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1.
《中国生物制品学杂志》2015,(10)
目的表达纯化可溶性肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)相关凋亡诱导配体(TNF-related apoptosisinducing ligand,TRAIL)蛋白,并测定其生物学活性。方法利用E.coli中表达C-端带有6×His标签的可溶性TRAIL蛋白,并优化诱导时间(4、6和8 h)和诱导剂IPTG的浓度(0.06、0.125、0.25、0.5、1 mmol/L)。表达产物经Ni亲和层析和离子交换层析纯化后,采用MTT法测定不同浓度TRAIL(终浓度分别为100、200、400 ng/ml)的活性,并检测亲和层析过程中两种洗脱方式(洗脱液4℃留柱过夜后进行洗脱和洗脱液进柱后直接收集流出液)及纯化过程中两次透析的时间(均为24和48 h)对TRAIL活性的影响。结果最佳诱导时间为6 h,最佳IPTG诱导浓度为0.5 mmol/L。表达产物的表达量占菌体总蛋白的20%,相对分子质量为20 000,可与兔抗人TRAIL单克隆抗体发生特异性结合。TRAIL终浓度为100、200和400 ng/ml的实验组的抑制率分别约为36%、53%和73%。亲和层析的两种洗脱方式的TRAIL活性差异无统计学意义(P0.05),透析48 h比透析24 h获得的TRAIL活性显著降低(P0.05)。结论 TRAIL蛋白成功在E.coli中表达,具有抑制肿瘤细胞生长的作用,优化后的TRAIL诱导条件和纯化方法可进一步大量生产高TRAIL蛋白的活性,满足了TRAIL的基础及临床相关研究的要求。 相似文献
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3.
建立了一种基于鲁米诺(luminol)化学发光的流动注射-化学发光系统,考察了蠕动泵流速、luminol浓度等对系统发光强度的影响,确定了最佳实验参数,并采用该系统对BSA的构象变化活性进行研究。结果表明,BSA在碱性环境中可显著增强luminol的发光强度,华法林对于BSA/luminol体系发光强度的抑制作用在一定浓度范围内(0.1~1600μmol·L~(-1))呈现良好的线性关系。该方法稳定性高,结果可靠且易于操作,可为其他功能蛋白质构象变化活性表征提供方法学的借鉴。 相似文献
4.
诱导水解法制备微细高分散金红石型二氧化钛 总被引:2,自引:0,他引:2
采用加热TiCl4稀溶液的方式,制备晶种,将其导入一定浓度的TiCl4溶液中进行诱导水解。所得的偏钛酸经干燥、煅烧后得到分散性好,D50为1 mm以下,金红石含量为≥95%的高纯TiO2,可用于生产PTC热敏电阻等铁电陶瓷。 相似文献
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6.
7.
HgCdTe红外探测器件是目前研究和使用的主要探测器件之一,pn结构是它的基本功能单元和提高性能的关键之一,由其列阵构成的焦平面是HgCdTe红外探测器件发展的重要方向。因此迫切需要一种方便可行的无损检测方法可以实现对焦平面列阵的在线信息反馈以及针对pn功能结构进行深入研究。激光束诱导电流(LBIC)即是一种以激光为 相似文献
8.
9.
碾压混凝土穿透型诱导缝不同扩展阶段的强度指标试验研究 总被引:2,自引:0,他引:2
在不同削弱度碾压混凝土轴拉试件的穿透型诱导缝周围粘贴了应变片,得到在不同应力状态下诱导缝应变发展规律为:在加载初期,离缝端不同距离的应变发展较为均匀,数值上相差不突出;随着荷载的增加,应变开始出现不均匀发展,离缝端越远,应变变化越缓慢;当接近最大荷载的阶段,缝端应变急速发展,试件瞬间断裂。应变从均匀发展变为不均匀发展,实质上隐含了诱导缝起裂、稳定发展、失稳断裂的整个过程,针对这一试验现象,结合断裂力学理论,建立了诱导缝不同开裂阶段的远场温度应力强度指标模型。 相似文献
10.