浓缩~(235)U诱发免疫细胞凋亡的电镜和琼脂糖凝胶电泳研究

研究了浓缩235U内照射诱发人淋巴细胞白血病细胞株Molt－4细胞和巨噬细胞株Ana－1细胞的细胞调亡。估算了浓缩235U在不同阶段培养细胞中的辐射累积吸收剂量。通过电镜对免疫细胞的形态观察，发现Molt－4和Ana－1细胞在受235U内照射作用下可呈现核染质边聚，DNA链断裂和膜包裹的凋亡小体形成。对Molt－4和Ana－1细胞的DNA抽提，进行DNA琼脂糖凝胶电泳也显示出阶梯状条带形成的细胞调亡特征。从而证实了浓缩235U内照射可导致免疫细胞Molt－4和Ana－1细胞的凋亡发生。     

2—甲基—1，4—萘醌对DNA光敏损伤的诱导作用

选择波长337nm的激光作为激励光源，借助凝胶电泳研究了2－甲基－1，4－萘醌诱导的DNA光敏损伤。结果表明：在氧气饱和、脱氧条件下光敏损伤显著，DNA损伤主要与光子剂量、核酸与萘醌浓度比及DNA存在形式有关。     

免疫磁性微球的制备及对IgG的分离

采用反相悬浮包埋法制备SPA-Sepharose免疫磁性微球,并对产物的结构、粒径、磁性能进行了表征,所得产物粒径大约为5μm,表面包裹葡萄球菌蛋白A(Staphylococcal Protein A,简称SPA),分散性较好,具有超顺磁性。利用SPA对免疫球蛋白G(IgG)的特异性吸附反应及磁性微球的超顺磁性,从猪血清中分离IgG,试验结果表明:SPA免疫磁性微球对猪血清的最大吸附效率是70.12%,可反复使用29次。     

双水相分离提取胃蛋白酶和琼脂糖的初步研究

以聚乙二醇/硫酸钠双水相体系分离提取琼脂糖和胃蛋白酶.结果表明:琼脂糖的回收率高于90%,胃蛋白酶的回收率约为50%,两者最适宜的分离条件为:pH值为3,Na2SO4浓度为0.4 g·mL-1,PEG10000的浓度为0.002 mol·L-1.     

直接偶联法制备配基密度可控的丁基琼脂糖层析介质

以快流速琼脂糖凝胶为基质,采用直接偶联法制备丁基琼脂糖疏水层析介质. 考察了影响反应的主要因素,通过四因素三水平正交实验和单因素实验,确定丁基琼脂糖疏水层析介质的优化反应条件为：反应温度45℃,反应时间45 min,催化剂三氟化硼乙醚用量0.02 mL/g. 在此条件下严格控制琼脂糖凝胶的含水量,改变丁基缩水甘油醚用量,制备了不同丁基密度的丁基琼脂糖疏水层析介质. 用不同密度的系列介质考察对牛血清白蛋白的吸附性能,初步研究了配基密度与吸附性能的关系;研究了疏水层析介质的机械稳定性和化学稳定性. 结果表明,其各项性能良好,具有广阔的应用前景.     

葡聚糖接枝型高载量金属螯合介质的制备与性能

对琼脂糖凝胶微球进行烯丙基活化,再接枝葡聚糖分子,考察葡聚糖分子量等因素对葡聚糖接枝过程的影响;以葡聚糖接枝琼脂糖凝胶微球为基质,制备亚氨基二乙酸型金属螯合介质,考察葡聚糖接枝过程对金属螯合介质的孔道结构、流通性能和载量等的影响. 结果表明,分子量20~500 kDa的葡聚糖都能均匀分布于琼脂糖凝胶微球内,葡聚糖接枝量随分子量增加而增大,所制的金属螯合介质形貌、粒径及其分布基本不受影响,且具有更好的流通性能,孔道结构比商品介质Ni Sepharose 6FF更丰富. 葡聚糖接枝的金属螯合介质对带组氨酸标签的乳酸脱氢酶和睫状神经营养因子的载量分别达到19和27 mg/mL,较Ni Sepharose 6FF的载量分别提高26.6%和42.0%.     

快速琼脂糖基架填料替代纤维素基架填料纯化鼠神经生长因子

<正>柱层析法由于分辨率高,易控制,可自动化操作及有效保持生物分子活性而广泛应用于生物药物的下游纯化中。Whatman公司的纤维素基架填料亲水性好、载量高,因此常作为蛋白纯化的介质。但纤维素不耐受压力,即使高度铰链的纤维素,如CM52或DE52装填到柱子中,流速也很低,通常控制线性流速在25～40 cm/h之间,因此采用该介质的纯化周     

低功率激光对大白兔血清LDL含量影响的实验研究

目的探索低功率氦氖激光对大白兔血液LDL含量的影响。方法大白兔分实验组与对照组,以波长为632.8nm,功率密度为5.4mw/cm2氦氖激光照射实验组大白兔,每天20分钟,连续照射10天。用血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳法测定实验组与对照组HDL、LDL、VLDL的含量。结果两组大白兔LDL水平有明显差异。结论低功率氦氖激光能明显降低大白兔血清LDL的水平。     

SH2020型全自动琼脂糖凝胶电泳系统在地中海贫血筛查中的应用

探讨SH2020型琼脂糖凝胶血红蛋白电泳在地中海贫血(地贫)筛查中的应用价值.方法:对2275例育龄人群、婚检和门诊患者应用北京金桑特SH2020全自动电泳分析系统进行血红蛋白电泳,通过自动扫描系统分析,检测Hb各组分的含量,初步分为属于α地贫或β地贫,再通过基因诊断确诊.在2275例中,通过血红蛋白电泳对HbA2异常者640例,进一步分为α地贫表型阳性412例,β地贫表型阳性186例.基因诊断结果显示,α地贫初筛符合率82.0%,β地贫初筛符合率90.3%.结果表明,SH2020型全自动琼脂糖凝胶血红蛋白电泳仪分辨率高,能够定量检测HbA、HbF、HbA2、CA含量,将地贫进行初步分类为α地贫或β地贫,有效地筛查出高危夫妇,并能够分辨出极微量异常Hb,为进一步进行基因诊断和遗传咨询提供准确可靠的数据.     

琼脂糖凝胶微球活化度的考察

琼脂糖凝胶微球广泛用于蛋白质的纯化,其活化度越高,能嫁接的亲和配基越多,纯化效率就越高。本文首先以反相乳液悬浮法制得琼脂糖微球,研究了琼脂糖活化反应中氢氧化钠、环氧氯丙烷、硼氢化钠的浓度及反应时间对活化度的影响,得到最佳活化条件。在此基础上,探索了不同粒径的琼脂糖微球对活化度的影响,表明凝胶微球粒径越小,活化度越高。