一株产羧酸酯酶菌的鉴定及酯酶特征的研究

目的:鉴定中国白酒发酵过程中的微生物种类，研究关键酶的特征与作用机制有利于提高白酒的优质品率。方法:本研究用形态学和生理学、16S rRNA、gyr B基因和antiSMASH分析的方法对酒曲中的一株微生物进行了验证；对该菌株的特性进行了研究，采用分子建模的方法获得了羧酸酯酶的3D模型，用分子对接的方法探讨了该菌株的羧酸酯酶的机理。结果:该菌株为产羧酸酯酶的革兰氏阴性菌Pb1（MW580690）；该菌株呈现典型的S型生长曲线，产物曲线为S型，羧酸酯酶活化最优pH范围为5.0~9.0。分子对接结果显示Phe21A为该酶具有催化活性的主要氨基酸，水解三丁酸甘油酯为丁酸和甘油。分子对接结果显示三丁酸甘油酯经过构象变化被转移到催化中心后，进一步被加工；酶的亲水性和疏水性的相互作用表面有利于配体向下转移，进而从疏水性通道释放产物到的酶表面。结论:产羧酸酯酶的菌株为贝莱斯芽胞杆菌，并为羧酸酯酶水解三丁酸甘油酯类物质的底物识别、转移和催化机理提供了新的见解。     

基于分子模拟技术研究来源于嗜热地衣芽孢杆菌葡聚糖酶的活性位点

为研究来源于嗜热地衣芽孢杆菌葡聚糖酶与底物的识别机制,本文通过利用分子对接、分子动力学模拟和MM-PBSA计算的方法研究了葡聚糖酶与二聚糖小分子之间的作用机制,试验结果表明,葡聚糖酶与底物的接触数较大并且距离较少,这说明其结合较为紧密;通过能量拆分,我们可以得出,Gly46、Leu63、Gln67、Tyr68、His73、Thr124、Gly125和Gln129是对结合二聚糖的关键氨基酸残基,并且His73和Thr124与二聚糖分子形成了较为稳定的氢键,这将有助于葡聚糖酶与底物的结合。本研究以期为葡聚糖酶分子结构后续的理性改造和高效利用提供有力依据。     

苯乳酸抑制链格孢霉作用靶位的分析

以从自然腐败的樱桃上分离的链格孢霉（Alternaria sp.）LD3.0086为指示菌，研究苯乳酸对链格孢霉的主要抑制作用靶位。应用分光光度法测定苯乳酸对链格孢霉的最小抑菌浓度，通过卡尔科弗卢尔荧光增白剂染液（calcofluor white，CFW）染色观察苯乳酸对菌丝顶端生长的破坏作用，利用扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察链格孢霉的超微结构变化，通过测定苯乳酸作用前后链格孢霉上清液中N-乙酰葡萄糖胺质量浓度变化研究苯乳酸对菌丝细胞壁的破坏作用，应用荧光双染色法观察苯乳酸对链格孢霉菌丝细胞膜的损伤作用。结果表明，12.5 mmol/L的苯乳酸能有效抑制链格孢霉的生长；与对照组（无菌水处理）相比，苯乳酸处理后链格孢霉顶端生长细胞无明显形变，经12.5 mmol/L苯乳酸处理的链格孢霉上清液中N-乙酰葡萄糖胺质量浓度基本不变；苯乳酸处理24 h，链格孢霉菌丝细胞壁表面无明显损伤，细胞内结构发生明显变化；苯乳酸短时间（4 h）处理链格孢霉，菌丝细胞膜仍较为完整，加入苯乳酸较长时间（8 h）后细胞膜发生破裂。综合分析可知，苯乳酸对链格孢霉的主要作用靶位应不是菌丝体的细胞壁和细胞膜，而是在菌丝体内部，通过破坏菌丝内部细胞器结构或引起细胞内的生化反应，从而抑制链格孢霉的生长和繁殖，发挥抑菌活性。     

