,存在一定的风险,但6 h后的桑叶喂食则对其没有显著影响。[结论]严格控制施药后的间隔时间,EPN制剂可在蚕桑地区使用。 相似文献
9.
10.
采用食下毒叶法测定25%吡虫啉WP、4.5%高效氯氰菊酯SC、40%丙·辛EC、40%敌百·氧乐果EC、20%氯氟氰·氯胺磷EC以及45%松脂酸钠SP农药对家蚕的急性毒性,并根据其毒性范围进行分级,评价其对环境的安全性。试验结果表明:4.5%高效氯氰菊酯SC对家蚕LC50〈0.5mg/kg,属于剧毒级;25%吡虫啉WP、40%丙·辛EC和20%氯氟氰·氯胺磷EC对家蚕LC50在0.5~20mg/ks之间,属于高毒级农药;40%敌百·氧乐果EC对家蚕200mg/kg〉LCso〉20mg/kg,属于中毒农药。5种化学杀虫剂的田间施药浓度/LC∞比值都远大于10,对家蚕具有极高的风险性。而生物农药45%松脂酸钠SP对家蚕毒性较低(LC50〉1000mg/kg),属于低毒农药。 相似文献