RRLC测定发酵液中达托霉素的含量

建立可快速准确测定玫瑰孢链霉菌发酵液中达托霉素含量的RRLC方法。采用高分离度快速液相色谱(RRLC)Agilent 1200 series,色谱柱:Aglient XDB C18,1.8u,4.6*50mm。流动相:0.1%三氟乙酸水溶液:乙腈=64:36,检测波长为214 nm,柱温为30℃。结果:达托霉素浓度范围在25～500ug/ml线性良好,相关系数为0.9989;测得发酵液样品的平均回收率为101.7%,RSD为0.63%。结论:方法准确可靠,可以用于达托霉素发酵过程的含量测定。     

响应面法优化达托霉素发酵培养基的研究

通过Plackett-Burman设计、最陡爬坡设计与响应面设计,对达托霉素发酵培养基进行了优化,并使用Design expert 7.0软件对实验结果进行分析.结果表明,培养基各成分中影响达托霉素产量的主要因素是糊精、可溶性淀粉和L-天冬氨酸,其最佳浓度分别为7.0g·L-1、6.66 g·L-1、0.4g·L-1,在此条件下,达托霉素的产量达到185.3 mg· L-1,较优化前提高了73.7％.     

The Structural Diversity of Acidic Lipopeptide Antibiotics

Resisting resistance : Acidic lipopeptide antibiotics are very effective in fighting multidrug‐resistant Gram‐positive bacteria, including methicillin‐resistant Staphylococcus aureus and vancomycin‐resistant enterococci. The structural diversity of these lipopeptides, including daptomycin, which is already in clinical use, is depicted in this review. Engineering approaches to yield novel lipopeptides and tailoring events facilitating structural variety are presented.

     

达托霉素及其衍生物生物合成的研究进展

随着高致病耐药菌的不断出现,临床上对新抗生素的需求十分迫切。达托霉素作为环脂肽类抗生素的第一个产品对耐药菌有很好的杀菌效果,且制剂用药方便,毒副作用小,被公认为病原菌最后一道防线--万古霉素的最佳替代品。本文在介绍达托霉素的理化特征和抗菌活性、合成基因簇的研究成果的基础上,重点对达托霉素及其衍生物的研究状况进行了综述,对达托霉素的生产及其衍生物的开发进行了展望：结合系统生物学为已有的达托霉素产生菌进一步进行代谢工程改造提供指导;通过合成生物学使达托霉素衍生物成为新型抗生素。     

环脂肽类抗生素达托霉素研究进展

对达托霉素的结构特点、抑菌原理、抗菌活性、临床应用进行综述,对其发展方向和前景进行探讨和展望,以期为达托霉素更深入研究与广泛应用提供参考。     

体外膜肺氧合技术对重症患者体内达托霉素药代药效学的影响

目的：探讨体外膜肺氧合治疗（ECMO）对重症感染患者达托霉素药动学/药效学（PK/PD）的影响。方法：入选24位重症感染患者其中ECMO组和非ECMO组各12例,静脉滴注达托霉素500 mg qd,待药物达稳后于不同时间点采集静脉血,测定血药浓度,计算并比较组间药代动力学参数,使用蒙特卡罗模拟评估达托霉素相同给药剂量下在不同人群中的靶向达成概率（PTA）,通过应用耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）的达托霉素MIC分布计算累积反应分数（CFR）。结果：ECMO与非ECMO组患者静滴达托霉素500 mg qd后,Cmax分别为（85.5±25.4） μg/mL和（79.4±29.2） μg/mL,AUC0-24分别为（674.2±267.2） mg·L-1·h和（952.9±304.5） mg·L-1·h,t1/2分别为（10.9±2.1） h和（11.6±4.3） h,Vd为（0.21±0.12） L/kg和（0.150±0.061） L/kg,CL为（13.3±4.7） mL·h-1·kg-1和（9.2±3.4） mL·h-1·kg-1,AUC0-24和CL在两组间存在显著性差异,增加其余各药动学参数无显著性差异。蒙特卡洛模拟结果表明,当MRSA对达托霉素敏感性下降时（MIC≥1 mg/L）,ECMO组PTA值和CFR值均小于90%。结论：体外膜肺氧合装置会在一定程度上影响达托霉素于重症感染患者体内的药代动力学特征。对于绝大多数行ECMO重症患者来说,当MIC≥1 mg/mL时,标准给药剂量的达托霉素无法有效覆盖MRSA所致感染,需要增加给药剂量以保证达托霉素CFR>90%。另外,建议此类患者实施达托霉素的治疗药物浓度监测,同时临床上应根据MRSA病原菌对药物的敏感性调整给药方案结论。     

注用达托霉素粉针剂无菌检查方法验证

建立了注用达托霉素粉针剂的无菌检查方法。参考中国药典2010年版无菌检查验证试验方法,采用薄膜过滤法对人工污染的6种菌株进行试验,以pH=7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液作为稀释液和冲洗液,供试品先用450 mL缓冲液进行稀释,然后用700 mL缓冲液分若干次冲洗,消除其抑菌作用。结果表明：本试验建立的注用达托霉素粉针剂无菌检查方法准确、可靠,避免了该药品无菌检查结果出现假阴性。     

达托霉素发酵培养基配方及30L罐工艺优化

采用均匀设计法优化了达托霉素发酵培养基配方,并对30L罐生产工艺进行了优化。确定达托霉素最优发酵培养基配方为:葡萄糖2.0%、淀粉2.0%、冷榨豆饼粉0.5%、蛋白胨0.6%;以该配方进行30L发酵罐生产,当前体癸酸钠的补料起始时间为发酵开始28h、补料总量为1.5%时,最终发酵效价提高了81%。对达托霉素的工业化生产具有重要的指导意义。     

从发酵液中提取达托霉素的工艺优化

通过对迭托霉素发酵液预处理、溶剂萃取、结晶、干燥得到达托霉素粗品。确定了以pH值6．5～7．5的缓冲溶液作为浸提溶剂、加入5～8BV丙酮进行冷藏结晶的优化提取工艺。该工艺简单、经济,适合工业化生产。     

达托霉素的作用机制和药物来源的研究进展

达托霉素是一种环脂肽类抗生素,对耐药性革兰氏阳性细菌具有强大杀灭作用。本文详细介绍了达托霉素的作用机制,总结了其药物来源,分别对达托霉素的各种合成方法——前体诱导法、生物合成、固液相合成法及其类似物的全固相合成法和化学酶法进行了概述和比较。