水蜡叶斑病病原菌鉴定及对药剂的敏感性

[目的]为明确水蜡叶斑病致病菌,为其防治提供依据。[方法]采用柯赫氏法则、形态学测定、r DNA-ITS序列比对鉴定,研究了致病菌的分类地位;测定了病菌对不同杀菌剂的敏感性。[结果]水蜡叶斑病致病菌是极细链格孢菌(Alternaria tenuissima),测定了病菌对12种杀菌剂的敏感性。结果表明:10%苯醚甲环唑WP、30%氟菌唑WP、125g/L氟环唑SC对菌丝的敏感性较高,EC_(50)值分别为14.36、37.91、29.86 mg/L;对孢子的敏感性较高,EC_(50)值分别为125.81、245.73、207.03 mg/L。[结论]明确了水蜡叶斑病致病菌种类,筛选的3种杀菌剂可有效抑制病害的发生。     

抗衰老生物活性物ARGIRELINE

肉毒杆菌神经毒素(BoNTs)是一种非常有效的抗皱去皱生物活性物，它通常通过对人体的局部注射来实现其抗衰老性能，它的发明代表着化妆品的一次技术性革命，但由于它的剧毒性限制了其应用。所以有必要开发一种无毒、又有BoNTs功能的生物活性物，Lipotee、S.A公司开发的ARGIRELINE正符合了这种需求。ARGIRELINE是一种乙酰己肽物，通过志愿者人体实验，使用10％ARGIRELINE O／W乳液30天后，眼部皱纹减浅了30％，它的作用机理类似于BoNTs，即通过抑制钙依赖性接受体SNARE的形成，阻止神经递质素起作用，虽然ARGIRELINE不及BoNTs强，但实验证明，ARGIRELINE是一种无毒、无任何刺激性，甚至大剂量用量，且有很好的抗衰老效果，可以说，ARGIRELINE是BoNTs一种生物安全性的替代品。     

第七大营养素——膳食纤维在功能性食品中的应用及其发展趋势

21世纪，人们的饮食日趋精细，而因此导致的富贵病患病率也普遍增加，加之人口老龄化问题，使人们对食品的要求越来越讲究功能性。因此有人相信，21世纪将是功能性食品的世纪。膳食纤维正是由于其突出的保健功能，在欧、美、日等国的食品工业领域中得到广泛地认识和使用，并被正式列为继糖、蛋白质、脂肪、水、矿物质和维生素之后的“第七大营养素”。     

低温脂肪酶产生菌的筛选、鉴定及其部分酶学性质

从南极乔治王岛冻土来源的76株低温细菌中筛选到13株低温脂肪酶产生菌，对其中的BTsl0022菌株进行鉴定。通过生理生化特征、16s rDNA基因序列的同源性和系统发育分析发现，菌株RTsl0022属于假单胞菌属(Pseudomonas)，但与已定名的假单胞菌有一定的差异，与未定名的Pseudomonas sp．PsB的亲缘关系最接近，故将其暂定名为Pseudomonas sp．BTsl0022。对该菌脂肪酶的酶学性质初步研究表明，酶的最适作用温度为24℃，对热敏感，60℃处理30min仅残留25％酶活性，酶的适宜作用pH范围在7．0～9．0，最适pH为8．0。     

发根农杆菌R1000对野葛的遗传转化及其影响因素

初步研究了发根农杆菌R10 0 0对野葛 (Puerarialobata)的遗传转化及其影响因素。结果表明 :经发根农杆菌R10 0 0感染 13d左右可获得毛状根 ,毛状根诱导率及诱导密度分别为 17 9%和 3 9;降低YEB活化液的 pH值 ,或以肌醇 (10 g/L)代替酵母提取成分 ,可明显提高该菌种的致根性 ;叶片预培养 2～ 3d可提前 4d出根