肝素的新药研发

糖胺聚糖肝素作为抗凝剂应用于临床已有超过50年的历史。天然肝素中决定抗凝活性的序列结构也已经被完全阐明。然而，作为一个复杂多糖，肝素还有一系列与抗凝作用无关的性质。近期研究越来越了解肝素发挥各种功能所需的特殊结构，从而有可能以肝素为模板进行“裁剪”，产生特殊序列结构并分离其特定治疗活性。本研究探讨了针对包括癌症和各种炎症等多种疾病的新型药物治疗的基础依据。     

响应面法优化四角蛤蜊糖胺聚糖提取工艺研究

在单因素试验的基础上,利用SAS软件和响应面分析相结合的方法对四角蛤蜊糖胺聚糖的提取工艺进行了优化,通过试验得到了二次多项式回归模型,模型的相关系数R2=0.976 2,该模型能较好的反映各因素与响应值之间的关系。最佳提取工艺的条件是水料比3∶1,酶解时间3.5 h,酶添加量1.0%。在此条件下,糖胺聚糖的提取率可达0.448%。     

酶解法制备低蛋白含量海参多糖条件的研究

以国产大宗低值海参——海地瓜为原料,以酶解结合超滤技术制备海参多糖.通过单因素试验及响应面试验研究酶解过程各因素对海参多糖蛋白含量的影响,并对酶解条件进行优化.试验结果表明:成功建立了预测海参多糖中蛋白含量的数学模型;复合蛋白酶酶解的最优条件是:pH 7.0、温度51℃、底物质量分数4.82％、酶与底物的质量比4.08％、时间12h.经优化,制备了低蛋白含量海参多糖,多糖蛋白含量由19.91％降至2.41％.     

玉足海参糖胺聚糖对血液中钙离子的影响

研究玉足海参糖胺聚糖(GAG)对血液中钙离子(Ca2+)浓度的影响. 健康家兔耳缘静脉取血进行体外复钙凝血实验,考察GAG对复钙凝血时间的影响.用GAG浸泡、烘干后的毛细管进行小鼠眼眶后静脉丛取血,考察GAG对取血过程中Ca2+浓度的影响.考察静脉注射连续给药一周后,GAG对大鼠血液中Ca2+浓度的影响.GAG对复钙凝血时间的延长可随足够Ca2+的加入而减小.用GAG浸泡、烘干后的毛细血管对小鼠眼眶后静脉丛进行取血,发现GAG可显著降低血液中Ca2+的浓度.     

近江牡蛎糖胺聚糖体内外抗肿瘤作用研究

研究近江牡蛎糖胺聚糖体内外抗肿瘤活性。采用MTT法测定近江牡蛎糖胺聚糖(CG)对K562、CNE-2Z、Hela细胞增殖的影响;采用动物体内移植性肿瘤模型,观察CG对S180实体瘤和艾氏癌腹水型(EAC)、白血病L1210腹水瘤的影响。实验显示近江牡蛎糖胺聚糖级分CG、CGIa和CGIIa均可以抑制K562、CNE-2Z、Hela细胞的生长(p0.05),其中CGIa对肿瘤细胞增殖的抑制作用最强,72 h时对K562、CNE-2Z细胞增殖抑制作用的IC50分别为1.95、7.36 mg/L;且对抗肿瘤药物5-Fu具有增敏作用。CG对移植性S180肉瘤抑瘤率可达到44.66%,与CTX合用后可提高至67.96%,且对CTX损伤的小鼠免疫功能有一定的修复作用;CG与CTX合用后能延长L1210腹水瘤小鼠和荷EAC小鼠的生命,其生命延长率分别高达50.27%和55.27%。表明近江牡蛎糖胺聚糖具有体内外抗肿瘤活性,其作用可能与直接细胞毒作用及增强机体免疫功能有关。     

