禽流感与烹饪

禽流感是由一般只发生在禽类动物中的流感病毒，偶然也会感染人体引起的疾病。     

动物病毒的生物化学

动物病毒千差万别，不仅大小形状，而且基因组的形式和组成，以及其表达和复制方式都存在差异。它们侵入细胞后，根据其基因组不同的表达机制可将动物病毒分成几类，其中包括：①一般DNA病毒，它利用寄主细胞的酶在核中转录并复制它的基因组；②细胞质中进行复制的DNA病毒，它自己带有一套酶用于mRNA的合成以及加工和复制等过程。     

三维流感病毒免疫模型研究

随着人类社会的发展,人类对于自身健康的研究越来越深入,人工免疫系统也成为了生物信息研究领域的热点.传统的动物实验虽趋于完善,却也出现了研究技术上的难关,研究员们无法通过传统的实验室环境模拟数量化的人体体内环境,更无法用人类活体做实验.这样,就产生了二维的免疫计算机模型,但也并没有完全贴切人体环境的要求.因此,我们利用Java 3D计算机三维模型以及计算机仿真方式来搭建类似于体内真实环境的人体免疫计算机模型,这可以使得人工免疫系统模型更加完善.与培养皿方式的实验相比,计算机模型的实验方式可以用于研究免疫系统智能性,对研究设计新的人工免疫系统方法很有意义.而且计算机模型具有准确性高、误报率低和稳定性好等优点.本文利用Java 3D技术,通过细胞之间的相互作用,加入对流感病毒免疫应答的仿真,结合免疫细胞的参数,模拟临床实验,期望得到一些规律性的结果.     

ComputeX 2009核心硬件技术看点前瞻

2009年6月2日至6月6日．一年一度的台北国际电脑展（ComputeX）即将开幕。虽然ComputeX暂时还只能排在德国CeBIT之后位列世界第二大电脑展（亚洲最大）,但是由于中国台湾本土云集了大批的业界中坚力量,因此其影响力丝毫不会比CeBIT来得逊色。当ComputeX步入第29个年头的时候,恰逢全球经济衰退和新型流感病毒肆虐的阴霾。     

牛副流感病毒3型在不同细胞中的复制动力学分析

目的对牛副流感病毒3型(bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)在Vero-E6、MRC-5和MDBK 3种细胞中的复制动力学进行分析。方法将BPIV3分别接种至Vero-E6、MRC-5和MDBK 3种细胞,盲传3代,逐日观察细胞病变(CPE)情况;采用直接免疫荧光抗体法检测3种细胞盲传3代后BPIV3的增殖情况;将病毒滴度为1.0×104TCID50/ml的BPIV3分别接种至MDBK和Vero-E6单层细胞中,培养7 d,逐日测定各细胞中的病毒滴度。结果BPIV3在MDBK细胞中盲传1代即可观察到明显的CPE;在Vero-E6细胞中盲传2、3代可见CPE;在MRC-5细胞中盲传3代未见CPE。在MDBK细胞中盲传3代可检测到较强荧光信号;在Vero-E6细胞中盲传3代荧光强度较弱;在MRC-5细胞中盲传3代未检测到荧光信号。BPIV3在MDBK和Vero-E6细胞中分别于培养第5和6天时病毒滴度达峰值,分别为1.2×1010和1.0×105 TCID50/ml。结论 BPIV3在MDBK细胞中的复制动力强于Vero-E6细胞,最适用于培养该病毒,MRC-5细胞不适用于培养BPIV3。     

副流感病毒5型CC-14株辅助质粒的构建及鉴定

目的构建副流感病毒5型(parainfluenza virus 5,PIV5)CC-14株核衣壳蛋白(nucleoprotein,NP)、磷蛋白(phosphoprotein,P)和聚合酶蛋白(large protein,L)基因真核表达质粒,并在MDCK细胞中表达,为该病毒反向遗传系统的建立奠定基础。方法根据PIV5 CC-14株全基因组中的NP、P和L基因分别设计特异性引物,经RT-PCR扩增得到NP、P和L基因,酶切后分别连接至pc DNA3.1+真核表达载体(或p MD18-T)上,构建辅助质粒pc DNA3.1-NP、pc DNA3.1-P和pc DNA3.1-L,转染MDCK细胞,RT-PCR检测NP、P和DL基因的转录情况。结果经双酶切及测序鉴定证明辅助质粒pc DNA3.1-NP、pc DNA3.1-P和pc DNA3.1-L构建正确,3个质粒转染MDCK细胞后,经RT-PCR分别可扩增得到NP、P和DL基因片段。结论成功构建了PIV5 CC-14株pc DNA3.1-NP、pc DNA3.1-P和pc DNA3.1-L辅助质粒,且均可在MDCK细胞中有效转录,为该病毒反向遗传系统的建立奠定了基础。     

