植物乳杆菌天然质粒分类

为建立植物乳杆菌天然质粒分类方法,以质粒复制起始蛋白(replication initiation protein,Rep)作为分类标记,通过系统进化树分析方法,将植物乳杆菌53个编码Rep天然质粒划分为6个质粒类型,包括5个质粒家族和1个新的复制类型质粒,之后进一步提出了每个质粒家族特有的骨干序列,最终建立了一种简单、有效的植物乳杆菌天然质粒的分类方法和标准。与以往质粒功能和不相容性分类方法相比较,本方法具有较好的实用性和通用性。     

基于演化博弈论的p-坚持CSMA网络接入控制研究

考虑到存在无线信道差错,针对p-坚持CSMA网络的非合作系统行为,建立了p-坚持CSMA演化博弈模型,推导了唯一的演化稳定策略,以饱和吞吐量最大、平均能耗最小为目标求解了最优演化稳定策略。然后,进一步研究了收益时延、成功收益以及比特差错概率对最优演化稳定过程的影响。数值仿真结果表明,当比特差错概率一定、收益时延较小时,选择合适的成本和收益,使多路访问博弈在最优传输概率处演化稳定,可获得一个稳定且性能最优的p-坚持CSMA网络。     

甲病毒载体研究进展

甲病毒是一类能在宿主细胞的胞质内大量复制的RNA病毒。用外源基因替换结构蛋白基因的甲病毒载体,仍具有甲病毒的宿主感染谱广泛、能够自我复制、诱导被转染细胞发生凋亡等众多生物学特性,同时能够大量表达外源基因,激发机体产生高效的免疫反应,并不易与宿主基因组整合。甲病毒载体已被用于基因治疗和分子生物学领域的研究。     

乳酸乳球菌内源隐蔽性质粒序列分析及食品级克隆载体的构建

为构建乳酸菌食品级载体,对乳酸乳球菌内源隐蔽性质粒p KL001进行全序列测定、序列分析及PCR扩增,获得了该质粒的复制子。以Southern杂交对质粒p KL001复制模式进行分析,结果显示p KL001为θ型复制。将该复制子与镉抗性功能片段连接,构建了食品级克隆载体p KF168,其在受体菌株KLDS4.0319-5中可稳定存在。     

乳酸菌隐蔽性质粒pEV105复制子的鉴定

将Tnl541转座子的红霉素抗性rRNA甲基化酶基因克隆至pUCl9的EcoO109 I位点 ,构建成能够确定乳酸菌质粒复制子所在片段的复制检测载体pUB380.将乳酸菌隐蔽性质粒pEV105 3个酶切片断(4.5、3.5、3 kb)分别连接至此载体,并电转化至原宿主菌.试验结果显示,连接了3.5 kb片段的栽体能够使原宿主菌表达红霉素抗性的片段,即复制子所在片段.以Southern杂交对质粒pEV105复制模式进行分析.结果显示pEV105为O型复制.用400μg/mL吖啶橙对菌株KLDS6.0718处理50代后没有质粒丢失,说明pEVl05在宿主菌内十分稳定.该复制子在构建乳酸菌食品级克隆表达载体中可作为稳定的复制子使用.     

DNA表达载体构建及HIV多表位核酸疫苗的设计与表达

目的利用塞姆利基森林病毒(SFV)复制子构建新型真核表达载体,并对含HIV-1中国流行株B亚型核心蛋白p24及多表位MEG嵌合基因的核酸疫苗进行表达与鉴定。方法将含SFV复制子的元件从pSFV-MCS中切下,连入含CMV启动子及增强子的pIRESneo载体中,构建新型真核表达载体pCS,再将含HIV-1 MEGp24基因插入至pCS载体中,构建重组核酸疫苗pCS-MEGp24。用脂质体法将重组质粒转染入BHK-21细胞,进行表达产物的检测。结果间接免疫荧光检测显示,重组质粒转染的BHK-21细胞能有效表达HIV-1 MEGp24,并与HIV阳性血清反应。结论所构建的核酸疫苗可在BHK-21细胞系内进行表达,且MEGp24基因的表达蛋白具有特异性,为构建新型HIV-1中国流行株核酸疫苗的可行性提供了重要实验依据。     

辛德毕斯病毒载体的研究进展

辛德毕斯病毒(Sindbis virus,SINV)是一种具有广泛宿主嗜性的正链RNA病毒,能够在许多脊椎动物和无脊椎动物细胞中有效复制。其单股基因组RNA被分成两个开放阅读框(ORF),第1个ORF编码非结构蛋白,负责病毒RNA的转录和复制;第2个ORF在亚基因组启动子控制下编码病毒结构蛋白,负责病毒RNA的包裹和病毒粒子的组装。近年来,许多基于SINV的复制子载体已被开发,这些载体能够自我复制,但只有在与表达结构蛋白的辅助RNA共转染时,才能包装成病毒样粒子。目前,SINV复制子载体已广泛应用于疫苗开发和癌症基因治疗,能够激发有效的体液免疫和细胞免疫反应。本文就SINV载体的研究进展作一综述。     

西尼罗热疫苗的研究进展

西尼罗病毒感染可导致轻微或严重的疾病甚至死亡,对人畜健康危害较大。疫苗是预防西尼罗病毒感染的重要手段。近年来,西尼罗热疫苗的研究取得了重大进展,尤其是反向遗传学技术的应用进一步加快了其研发进程。本文就近几年西尼罗热疫苗的研究进展作一综述。     

短乳杆菌天然质粒分类

为建立短乳杆菌天然质粒分类方法,通过质粒复制起始蛋白（replication initiation protein,Rep）进化树和基因组共线性分析,将短乳杆菌51 个天然质粒可以准确、有效地划分为6?个家族类型和11?个亚家族类型,并在家族4质粒中发现了一种新的复制子类型。研究结果表明,质粒Rep进化树和基因组共线性分析都是短乳杆菌天然质粒有效的分类方法,分类结果为今后短乳杆菌天然质粒科学分类和理性应用提供了理论研究依据。