反相高效液相色谱法快速测定竹节参中齐墩果酸的含量

建立高效液相色谱快速测定竹节参中齐敦果酸含量的方法。选用Kromasil C18柱(150 mm×4.6 mm,5μm),乙腈-水(93∶7)为流动相,流速1.0 m L/min,检测波长215 nm。结果表明,齐墩果酸在2.36~23.60μg/m L浓度与峰面积有良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率98.86%,RSD 0.41%(n=6)。本法简单易行、重复性好、结果准确,可为竹节参中药材的质量评价提供依据。     

珍稀药用植物竹节参SRAP-PCR反应体系的构建与优化

人参属重要的药用植物竹节参(Panax japonicus C.A.Mey)野生资源已近濒危,开展其遗传多样性研究对于资源保护和可持续利用具有重要意义。研究构建并优化了竹节参DNA的SRAP-PCR扩增体系。以竹节参根茎为材料,对PCR反应体系中的d NTPs、DNA模板、引物、Taq DNA聚合酶浓度和复性第二阶段的退火温度等条件进行探索和研究,得到了能稳定扩增竹节参基因组的最佳反应体系(25μl):DNA 40ng,d NTPs 0.2 mmol/L,Primer 0.36μmol/L,10×PCR Buffer 2.5 ul,Taq DNA polymerase 2U,退火温度50℃。进一步检测了随机组合的24对引物,进行扩增,得到了2对带型清楚、重复性较好的引物Me1/Em5和Me3/Em1。以这2对引物对10个不同产地竹节参DNA样品进行SRAP-PCR扩增。产物的电泳图谱表明,竹节参不同产地的DNA谱带多态性丰富,带型清晰,重复性好。说明建立的该SRAP-PCR反应体系稳定可靠,为利用SRAP分子标记技术研究竹节参的植物遗传多样性奠定了工作基础。     

基于UFLC-Triple TOF MS/MS技术分析竹节参中皂苷类成分

采用超快速液相色谱-三重四极杆飞行时间质谱技术对竹节参中皂苷类成分进行分析。采用色谱柱SynergiTM Hydro-RP 100 ?（2.0 mm×100 mm,2.5 μm）,以0.1%甲酸-水（A）-0.1%甲酸-乙腈（B）为流动相进行梯度洗脱;在电喷雾负离子扫描模式下采集数据。根据高分辨质谱提供的准分子离子和碎片离子的精确分子质量信息,结合标准品对照与参考相关文献数据,初步鉴定出53 种皂苷,包括18 种原人参二醇型、21 种原人参三醇型、10 种齐墩果烷型和4 种奥寇梯木醇型皂苷。本实验可为探索竹节参药材的药效物质基础和建立其药材品质的综合评价体系提供基础资料。     

竹节参总皂苷通过调节miR-34a/PPARα干预小鼠脂肪肝的作用研究

本文研究了竹节参总皂苷对小鼠脂肪肝的干预作用。应用高糖高脂饲料制备脂肪肝模型,同时采用灌胃的方法给予竹节参低剂量（50 mg/kg）和高剂量（100 mg/kg）处理,检测血清和肝脏中的相关指标,HE和油红O染色来检测小鼠肝脏组织病理学变化,进一步用Real-Time PCR检测肝组织miRNA及相关基因的转录水平,Western Blotting检测PPARα的表达情况。结果显示模型组的小鼠血清ALT的水平,肝脏组织的TG均高于正常组;HE和油红O染色发现模型组肝组织表现为脂肪样变,脂质明显沉积,提示脂肪肝模型成立。Real-Time PCR和Western Blotting检测,模型组的miR-34a、SREBP-1c和FASN的表达较正常组升高,而PPARα表达降低。与模型组相比,经过竹节参药物的干预后肝脏组织病理学变化明显改善,脂质沉积减少;ALT水平降低。因此竹节参总皂苷可能通过miR-34a靶向PPARα的信号通路发挥对小鼠脂肪肝的干预作用,这一发现为脂肪肝的预防与治疗提供有效参考。     

竹节参粗多糖的初步纯化工艺研究

先用乙醇对竹节参粗多糖进行分步醇沉以脱除色素,利用Sevag法、TCA法和木瓜蛋白酶法对其进行脱蛋白,以多糖回收率和蛋白损失率为考察指标,比较三种方法对竹节参粗多糖脱蛋白的效果.实验结果表明,进行5次醇沉,最终乙醇浓度为50%时沉淀出乳白色的粗多糖.Sevag法脱蛋白率80.5%,多糖回收率24%;TCA法脱蛋白率59.8%,多糖回收率47.3%;木瓜蛋白酶法脱蛋白率86.7%,多糖回收率为87.9%.可见,木瓜蛋白酶法能有效去除竹节参粗多糖中的蛋白质.     