近江牡蛎糖胺聚糖毒理学的初步评价

目的:研究近江牡蛎糖胺聚糖作为保健食品使用的安全性。方法:采用急性毒性实验、遗传毒性实验(Ames实验、小鼠骨髓细胞微核实验、小鼠精子畸形实验)进行毒理学研究与评价。结果:小鼠经口最大耐受剂量(MTD)均大于20.0g/kg;3项遗传毒性实验的结果皆为阴性,未显示出致突变性。结论:近江牡蛎糖胺聚糖急性毒性分级属无毒级,无遗传毒性。     

超声波辅助盐法提取鹿茸糖胺聚糖工艺优化

以鹿茸为原料,应用超声波辅助盐法提取糖胺聚糖。在单因素试验基础上,选取超声波功率、超声波处理时间、液料比为自变量,鹿茸糖胺聚糖提取率为响应值,应用Box-Behnken 旋转回归设计对提取工艺进行优化。结果表明：最优提取条件为超声波处理时间19.57min、超声波功率401.2W、液料比43.8:1(mL/g),在此条件下,鹿茸糖胺聚糖实际提取率为3.29%。与蛋白酶提取法相比,该方法糖胺聚糖提取率较高,简便易行并能降低生产成本。     

菲律宾蛤仔糖胺聚糖的分离纯化及结构表征

为研究菲律宾蛤仔中糖胺聚糖（glycosaminoglycans,GAGs）的结构特征,采用水酶法提取菲律宾蛤仔粗多糖,利用二乙胺基乙基纤维素-650M（diethylaminoethyl cellulose-650M,DEAE-650M）离子交换柱层析进行分离纯化后,通过紫外光谱（ultraviolet,UV）、红外光谱（infrared,IR）和核磁共振（nuclear magnetic resonance,NMR）等方法对纯化后的菲律宾蛤仔GAG-1进行结构表征与分析。结果表明,采用水酶法提取的菲律宾蛤仔GAGs粗品,得率为1.04%。应用DEAE-650M离子交换柱层析分离纯化得到峰GAG-1和峰GAG-2。其中GAG-1的含量为89.56%,比粗品提高了82.43%,而GAG-2含量很低。紫外光谱分析结果表明,菲律宾蛤仔GAG-1中含微量核酸或蛋白质杂质;红外光谱分析表明GAG-1含有羧基、乙酰氨基、硫酸基等基团,其单体为吡喃型;1H-NMR和13C-NMR图谱分析结果显示GAG-1 以 β-D-Glc（1→4）-为主要连接方式。     

翡翠贻贝糖胺聚糖体外抑制ONE-2Z肿瘤细胞生长作用的研究

以南海贝类翡翠贻贝全脏器为原料提职得到糖胺聚糖粗品,经蛋白质等电点沉淀法处理后得到糖胺聚糖精制品(RG),糖胺聚糖含量52.3%.应用MTT法检测糖胺聚糖精制品对人鼻咽癌细胞CNE-2Z体外抗肿瘤活性.结果显示:RG不同剂量在作用不同时间后的抑瘤效果不同,其中200μg/mnL的RG作用 72h抑瘤率达到最高值为29.3%.RG与5-Fu合用的抑瘤效果,随着药物作用时间的延长,两者由协同作用变为单纯相加作用.     

华贵栉孔扇贝全脏器中糖胺聚糖的分离提取及其抗肿瘤活性研究

以湛江地区盛产的华贵栉孔扇贝全脏器为原料,经木瓜蛋白酶和枯草杆菌中性蛋白酶双酶水解．醇沉后得到华贵栉孔扇贝糖胺聚糖粗品,采用MTT法检测粗品体外对人宫颈癌细胞（Hela）活性的影响。实验结果表明：采用双酶水解法粗品得率为1.26%,总糖含量为41．4％,糖胺聚糖（GAG）含量为26．90／0。粗品具有对Hela肿瘤细胞的生长显著性抑制作用（p〈0．05）。