壳聚糖酶的分离提纯及其酶学性质研究

从土壤中筛选获得的高产壳聚糖酶菌株Penicillium sp.ZD-Z1,经发酵、分离提取出两种壳聚糖酶A和酶B,并对它们分别进行酶学性质测试.分别测定酶A和酶B的等电点、相对分子质量、最适反应温度和pH、不同脱乙酰度的壳聚糖对酶活的影响.并考察了两种壳聚糖酶的酶解方式,结果表明,酶A为内切酶,酶B为外切酶.     

微生物壳聚糖酶的研究进展

概述了壳聚糖酶产生菌、理化性质、分类、结构与功能的关系;对其存在的问题进行了分析,对其未来发展进行了展望。     

壳聚糖酶解的随机进攻动力学模型

在假设里氏林霉ATCC56764产生的壳聚糖酶水解壳聚糖是以唯一内切方式随机进攻β-1，4糖苷键的基础上，结合终产物非竞争性抑制的M-M动力学，建立了壳聚糖降解的数学模型，并用四阶Runge-Kutta方法结合Powell优化方法对模型中各个动力学参数进行了优化。模型计算结果与实验数据的比较表明，建立的数学模型能够合理地描述和解释壳聚糖降解的动力学过程，有助于加深对壳聚糖酶法降解机理的认识，对生产特定聚合度的壳聚糖具有指导意义。     

Purification and enzymatic properties of the extracellular and constitutive chitosanase produced by Bacillus subtilis RKY3

BACKGROUND: Purification and enzymatic properties of a chitosanase from Bacillus subtilis RKY3 have been investigated to produce a chitooligosaccharide. The enzyme reported was extracellular and constitutive, which was purified by two sequential steps including ammonium sulfate precipitation and ion exchange chromatography. RESULTS: Sodium dodecyl sulfate‐polyacrylamide gel electrophoresis of the purified chitosanase revealed one single band corresponding to a molecular weight of around 24 kDa. The highest chitosanase activity was found to be at pH 6.0 and at 60 °C. Although the mercaptide forming agents such as Hg²⁺ (10 mmol L^?1) and p‐hydroxymercuribenzoic acid (1 mmol L^?1, 10 mmol L^?1) significantly or totally inhibited the enzyme activity, its activity was enhanced by the presence of 10 mmol L^?1 Mn²⁺. The enzyme showed activity for hydrolysis of soluble chitosan and glycol chitosan, but colloidal chitin, carboxymethyl cellulose, crystalline cellulose, and soluble starch were not hydrolyzed. The analysis of chitosan hydrolysis by thin‐layer chromatography and viscosity variation revealed that the purified enzyme should be endosplitting‐type chitosanase. CONCLUSION: The chitosanase produced by Bacillus subtilis RKY3 was a novel chitosanlytic enzyme with relatively low molecular weight, which is a versatile enzyme for chitosan hydrolysis because it could hydrolyze soluble chitosan into a biofunctional oligosaccharide at a high level. Copyright © 2011 Society of Chemical Industry     

产壳聚糖酶的海洋青霉菌筛选及其寡营养发酵的探究

从海边海螺、贝壳及其附着物的微生物中筛选出产壳聚糖酶的青霉菌。以此菌为出发菌,以降低发酵产酶成本为目的,采用不同的发酵温度,分别添加不同诱导物进行发酵产酶,探讨温度、诱导物对菌种生长、酶活力的影响。实验结果表明:低聚糖诱导产酶效果最好,室温25℃进行壳聚糖酶发酵,普通培养基酶活力最高达3.57U/mL。海水寡营养发酵产酶的适宜培养基配方为(g/L):蛋白胨9g、葡萄糖10g的海水培养基,酶活力可以达到3.16U/mL,初步实现利用海水进行寡营养发酵产酶,该菌株具有工业应用潜力。     

壳聚糖酶制备壳寡糖的研究与应用

本文概述了国内外应用壳聚糖酶制备壳寡糖的研究开发现状,着重阐述了酶法生产壳寡糖的工艺过程和测定方法。     

响应面法优化鹿皮曲霉ZJOU-AC1产壳聚糖酶的发酵条件

以壳聚糖酶活力为评价指标,在单因素试验的基础上,采用响应面法对鹿皮曲霉(Aspergillus cervinus)ZJOU-AC1产壳聚糖酶的发酵条件进行优化。结果表明,最佳发酵条件为胶体壳聚糖1.5%,硫酸铵0.4%,磷酸二氢钾0.2%,硫酸镁0.05%,麸皮2%,Tween-80 0.06%,发酵时间96 h,发酵温度30 ℃,初始pH 5.9,接种量3%。在此最佳条件下,最终测得壳聚糖酶平均酶活为8.26 U/mL,是优化前(2.05 U/mL)的4.03倍。     

Bacillus sp.AA5所产壳聚糖酶的纯化及性质研究

纯化Bacillussp.AA5所产的壳聚糖酶,经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测得该酶的分子量大约为38.1kDa。同时对其酶学性质进行了初步研究,发现该壳聚糖酶在4℃下10d内稳定性良好,酶的最适温度和pH值分别为43℃和7.0,Ca2 、Mg2 、Ba2 对它的酶活有不同程度的促进作用。     

不同酶切方式制备的壳寡糖抑菌活性的研究

壳寡糖可以抑制多种病原微生物的生长，其抑菌活性与其数均相对分子质量有密切关系.由专一性的壳聚糖混合酶、内切酶和外切酶降解制备3种不同数均相对分子质量的壳寡糖C-1、C-2和C-3样品，通过抑制生长速率的方法，研究了3种壳寡糖对几种常见植物病原菌的拮抗作用，并采用抑菌圈法测定了壳寡糖对植物病原菌的最低抑菌质量浓度.结果表明，C-1和C-2都有较好的抑菌活性，C-2的抑菌活性明显优于C-1，C-3基本上没有抑菌活性，反而促进了植物病原菌的生长.抑菌效果因壳聚糖酶的酶切方式、壳寡糖的质量浓度和供试菌种而异.     

响应面分析法优化肠杆菌的发酵条件生产壳聚糖酶

利用筛选的肠杆菌发酵生产壳聚糖酶,对培养温度、pH和接种量进行优化,确立中心位点后进行响应面设计分析,确定最优发酵培养条件。结果表明：最佳培养工艺条件为培养温度31．74℃、pH6．5和接种量为7．26％（V/V）,培养36h时壳聚糖酶活性达到13．59U／mL,实际值与预测值之间的误差约为0．43％。壳聚糖酶的生产方式为延续合成型,具有深入优化并规模生产的潜力。