高效液相色谱法定量分析竹节参中人参皂苷Rb_1的含量

用RP-HPLC测定竹节参中人参皂苷Rb1的含量,采用Venusil ABS C18色谱柱（250 mm×4.6 mm5,μm）,以乙腈-水（35∶65）为流动相,流速1 mL/min,检测波长203 nm。结果表明,人参皂苷Rb1在25～500μg/mL间线性关系良好（r=0.999 4）,平均加样回收率为99.64%,RSD=1.52%。该方法快速、准确、重现性好,可用于竹节参中人参皂苷Rb1的含量测定。     

竹节参提取物对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用

目的 研究竹节参60%乙醇提取物对小鼠急性酒精性肝损伤的保护作用。方法 将40只昆明种小鼠随机分为正常组、模型组、竹节参提取物高剂量组、竹节参提取物低剂量组、水飞蓟宾组;采用白酒灌胃的方式建立小鼠急性酒精性肝损伤模型。测定各组小鼠ALT、AST、TG含量水平,以及肝组织超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性,丙二醛(MDA)含量,光学显微镜观察小鼠肝脏病理变化,PCR技术检测SOD₁和GPX₁基因表达水平。结果 与正常组相比较,模型组小鼠肝脏出现明显脂肪变性,血清ALT、AST和TG的水平升高,肝脏SOD 和GSH-Px活性明显降低,同时MDA含量显著升高,差异具有统计学意义(P<0.05 或P<0.01);与模型组相比,竹节参提取物高、低剂量组和水飞蓟宾组均可降低ALT、AST和TG的含量;升高肝脏SOD和GSH-Px活性,同时降低MDA的含量;并且肝组织SOD₁和GPX₁基因的表达水平明显上调,差异具有统计学意义(P<0.05 或P<0.01)。结论 竹节参提取物对小鼠急性酒精性肝损伤有明显的保护作用,其机制可能是通过上调SOD₁和GPX₁的基因表达,从而减轻酒精诱导的氧化应激对肝脏的损伤。     

竹节参生物活性与质量控制研究进展

文章对竹节参的生物活性进行了归纳整理，包括对神经系统、消化系统、心脑血管系统、免疫系统、内分泌系统及其他系统的作用，分析了竹节参中的皂苷类、核苷类、多糖类及氨基酸成分的质量控制，并对其未来研究方向进行了展望。     

不同产地竹节参中7种皂苷含量测定及化学计量学评价

目的：建立UPLC法同时测定竹节参中7种皂苷含量,并结合化学计量学分析评价其质量。方法：采用ACQUITYUPLCBEHC18色谱柱(2.1mm×100mm,1.7μm),流动相为水(A)—乙腈(B),梯度淋洗;流速0.4mL/min,温度30℃,进样体积1μL,检测波长203nm。应用化学计量学中聚类分析、主成分分析及质量波动分析对含量测定结果进行识别,以分析不同产地竹节参药材间相似性及差异性。结果：7种皂苷(人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、竹节参皂苷Ⅴ、竹节参皂苷Ⅳ、竹节参皂苷Ⅳa与假人参皂苷RT1)在核定范围内线性关系良好(R2≥0.9994);平均加样回收率在99.00%~104.37%;人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rb1、竹节参皂苷Ⅴ、竹节参皂苷Ⅳ、竹节参皂苷Ⅳa与假人参皂苷RT1的含量范围分别为0.21~18.85,0.59~2.82,1.25~8.12,59.14~97.16,22.21~47.19,15.97~32.66,0.07~34.09mg/g。通过聚类分析和主成分分析可将9批竹节参样品分为3类,竹节参样品S6为Ⅰ类,S3、S7和S8为Ⅱ类,S1、S2、S4、S5和S9为Ⅲ类;通过质量波动分析发现人参皂苷Rg1与假人参皂苷RT1含量波动大。结论：竹节参中7种皂苷成分含量同时测定的UPLC法及化学计量学综合评价可用于竹节参的质量评价。     

竹节参总皂苷改善高脂高糖饮食小鼠的神经炎症及可能的机制

探索了竹节参总皂苷(saponins of Panax Japonicus,SPJ)对高脂高糖饮食诱导小鼠脑组织炎症反应的改善效果。Balb/c小鼠随机分为四组:正常对照组、模型对照组、SPJ低剂量组(16.7 mg/kg),SPJ高剂量组(50 mg/kg),分别给予普通饲料、高脂高糖饲料及添加不同剂量SPJ的高脂高糖饲料,喂养4个月。与正常对照组比较,模型对照组的皮层形态结构异常,细胞凋亡增多,小胶质细胞激活增加,炎症相关因子表达升高。给予竹节参总皂苷干预,可明显改善脑组织形态结构,减少细胞凋亡和小胶质细胞活化,减轻炎症相关因子iNOS、COX-2和IL-1β的蛋白表达,并抑制NLRP3炎症小体包括NLRP3、ASC、Caspase-1的表达。可见,竹节参总皂苷可具有改善高脂高糖饮食小鼠的脑组织炎症反应的效果,其机制可能与抑制NLRP3炎症小体的激活从而减少炎症因子表达有关。