四价流感病毒裂解疫苗血凝素含量检测方法的验证

目的验证四价流感病毒裂解疫苗[quadrivalent influenza vaccines(split virion)inactivated,QIV]血凝素含量检测方法的可行性。方法采用传统的单向免疫扩散法(single-radial immunodiffusion,SRID)检测QIVH1N1和H3N2型的血凝素含量,双价抗原参考品SRID法检测两种B型(包括B/Yam和B/Vic)血凝素含量,并对该检测方法进行准确度、精密度、专属性及线性验证。结果 QIV各型的血凝素含量总体回收率为97.8%~107.6%,相对标准偏差(relative standard deviation,RSD)为0.59%~1.83%;试验间和试验内RSD均5.0%;4个型别血凝素含量在10~50μg/ml范围时,标准曲线呈良好的线性,R2均大于0.980 0,定量限分别为:H1N1:4.53μg/ml,H3N2:3.83μg/ml,B/Yam:2.89μg/ml,B/Vic:5.60μg/ml;各型别流感裂解疫苗供试品和抗原参考品与对应抗血清参考品出现沉淀环,与非对应抗血清参考品不出现沉淀环。结论 QIV血凝素含量检测法是可行的。     

甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的稳定性

目的考察甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的稳定性,以保证临床用药质量。方法将3批甲型H1N1流感病毒裂解疫苗分别于37℃和2~8℃放置不同时间,进行鉴别试验、外观、装量、pH、血凝素含量、硫柳汞含量、无菌检查、异常毒性检查、细菌内毒素含量、卵清蛋白含量等全项目检测,观察疫苗的热稳定性和长期稳定性。结果 3批甲型H1N1流感病毒裂解疫苗于37℃放置7 d,各项指标均符合甲型H1N1流感病毒裂解疫苗制造和检定规程要求,且与0 d结果比较无明显差异;3批甲型H1N1流感病毒裂解疫苗于2~8℃放置18个月,各项指标均达到合格要求。结论甲型H1N1流感病毒裂解疫苗的热稳定性及长期稳定性均良好,表明甲型H1N1流感病毒裂解疫苗质量稳定。     

乙型流感病毒荧光定量RT-PCR检测方法的建立及验证

目的 建立乙型（B/Yamagata和B/Victotria系）流感病毒荧光定量RT-PCR(qRT-PCR)检测方法,并进行验证及初步应用。方法 根据乙型流感病毒（B/Yamagata和B/Victotria系）血凝素（hemagglutinin,HA）和神经氨酸（neuraminidase,NA）遗传差异,构建含B/Yamagata系流感病毒HA(120 bp)、NA(122 bp)及含B/Victotria系流感病毒HA(147 bp)和NA(141 bp)目的序列的重组标准品质粒,并设计特异性引物和探针,绘制标准曲线,建立qRTPCR检测方法。验证该方法的灵敏度、特异性和重复性,并利用建立的方法检测不同年份乙型流感病毒疫苗株和临床分离的季节性乙型流感病毒。结果 B/Yamagata系病毒（HA和NA序列）获得的标准曲线方程为Y=-3.370 1 X+41.061,R2=0.996,B/Victotria病毒（HA和NA序列）获得的标准曲线方程为Y=-3.318 85 X+40.952,R2=0.996。该方法具有高度特异性,能够区分乙型流感病毒,对甲型流感病毒（A/H1N1和A...     

2015—2018年北京市东城区甲型H1N1pdm09亚型流感病毒分子流行病学特征分析

目的 分析2015—2018年北京市东城区甲型H1N1pdm09亚型流感病毒的分子流行病学特征。方法 收集2015年1月1日—2018年12月31日期间北京市东城区流感样病例的咽拭子样本,RT-PCR法检测核酸,阳性样本接种至MDCK细胞进行病毒分离,血凝抑制试验鉴定流感亚型。选取30株甲型H1N1pdm09亚型分离株,RT-PCR法扩增血凝素（hemagglutinin,HA）和神经氨酸酶（neuraminidase,NA）基因序列,并测序。应用DNASTAR 5.0软件将HA、NA序列进行拼接,MEGA 6.0软件建立系统进化树,并进行遗传特征分析。结果 共检测样本7 533份,甲型H1N1pdm09亚型231份,阳性率为23.24%。30株甲型H1N1pdm09亚型分离株与WHO推荐的北半球疫苗株A-Brisbane-02-2018的HA基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为97.42%～99.53%和97.40%～99.32%;NA基因核苷酸和氨基酸序列同源性分别为98.11%～99.74%和97.72%～99.80%。HA基因共有16个氨基酸位点发生改变,NA基因共有10个位点发...